| 缩略语表 | 第6-9页 |
| 中文摘要 | 第9-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 前言 | 第15-16页 |
| 文献回顾 | 第16-49页 |
| 一、基因表达调控 | 第16-19页 |
| 二、BAP31 | 第19-26页 |
| 三 ETS-1 | 第26-42页 |
| 四 基因的表观遗传学调控与肿瘤 | 第42-49页 |
| 第一部分 BAP31的转录调控研究 | 第49-83页 |
| 实验一 BAP31启动子的定位 | 第49-67页 |
| 1 材料 | 第49-50页 |
| 2 方法 | 第50-57页 |
| 2.1 人不同细胞系中基因组 DNA 的提取 | 第50页 |
| 2.2 引物设计 | 第50-52页 |
| 2.3 BAP31基因组 5’端调控区序列的获得 | 第52-53页 |
| 2.4 目的片段胶回收、酶切，载体去磷酸化 | 第53-54页 |
| 2.5 目的片段与 pGL3-basic 载体的连接 | 第54页 |
| 2.6 感受态DH5α的制备 | 第54-55页 |
| 2.7 连接产物的转化 | 第55页 |
| 2.8 采用质粒小提试剂盒行质粒DN 的少量提取 | 第55-56页 |
| 2.9 细胞转染 | 第56页 |
| 2.10 双荧光检测 | 第56-57页 |
| 2.11 统计学处理 | 第57页 |
| 3 结果 | 第57-65页 |
| 3.1 人基因组DNA的获得 | 第57-58页 |
| 3.2 含有BAP31启动子调控序列报告基因载体的构建及BAP31启动子的粗略定位 | 第58-62页 |
| 3.3 BAP31启动子区-163至481位截短体报告基因载体的构建及BAP31启动子的进一步定位 | 第62-63页 |
| 3.4 BAP31核心启动子的精确定位 | 第63-65页 |
| 4 讨论 | 第65-67页 |
| 实验二 转录因子ETS-1对BAP31启动子的调控 | 第67-78页 |
| 1 材料 | 第67页 |
| 2 方法 | 第67-72页 |
| 2.1 生物信息学分析BAP31启动子区可能的转录因子结合位点 | 第67-68页 |
| 2.2 不同转录因子对BAP31启动子转录活性的影响 | 第68页 |
| 2.3 过表达ETS-1对BAP31表达的影响 | 第68-71页 |
| 2.4. ETS-1缺失对BAP31表达的影响 | 第71-72页 |
| 3 结果 | 第72-76页 |
| 3.1 转录因子预测结果 | 第72-73页 |
| 3.2 不同转录因子对BAP31启动子活性的影响 | 第73-74页 |
| 3.3 在 Hela细胞中ETS-1、c-Jun可以上调BAP31启动子的活性 | 第74-75页 |
| 3.4 过表达 ETS-1 提高BAP31的mRNA及蛋白表达水平 | 第75-76页 |
| 3.5 ETS-1 下调降低BAP31的蛋白表达水平 | 第76页 |
| 4 讨论 | 第76-78页 |
| 实验三 BAP31的表观遗传学调控 | 第78-83页 |
| 1 材料方法 | 第78-81页 |
| 1.1 BAP31基因组CpG岛的预测 | 第78-80页 |
| 1.2 可能调控BAP31表达的miRNA预测 | 第80-81页 |
| 2 结果讨论 | 第81-83页 |
| 第二部分 基于异种HCG,SURVIVIN以及VEGFR2复合肿瘤基因疫苗的体内抑瘤效果评价 | 第83-92页 |
| 1 材料 | 第83-84页 |
| 2 方法 | 第84-85页 |
| 2.1 免疫途径及肿瘤细胞接种 | 第84页 |
| 2.2 瞬时转染实验及 Western blot | 第84页 |
| 2.3 ELISpot实验 | 第84页 |
| 2.4 H&E染色及免疫组化 | 第84-85页 |
| 2.5 统计分析 | 第85页 |
| 3 结果 | 第85-90页 |
| 3.1 DNA疫苗的蛋白表达 | 第85-86页 |
| 3.2 p-L/HSV DNA疫苗能有效诱导抗瘤免疫 | 第86-87页 |
| 3.3 抑制血管生成 | 第87-88页 |
| 3.4 p-L/HSV DNA疫苗可诱导产生长期的免疫保护作用 | 第88页 |
| 3.5 DNA疫苗无毒副作用 | 第88-90页 |
| 4. 讨论 | 第90-92页 |
| 小结 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-104页 |
| 个人简历和研究成果 | 第104-107页 |
| 致谢 | 第107页 |
