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Bt蛋白Cry1Ab、Cry1F及Cry3B对蚯蚓及其肠道微生物的影响

符号说明第4-8页
中文摘要第8-9页
Abstract第9页
1 前言第10-23页
    1.1 转基因植物及其发展状况第10-14页
        1.1.1 转基因植物概况第10-11页
        1.1.2 转基因植物的发展状况第11页
        1.1.3 转基因植物的优势第11-12页
        1.1.4 转基因植物存在的生态风险第12-14页
            1.1.4.1 转基因植物的基因飘移风险第12-13页
            1.1.4.2 转基因植物的靶标出现抗性的风险第13-14页
    1.2 转Bt植物及其对环境的影响第14-18页
        1.2.1 Bt蛋白及其杀虫原理第14页
        1.2.2 转Bt植物的发展第14-15页
        1.2.3 转Bt植物对非靶标生物的影响第15-16页
        1.2.4 转Bt植物对害虫天敌的影响第16-18页
    1.3 转Bt作物对土壤生态系统影响的研究进展第18-19页
        1.3.1 转Bt作物中的外源表达产物进入土壤的途径第18页
        1.3.2 Bt蛋白在土壤中的降解第18-19页
    1.4 蚯蚓的毒性试验在转基因植物生态安全评价中的应用第19-21页
        1.4.1 土壤环境对蚯蚓体内酶活性的影响第20-21页
        1.4.2 土壤环境对蚯蚓肠道微生物的影响第21页
        1.4.3 土壤环境对蚯蚓DNA的影响第21页
    1.5 选题依据与研究意义第21-23页
2 材料与方法第23-33页
    2.1 材料与试剂第23-24页
        2.1.1 供试蛋白第23页
        2.1.2 供试蚯蚓第23页
        2.1.3 供试土壤第23页
        2.1.4 主要试剂第23页
        2.1.5 主要仪器设备第23-24页
    2.2 实验方法第24-33页
        2.2.1 含有不同浓度Bt蛋白土壤的配制第24-25页
        2.2.2 蚯蚓酶活性的测定方法第25-29页
            2.2.2.1 样品前处理第25页
            2.2.2.2 总蛋白含量的测定(BCA法)第25-26页
            2.2.2.3 酶联免疫(ELISA)定量检测蚯蚓体内的Bt蛋白含量第26页
            2.2.2.4 超氧化物歧化酶(SOD)的测定第26-27页
            2.2.2.5 过氧化氢酶(CAT)的测定第27页
            2.2.2.6 过氧化物酶(POD)的测定第27-28页
            2.2.2.7 谷胱甘肽-S转移酶(GST)的测定第28页
            2.2.2.8 乙酰胆碱酯酶(AchE)的测定第28-29页
            2.2.2.9 纤维素酶的测定第29页
        2.2.3 DNA损伤实验第29-31页
            2.2.3.1 溶液的配制第30页
            2.2.3.2 蚯蚓体腔细胞的提取第30页
            2.2.3.3 单细胞凝胶电泳实验(彗星实验)第30-31页
        2.2.4 蚯蚓肠道微生物的测定第31-32页
            2.2.4.1 蚯蚓肠道微生物的获取第31-32页
            2.2.4.2 常用的Biolog生态板数据分析方法第32页
        2.2.5 数据分析方法第32-33页
3 结果与分析第33-47页
    3.1 三种不同浓度的Bt蛋白对蚯蚓体重、产卵数以及存活率的影响第33-34页
    3.2 Bt蛋白对蚯蚓生化反应指标的测定第34-43页
        3.2.1 Bt蛋白对蚯蚓体内的蛋白含量的影响第34-35页
        3.2.2 蚯蚓体内的Bt蛋白含量检测第35-36页
        3.2.3 Bt蛋白对蚯蚓体内的超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响第36-37页
        3.2.4 Bt蛋白对蚯蚓体内的过氧化氢酶(CAT)活性的影响第37-38页
        3.2.5 Bt蛋白对蚯蚓体内的过氧化物酶(POD)活性的影响第38-39页
        3.2.6 Bt蛋白对蚯蚓体内的谷胱甘肽-S转移酶(GST)活性的影响第39-40页
        3.2.7 Bt蛋白对蚯蚓体内的乙酰胆碱酯酶(AchE)活性的影响第40-41页
        3.2.8 Bt蛋白对蚯蚓体内的纤维素酶活性的影响第41-43页
    3.3 Bt蛋白对蚯蚓DNA损伤的鉴定第43-44页
    3.4 Bt蛋白对蚯蚓肠道微生物的影响第44-47页
        3.4.1 Bt蛋白对4种蚯蚓肠道微生物碳源利用率的影响第44页
        3.4.2 Bt蛋白对蚯蚓肠道微生物的多样性指数、均匀度指数及优势度指数的影响第44-47页
4 讨论第47-49页
    4.1 蚯蚓的生理指标的研究第47页
    4.2 Bt蛋白对蚯蚓体内酶活性的影响第47-48页
    4.3 Bt蛋白对蚯蚓体腔细胞DNA的影响第48页
    4.4 Bt蛋白对蚯蚓肠道微生物的影响第48-49页
5 结论第49-50页
参考文献第50-55页
致谢第55页

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