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Tat-SmacN7融合肽对肿瘤细胞辐射增敏作用的研究

中文摘要第6-8页
Abstract第8-9页
前言第10-16页
第一章 Tat-SmacN7融合肽对食管癌细胞和非小细胞肺癌细胞的毒性和辐射增敏作用第16-36页
    1.1 实验材料第16-19页
        1.1.1 细胞株第16页
        1.1.2 主要试剂第16页
        1.1.3 主要试剂缓冲液的配制第16-18页
        1.1.4 细胞培养耗材第18页
        1.1.5 主要仪器设备第18-19页
    1.2 实验方法第19-25页
        1.2.1 多肽合成及纯化第19页
        1.2.2 操作前准备第19页
        1.2.3 细胞培养第19-21页
        1.2.4 Tat-SmacN7融合肽进入细胞的能力的检测第21-22页
        1.2.5 细胞克隆形成实验测Tat-SmacN7对肿瘤细胞的辐射增敏性第22-23页
        1.2.6 WST-1测定Tat-SmacN7药物毒性第23-24页
        1.2.7 流式细胞术检测细胞凋亡第24-25页
    1.3 实验结果第25-34页
        1.3.1 Tat-SmacN7融合蛋白的合成及纯化第25-27页
        1.3.2 Tat-SmacN7融合肽进入细胞的能力实验结果第27-28页
        1.3.3 Ec109细胞和H460两种细胞分别对照射的敏感性第28-29页
        1.3.4 Ec109细胞和H460两种细胞对Tat-SmacN7的敏感性第29-30页
        1.3.5 细胞克隆实验检测Tat-SmacN7对两种肿瘤细胞的辐射增敏作用第30-32页
        1.3.6 流式细胞术检测细胞凋亡评价Tat-SmacN7对肿瘤细胞的辐射增敏作用第32-34页
    1.4 讨论第34-36页
第二章 Tat-SmacN7 Ec109和 H460细胞放射增敏的作用机制第36-58页
    2.1 实验材料第36-43页
        2.1.1 细胞株第36页
        2.1.2 主要试剂第36-38页
        2.1.3 主要试剂缓冲液的配制第38-42页
        2.1.4 细胞培养耗材第42页
        2.1.5 主要仪器设备第42-43页
    2.2 实验方法第43-50页
        2.2.1 细胞的培养第43-44页
        2.2.2 免疫印迹(Western Blotting)检测Smac/DIABLO、XIAP等蛋白表达第44-46页
        2.2.3 RT-PCR检测caspase-3、-8和-9的mRNA表达第46-47页
        2.2.4 Bradford法测蛋白浓度第47页
        2.2.5 ELISA检测caspase-3、-8和-9的活性第47-48页
        2.2.6 细胞克隆实验观察z-VAD-fmk 对 SM-164放射增敏作用的影响第48-49页
        2.2.7 统计学方法第49-50页
    2.3 实验结果第50-55页
        2.3.1 肿瘤细胞内XIAP表达与Tat-SmacN7辐射增敏作用的关系第50-51页
        2.3.2 Tat-SmacN7的辐射增敏作用与caspase的活性和表达相关第51-53页
        2.3.3 caspase抑制剂抑制Tat-SmacN7的辐射增敏作用第53-55页
    2.4 讨论第55-58页
第三章 Tat-SmacN7抗肿瘤效应的体内实验第58-72页
    3.1 实验材料第58-63页
        3.1.1 动物、细胞第58页
        3.1.2 主要试剂第58页
        3.1.3 主要试剂缓冲液的配制第58-62页
        3.1.4 动物、细胞培养耗材第62页
        3.1.5 主要仪器设备第62-63页
    3.2 实验方法第63-67页
        3.2.1 多肽合成及纯化第63页
        3.2.2 操作前准备第63-64页
        3.2.3 细胞、动物培养第64页
        3.2.4 肿瘤细胞体内致瘤性实验第64-65页
        3.2.5 组织总蛋白的提取第65页
        3.2.6 SDS-PAGE凝胶电泳第65-66页
        3.2.7 统计学处理第66-67页
    3.3 实验结果第67-70页
        3.3.1 Tat-SmacN7联合γ射线对食管癌Ec109细胞裸鼠移植瘤体积的影响第67-68页
        3.3.2 Tat-SmacN7联合γ射线对食管癌Ec109细胞裸鼠体重的影响第68-69页
        3.3.3 不同处理组瘤组织中Smac、XIAP的蛋白表达第69-70页
    3.4 讨论第70-72页
结论与展望第72-73页
参考文献第73-79页
综述第79-90页
    参考文献第86-90页
缩略词表第90-92页
在读期间第一作者发表的论文第92-93页
致谢第93-95页

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