| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-22页 |
| 1.1 手性药物概述 | 第9-10页 |
| 1.1.1 手性药物的概念与药理立体选择性 | 第9页 |
| 1.1.2 手性药物的研究现状 | 第9-10页 |
| 1.2 手性醇在制药领域的应用及合成方法 | 第10-11页 |
| 1.2.1 手性醇在制药领域中的应用 | 第10页 |
| 1.2.2 手性醇的合成方法 | 第10-11页 |
| 1.3 微生物活性细胞催化不对称合成手性醇 | 第11-13页 |
| 1.3.1 微生物活性细胞催化不对称合成手性醇的特点 | 第11-12页 |
| 1.3.2 微生物活性细胞催化不对称合成手性醇的研究现状 | 第12-13页 |
| 1.4 酶法不对称还原合成手性醇 | 第13-17页 |
| 1.4.1 不对称还原羰基氧化还原酶概述 | 第14页 |
| 1.4.2 酶不对称还原合成手性醇反应机理 | 第14-15页 |
| 1.4.3 应用于手性醇合成的氧化还原酶 | 第15-16页 |
| 1.4.4 氧化还原酶的分离纯化方法 | 第16-17页 |
| 1.5 氧化还原酶生物信息学研究 | 第17-20页 |
| 1.5.1 蛋白质结构与功能生物信息学研究概述 | 第17-18页 |
| 1.5.2 蛋白质序列、结构与和功能的关系 | 第18页 |
| 1.5.3 蛋白质结构与功能生物信息学在氧化还原酶研究中的应用 | 第18-20页 |
| 1.6 本课题研究内容及研究思路 | 第20-22页 |
| 第二章 Microbacterium sp.羰基还原酶的分离纯化 | 第22-35页 |
| 2.1 前言 | 第22页 |
| 2.2 材料与方法 | 第22-23页 |
| 2.2.1 菌种与培养条件 | 第22-23页 |
| 2.2.2 实验药品 | 第23页 |
| 2.2.3 所使用的主要溶液 | 第23页 |
| 2.2.4 仪器设备 | 第23页 |
| 2.3 分离纯化方法 | 第23-25页 |
| 2.3.1 菌种的培养和收集 | 第23-24页 |
| 2.3.2 粗酶液制备 | 第24页 |
| 2.3.3 粗酶液透析浓缩 | 第24页 |
| 2.3.4 分级盐析 | 第24-25页 |
| 2.3.5 DEAE Sepharose Fast Flow 阴离子交换层析 | 第25页 |
| 2.3.6 SephadexG-75 凝胶过滤层析 | 第25页 |
| 2.4 分析检测 | 第25-28页 |
| 2.4.1 蛋白质浓度测定方法 | 第25-26页 |
| 2.4.2 酶活测定方法 | 第26-27页 |
| 2.4.3 全酶的分子量的确定 | 第27-28页 |
| 2.4.4 酶纯度以及亚基大小检测 | 第28页 |
| 2.5 结果与讨论 | 第28-34页 |
| 2.5.1 牛血清白蛋白标准曲线 | 第28-29页 |
| 2.5.2 硫酸铵分级盐析 | 第29-30页 |
| 2.5.3 DEAE Sepharose Fast Flow 阴离子交换层析结果 | 第30-31页 |
| 2.5.4 SephadexG-75 凝胶过滤层析结果 | 第31页 |
| 2.5.5 酶的纯化结果 | 第31-33页 |
| 2.5.6 酶的纯度检测结果 | 第33页 |
| 2.5.7 酶分子量的确定 | 第33-34页 |
| 2.6 小结 | 第34-35页 |
| 第三章 Microbacterium sp.羰基还原酶酶学性质研究 | 第35-42页 |
| 3.1 前言 | 第35页 |
| 3.2 材料与方法 | 第35-37页 |
| 3.2.1 菌种与培养条件 | 第35页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第35页 |
| 3.2.3 主要仪器 | 第35页 |
| 3.2.4 Microbacterium sp.羰基还原酶的制备 | 第35-36页 |
| 3.2.5 酶活测定方法 | 第36页 |
| 3.2.6 辅酶依赖性调查 | 第36页 |
| 3.2.7 pH 的影响 | 第36页 |
| 3.2.8 温度的影响 | 第36-37页 |
| 3.2.9 金属离子的影响 | 第37页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第37-41页 |
| 3.3.1 辅酶依赖性的确定 | 第37页 |
| 3.3.2 pH 的影响 | 第37-39页 |
| 3.3.3 温度的影响 | 第39-40页 |
| 3.3.4 金属离子的影响 | 第40-41页 |
| 3.4 小结 | 第41-42页 |
| 第四章 羰基还原酶的生物信息学初步研究 | 第42-55页 |
| 4.1 前言 | 第42页 |
| 4.2 数据库与分析研究方法 | 第42-46页 |
| 4.2.1 蛋白质数据库选取 | 第42-43页 |
| 4.2.2 羰基还原酶序列分析 | 第43-45页 |
| 4.2.3 羰基还原酶二级结构预测 | 第45-46页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第46-53页 |
| 4.3.1 羰基还原酶序列的检索 | 第46-47页 |
| 4.3.2 多序列比对与保守区的确定 | 第47-48页 |
| 4.3.3 活性位点分析 | 第48-49页 |
| 4.3.4 二级结构的预测 | 第49-53页 |
| 4.4 小结 | 第53-55页 |
| 第五章 结论与展望 | 第55-56页 |
| 5.1 结论 | 第55页 |
| 5.2 建议和展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 附录 攻读硕士期间发表的论文 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
