缩略语表 | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-15页 |
前言 | 第16-18页 |
文献回顾 | 第18-27页 |
1 S1 00A4 的基本特征 | 第18-22页 |
2 S100A4 在肿瘤中的作用 | 第22-25页 |
3 S100A4 在卵巢癌中的研究现状 | 第25-27页 |
实验一 S100A4 在卵巢癌细胞中的表达及与顺铂耐药的相关性 | 第27-46页 |
1 材料 | 第27-31页 |
1.1 细胞 | 第27页 |
1.2 主要仪器 | 第27-28页 |
1.3 主要试剂 | 第28-29页 |
1.4 主要试剂的配制 | 第29-31页 |
2 方法 | 第31-38页 |
2.1 细胞的复苏、传代培养及冻存 | 第31-32页 |
2.2 实时荧光定量 PCR 检测卵巢癌细胞中 S100A4 的表达 | 第32-34页 |
2.3 Western Blot 检测卵巢癌细胞中 S100A4 的表达 | 第34-36页 |
2.4 免疫细胞化学检测 S100A4 的表达及亚细胞定位 | 第36-37页 |
2.5 MTT 法检测卵巢癌细胞对顺铂的敏感性 | 第37页 |
2.6 统计学处理 | 第37-38页 |
3 结果 | 第38-44页 |
3.1 卵巢癌细胞株中 S100A4 的表达情况 | 第38页 |
3.2 MTT 法检测卵巢癌细胞对顺铂的敏感性 | 第38页 |
3.3 顺铂处理后 S100A4 的表达变化 | 第38-44页 |
4 讨论 | 第44-46页 |
实验二 S100A4 重组质粒及 SIRNA 对卵巢癌顺铂敏感性的影响 | 第46-66页 |
1 材料 | 第46-48页 |
1.1 细胞、菌种、载体及 siRNA | 第46页 |
1.2 主要试剂 | 第46-47页 |
1.3 主要仪器 | 第47页 |
1.4 主要试剂的配制 | 第47-48页 |
2 方法 | 第48-57页 |
2.1 S100A4-pEGFP-N1 重组质粒的构建 | 第48-53页 |
2.2 细胞转染 | 第53-54页 |
2.3 荧光显微镜下观察转染效率 | 第54页 |
2.4 Western Blot 检测转染后细胞中 S100A4 的表达 | 第54-56页 |
2.5 实时荧光定量 PCR 检测转染后细胞中 S100A4 的表达 | 第56页 |
2.6 G418 筛选稳定转染细胞株 | 第56-57页 |
2.7 MTT 法检测顺铂药物敏感性的变化 | 第57页 |
2.8 统计学处理 | 第57页 |
3 结果 | 第57-61页 |
3.1 S100A4 的过表达提高 A2780 细胞对顺铂的耐受性 | 第57-60页 |
3.2 S100A4 基因沉默提高 CP70 细胞对顺铂的敏感性 | 第60-61页 |
4 讨论 | 第61-66页 |
小结 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-75页 |
附录 | 第75-76页 |
个人简历和研究成果 | 第76-77页 |
致谢 | 第77页 |