| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-26页 |
| 1.1 大肠杆菌生长 | 第9-12页 |
| 1.1.1 影响大肠杆菌生长的因素 | 第9-11页 |
| 1.1.2 大肠杆菌生长的表观 | 第11-12页 |
| 1.2 大肠杆菌氮源同化 | 第12-16页 |
| 1.2.1 细胞对不同氨浓度的响应 | 第12-13页 |
| 1.2.2 PII蛋白介导的谷氨酰胺合成酶的活性调节 | 第13-15页 |
| 1.2.3 鲁棒条件下AT/AR介导的GS活性的调节 | 第15-16页 |
| 1.3 氨基酸 | 第16-19页 |
| 1.3.1 氨基酸概述 | 第16-17页 |
| 1.3.2 氨基酸的生物合成 | 第17-18页 |
| 1.3.3 氨基酸的利用 | 第18-19页 |
| 1.4 relA与ppGpp | 第19-22页 |
| 1.4.1 relA与ppGpp关系 | 第19页 |
| 1.4.2 ppGpp的作用机制 | 第19-22页 |
| 1.5 Red重组系统 | 第22-24页 |
| 1.6 本文的研究目的及内容 | 第24-26页 |
| 第2章 材料与方法 | 第26-34页 |
| 2.1 材料 | 第26-29页 |
| 2.1.1 菌种与质粒 | 第26页 |
| 2.1.2 引物 | 第26-27页 |
| 2.1.3 培养基 | 第27页 |
| 2.1.4 培养条件 | 第27页 |
| 2.1.5 试剂以及仪器 | 第27-29页 |
| 2.2 方法 | 第29-34页 |
| 2.2.1 大肠杆菌生长监测 | 第29页 |
| 2.2.2 嘧啶核苷磷酸化酶(PyNPase)及嘌呤核苷磷酸化酶(PNPase)的酶活测定 | 第29-33页 |
| 2.2.3 其它分子生物学操作 | 第33-34页 |
| 第3章 有机氮源促进菌体生长及蛋白表达研究 | 第34-44页 |
| 3.1 条件的确立 | 第34-37页 |
| 3.1.1 氮源限制培养基的设计 | 第34-35页 |
| 3.1.2 摇床转速影响 | 第35页 |
| 3.1.3 有机氮与无机氮生长相当条件的确立 | 第35-37页 |
| 3.2 微生物分别在有机氮源和无机氮源中生长过程 | 第37-38页 |
| 3.3 有机氮源促进重组蛋白表达 | 第38-42页 |
| 3.3.1 重组蛋白表达的定量 | 第38页 |
| 3.3.2 多种条件下有机氮源与无机氮源蛋白表达差异微弱 | 第38-40页 |
| 3.3.3 一定条件下有机氮源促重组进蛋白表达 | 第40-42页 |
| 3.4 本章小结 | 第42-44页 |
| 第4章 合成培养基中氨基酸对生长及重组蛋白表达的影响 | 第44-53页 |
| 4.1 氨基酸对大肠杆菌生长的影响 | 第44-50页 |
| 4.1.1 单一氨基酸作氮源时对大肠杆菌生长影响 | 第44-47页 |
| 4.1.2 无机氮条件下氨基酸促进大肠杆菌生长 | 第47-48页 |
| 4.1.3 氨基酸互配时能促进大肠杆菌生长 | 第48-50页 |
| 4.2 氨基酸能促进对大肠杆菌重组蛋白的表达 | 第50-51页 |
| 4.3 本章小结 | 第51-53页 |
| 第5章 relA基因在大肠杆菌生长及外源蛋白表达方面作用的研究 | 第53-63页 |
| 5.1 ΔrelA E.coli BL21构建 | 第53-54页 |
| 5.2 ΔrelA E.coli BL21菌株生长特性 | 第54-55页 |
| 5.2.1 有机氮源条件下ΔrelA E.coli BL21生长情况 | 第54页 |
| 5.2.2 无机氮条件下敲除菌生长特性 | 第54-55页 |
| 5.3 氨基酸对敲除菌株生长的影响 | 第55-61页 |
| 5.3.1 敲除菌利用氨基酸作唯一氮源时生长情况 | 第55-58页 |
| 5.3.2 无机氮条件下氨基酸对大肠杆菌生长促进作用依赖于relA | 第58-59页 |
| 5.3.3 氨基酸互配时对生长促进作用部分依赖于relA | 第59-61页 |
| 5.4 relA基因对大肠杆菌外源蛋白表达的影响 | 第61页 |
| 5.4.1 重组突变株的构建 | 第61页 |
| 5.4.2 LB培养基中relA基因的缺失不利于重组蛋白的表达 | 第61页 |
| 5.5 本章小结 | 第61-63页 |
| 第6章 结论与展望 | 第63-65页 |
| 6.1 结论 | 第63页 |
| 6.2 展望 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
