| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 本文缩略词 | 第11-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-23页 |
| 1. 真菌多糖的研究进展 | 第13-19页 |
| 2. 多糖杭肿瘤机制研究进展 | 第19-22页 |
| 3. 本论文的研究目的及其意义 | 第22-23页 |
| 第二章 黑根霉胞外多糖的分离纯化与结构解析 | 第23-47页 |
| 1. 实验材料与仪器 | 第23-24页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第23-24页 |
| 1.2 实验仪器 | 第24页 |
| 2. 实验方法 | 第24-29页 |
| 2.1 黑根霉的培养 | 第24-25页 |
| 2.2 黑根霉胞外多糖的提取 | 第25页 |
| 2.3 粗多糖总糖含量测定 | 第25页 |
| 2.4 黑根霉胞外多糖的分离纯化 | 第25-26页 |
| 2.4.1 阴离子交换层析 | 第25-26页 |
| 2.4.2 葡集糖凝胶柱层析 | 第26页 |
| 2.5 EPS1-1、EPS-2理化性质分析 | 第26-27页 |
| 2.5.1 EPS1-1、EPS-2总糖含量的测定 | 第26页 |
| 2.5.2 蛋白质含量测定 | 第26-27页 |
| 2.5.3 糖醛酸的检测 | 第27页 |
| 2.5.4 碘-碘化钾反应 | 第27页 |
| 2.6 两种纯化组分纯度以及分子量测定 | 第27-28页 |
| 2.7 两种多糖单糖组成分析 | 第28页 |
| 2.8 红外光谱分析 | 第28页 |
| 2.9 核磁共振波谱分析 | 第28页 |
| 2.10 EPS1-1的甲基化分析 | 第28-29页 |
| 3. 实验结果 | 第29-44页 |
| 3.1 黑根霉胞外多糖的提取 | 第29-30页 |
| 3.2 黑根霉胞外粗糖的糖含量测定 | 第30页 |
| 3.3 DEAE Sepharose Fast Flow初步分离 | 第30页 |
| 3.4 葡聚糖凝胶进一步纯化 | 第30-33页 |
| 3.4.1 SephadexG-100柱层析结果 | 第30-32页 |
| 3.4.2 EPS1-1过SephadexG-75进一步纯化 | 第32-33页 |
| 3.5 EPS1-1、EPS-2理化性质分析 | 第33-34页 |
| 3.5.1 EPS1-1、EPS-2总糖含量测定 | 第33页 |
| 3.5.2 EPS1-1、EPS-2蛋白质含量测定 | 第33页 |
| 3.5.3 EPS1-1、EPS-2糖醛酸含量测定 | 第33-34页 |
| 3.5.4 碘-碘化钾反应 | 第34页 |
| 3.6 EPS1-1、EPS-2的纯度及分子量测定 | 第34-35页 |
| 3.7 EPS1-1、EPS-2单糖组成分析 | 第35-37页 |
| 3.8 红外光潜分析 | 第37-39页 |
| 3.9 核磁共振波谱分析结果 | 第39-42页 |
| 3.9.1 EPS1-1核磁共振波谱分析结果 | 第39-41页 |
| 3.9.2 EPS-2核磁共振波谱分析结果 | 第41-42页 |
| 3.10 EPS1-1的甲基化分析 | 第42-44页 |
| 4. 讨论与小结 | 第44-47页 |
| 第三章 黑根霉胞外多糖抗肿瘤活性研究 | 第47-65页 |
| 1. 实验材料与仪器 | 第47-48页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第47-48页 |
| 1.2 实验仪器 | 第48页 |
| 2. 实验方法 | 第48-53页 |
| 2.1 肿瘤细胞的培养 | 第48页 |
| 2.2 体外抗肿瘤增殖活性筛选 | 第48-49页 |
| 2.3 EPS1-1抑制肿瘤细胞HCT-116增殖的机制研究 | 第49-53页 |
| 2.3.1 形态学变化 | 第49页 |
| 2.3.2 EPS1-1对细胞周期的影响 | 第49页 |
| 2.3.3 EPS1-1对细胞凋亡的影响 | 第49-50页 |
| 2.3.4 细胞内活性氧的检测 | 第50页 |
| 2.3.5 线粒体膜电位检测 | 第50-51页 |
| 2.3.6 RT-PCR检测凋亡相关基因表达 | 第51-53页 |
| 2.4 数据统计处理 | 第53页 |
| 3. 实验结果 | 第53-61页 |
| 3.1 两种纯化多糖体外抗肿瘤活性筛选 | 第53-54页 |
| 3.1.1 EPS1-1对K562,Hela,HCT-116细胞增殖的影响 | 第53页 |
| 3.1.2 EPS-2对K562,Hela,HCT-116细胞增殖的影响 | 第53-54页 |
| 3.2 EPS1-1抑制HCT-116细胞增殖的作用机制研究 | 第54-61页 |
| 3.2.1 形态学变化 | 第54-55页 |
| 3.2.2 EPS1-1对细胞周期分布的影响 | 第55-56页 |
| 3.2.3 EPS1-1对细胞凋亡的影响 | 第56-58页 |
| 3.2.4 EPS1-1处理HCT-116后线粒体膜电位的变化 | 第58-59页 |
| 3.2.5 EPS1-1对细胞内活性氧变化的影响 | 第59-60页 |
| 3.2.6 EPS1-对HCT-116细胞p53、Bcl-2、Bax表达量的影响 | 第60-61页 |
| 4 讨论与小结 | 第61-65页 |
| 结论与展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第77-78页 |
| 附件 | 第78页 |
