| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-35页 |
| 1.1 昆虫病毒 | 第12-16页 |
| 1.1.1 昆虫病毒的形态结构和分类 | 第13-14页 |
| 1.1.2 昆虫病毒的分子生物学 | 第14-15页 |
| 1.1.3 昆虫病毒的研究意义 | 第15-16页 |
| 1.2 昆虫小RNA病毒的研究进展 | 第16-22页 |
| 1.2.1 昆虫小RNA病毒的理化性质 | 第16页 |
| 1.2.2 昆虫小RNA病毒的基因组结构特征 | 第16-17页 |
| 1.2.3 昆虫小RNA病毒的蛋白质翻译 | 第17-20页 |
| 1.2.4 昆虫小RNA病毒的进化关系 | 第20-22页 |
| 1.3 茶尺蠖小RNA病毒的研究进展 | 第22-27页 |
| 1.4 RNA解旋酶的研究进展 | 第27-31页 |
| 1.5 RNA分子伴侣的研究进展 | 第31-33页 |
| 1.6 本课题的研究意义 | 第33-35页 |
| 2 茶尺蠖小RNA病毒非结构蛋白2C的原核表达与纯化 | 第35-51页 |
| 2.1 前言 | 第35-36页 |
| 2.2 材料与方法 | 第36-45页 |
| 2.2.1 材料 | 第36-37页 |
| 2.2.2 方法 | 第37-45页 |
| 2.3 结果 | 第45-49页 |
| 2.3.1 茶尺蠖小RNA病毒2C蛋白氨基酸的同源比对 | 第45页 |
| 2.3.2 茶尺蠖小RNA病毒2C蛋白的引物设计 | 第45页 |
| 2.3.3 茶尺蠖小RNA病毒2C蛋白结构模拟 | 第45-46页 |
| 2.3.4 克隆载体T-2C的构建 | 第46-47页 |
| 2.3.5 构建表达载体pET-28a-2C | 第47-48页 |
| 2.3.6 重组蛋白的表达及可溶性分析 | 第48-49页 |
| 2.4 讨论 | 第49-51页 |
| 3 茶尺蠖小RNA病毒非结构蛋白2C的真核表达与纯化分析 | 第51-68页 |
| 3.1 前言 | 第51-52页 |
| 3.2 材料与方法 | 第52-61页 |
| 3.2.1 材料 | 第52-53页 |
| 3.2.2 方法 | 第53-61页 |
| 3.3 结果 | 第61-66页 |
| 3.3.1 茶尺蠖小RNA病毒2C蛋白克隆与pFast载体的双酶切鉴定 | 第61-62页 |
| 3.3.2 重组转座质粒的酶切与PCR鉴定 | 第62页 |
| 3.3.3 重组杆状病毒的获取和PCR鉴定 | 第62-63页 |
| 3.3.4 正常细胞和感染细胞的形态对比 | 第63页 |
| 3.3.5 重组蛋白的SDS-PAGE和western-blot鉴定 | 第63-64页 |
| 3.3.6 突变体PCR、双酶切鉴定及重组杆状病毒的PCR鉴定 | 第64-65页 |
| 3.3.7 野生型及突变体2C蛋白的SDS-PAGE和western-blot杂交图 | 第65-66页 |
| 3.4 讨论 | 第66-68页 |
| 4 茶尺蠖小RNA病毒非结构蛋白2C的NTP酶活性研究 | 第68-77页 |
| 4.1 前言 | 第68-69页 |
| 4.2 材料与方法 | 第69-70页 |
| 4.2.1 材料 | 第69-70页 |
| 4.2.2 方法 | 第70页 |
| 4.3 结果 | 第70-75页 |
| 4.3.1 磷酸标准曲线的绘制 | 第70-71页 |
| 4.3.2 不同因素对MBP-2C蛋白NTP酶活性的影响 | 第71-74页 |
| 4.3.3 野生型MBP-2C蛋白与突变体蛋白ATPase活性的对比分析 | 第74-75页 |
| 4.4 讨论 | 第75-77页 |
| 5 茶尺蠖小RNA病毒非结构蛋白2C的解旋活性研究 | 第77-96页 |
| 5.1 前言 | 第77-78页 |
| 5.2 材料与方法 | 第78-82页 |
| 5.2.1 材料 | 第78页 |
| 5.2.2 方法 | 第78-82页 |
| 5.3 结果 | 第82-91页 |
| 5.3.1 MBP-2C蛋白解旋活性的确定及解旋双链的特异性分析 | 第82-83页 |
| 5.3.2 MBP-2C蛋白的解旋方向性分析 | 第83-85页 |
| 5.3.3 MBP-2C蛋白的解旋活性是否需要NTP参与的分析 | 第85-87页 |
| 5.3.4 二价金属阳离子对MBP-2C蛋白解旋活性的影响 | 第87-89页 |
| 5.3.5 pH值对MBP-2C蛋白解旋活性的影响 | 第89页 |
| 5.3.6 MBP-2C蛋白浓度对解旋反应的影响 | 第89-90页 |
| 5.3.7 MBP-2C突变蛋白对解旋活性的影响 | 第90-91页 |
| 5.3.8 MBP-2C蛋白对互补双链退火的影响 | 第91页 |
| 5.4 讨论 | 第91-96页 |
| 研究总结 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-109页 |
| 攻博期间发表和待发表的科研成果 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110页 |
