符号说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9页 |
1 前言 | 第10-23页 |
1.1 转基因植物及其发展状况 | 第10-14页 |
1.1.1 转基因植物概况 | 第10-11页 |
1.1.2 转基因植物的发展状况 | 第11页 |
1.1.3 转基因植物的优势 | 第11-12页 |
1.1.4 转基因植物存在的生态风险 | 第12-14页 |
1.1.4.1 转基因植物的基因飘移风险 | 第12-13页 |
1.1.4.2 转基因植物的靶标出现抗性的风险 | 第13-14页 |
1.2 转Bt植物及其对环境的影响 | 第14-18页 |
1.2.1 Bt蛋白及其杀虫原理 | 第14页 |
1.2.2 转Bt植物的发展 | 第14-15页 |
1.2.3 转Bt植物对非靶标生物的影响 | 第15-16页 |
1.2.4 转Bt植物对害虫天敌的影响 | 第16-18页 |
1.3 转Bt作物对土壤生态系统影响的研究进展 | 第18-19页 |
1.3.1 转Bt作物中的外源表达产物进入土壤的途径 | 第18页 |
1.3.2 Bt蛋白在土壤中的降解 | 第18-19页 |
1.4 蚯蚓的毒性试验在转基因植物生态安全评价中的应用 | 第19-21页 |
1.4.1 土壤环境对蚯蚓体内酶活性的影响 | 第20-21页 |
1.4.2 土壤环境对蚯蚓肠道微生物的影响 | 第21页 |
1.4.3 土壤环境对蚯蚓DNA的影响 | 第21页 |
1.5 选题依据与研究意义 | 第21-23页 |
2 材料与方法 | 第23-33页 |
2.1 材料与试剂 | 第23-24页 |
2.1.1 供试蛋白 | 第23页 |
2.1.2 供试蚯蚓 | 第23页 |
2.1.3 供试土壤 | 第23页 |
2.1.4 主要试剂 | 第23页 |
2.1.5 主要仪器设备 | 第23-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-33页 |
2.2.1 含有不同浓度Bt蛋白土壤的配制 | 第24-25页 |
2.2.2 蚯蚓酶活性的测定方法 | 第25-29页 |
2.2.2.1 样品前处理 | 第25页 |
2.2.2.2 总蛋白含量的测定(BCA法) | 第25-26页 |
2.2.2.3 酶联免疫(ELISA)定量检测蚯蚓体内的Bt蛋白含量 | 第26页 |
2.2.2.4 超氧化物歧化酶(SOD)的测定 | 第26-27页 |
2.2.2.5 过氧化氢酶(CAT)的测定 | 第27页 |
2.2.2.6 过氧化物酶(POD)的测定 | 第27-28页 |
2.2.2.7 谷胱甘肽-S转移酶(GST)的测定 | 第28页 |
2.2.2.8 乙酰胆碱酯酶(AchE)的测定 | 第28-29页 |
2.2.2.9 纤维素酶的测定 | 第29页 |
2.2.3 DNA损伤实验 | 第29-31页 |
2.2.3.1 溶液的配制 | 第30页 |
2.2.3.2 蚯蚓体腔细胞的提取 | 第30页 |
2.2.3.3 单细胞凝胶电泳实验(彗星实验) | 第30-31页 |
2.2.4 蚯蚓肠道微生物的测定 | 第31-32页 |
2.2.4.1 蚯蚓肠道微生物的获取 | 第31-32页 |
2.2.4.2 常用的Biolog生态板数据分析方法 | 第32页 |
2.2.5 数据分析方法 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-47页 |
3.1 三种不同浓度的Bt蛋白对蚯蚓体重、产卵数以及存活率的影响 | 第33-34页 |
3.2 Bt蛋白对蚯蚓生化反应指标的测定 | 第34-43页 |
3.2.1 Bt蛋白对蚯蚓体内的蛋白含量的影响 | 第34-35页 |
3.2.2 蚯蚓体内的Bt蛋白含量检测 | 第35-36页 |
3.2.3 Bt蛋白对蚯蚓体内的超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响 | 第36-37页 |
3.2.4 Bt蛋白对蚯蚓体内的过氧化氢酶(CAT)活性的影响 | 第37-38页 |
3.2.5 Bt蛋白对蚯蚓体内的过氧化物酶(POD)活性的影响 | 第38-39页 |
3.2.6 Bt蛋白对蚯蚓体内的谷胱甘肽-S转移酶(GST)活性的影响 | 第39-40页 |
3.2.7 Bt蛋白对蚯蚓体内的乙酰胆碱酯酶(AchE)活性的影响 | 第40-41页 |
3.2.8 Bt蛋白对蚯蚓体内的纤维素酶活性的影响 | 第41-43页 |
3.3 Bt蛋白对蚯蚓DNA损伤的鉴定 | 第43-44页 |
3.4 Bt蛋白对蚯蚓肠道微生物的影响 | 第44-47页 |
3.4.1 Bt蛋白对4种蚯蚓肠道微生物碳源利用率的影响 | 第44页 |
3.4.2 Bt蛋白对蚯蚓肠道微生物的多样性指数、均匀度指数及优势度指数的影响 | 第44-47页 |
4 讨论 | 第47-49页 |
4.1 蚯蚓的生理指标的研究 | 第47页 |
4.2 Bt蛋白对蚯蚓体内酶活性的影响 | 第47-48页 |
4.3 Bt蛋白对蚯蚓体腔细胞DNA的影响 | 第48页 |
4.4 Bt蛋白对蚯蚓肠道微生物的影响 | 第48-49页 |
5 结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-55页 |
致谢 | 第55页 |