| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 引言 | 第8-19页 |
| 1.1 热激蛋白简介 | 第8-9页 |
| 1.2 HSP70简介 | 第9-15页 |
| 1.2.1 热激蛋白HSP70的分类 | 第9-10页 |
| 1.2.2 HSP70的结构及其分子功能 | 第10-12页 |
| 1.2.3 热激蛋白HSP70的转录,表达及调控 | 第12-14页 |
| 1.2.4 HSP70的生理功能 | 第14-15页 |
| 1.3 HSP70在海洋生物中的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.3.1 HSP70与珊瑚热胁迫 | 第15-17页 |
| 1.3.2 HSP70在其他海洋生物中的研究 | 第17-18页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第18-19页 |
| 2 材料及方法 | 第19-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 实验生物 | 第19页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第19-21页 |
| 2.1.3 实验设备 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-31页 |
| 2.2.1 鹿角杯形珊瑚组织总RNA的制备 | 第21-22页 |
| 2.2.2 RACE PCR扩增PdHSP70基因全长 | 第22-23页 |
| 2.2.3 PdHSP70荧光实时定量PCR | 第23-24页 |
| 2.2.4 PdHSP70 ORF基因扩增 | 第24-25页 |
| 2.2.5 重组表达载体的构建 | 第25-26页 |
| 2.2.6 PdHSP70重组蛋白的表达 | 第26-28页 |
| 2.2.7 PdHSP70重组蛋白的纯化 | 第28-29页 |
| 2.2.8 重组蛋白的复性 | 第29页 |
| 2.2.9 重组蛋白浓度测定 | 第29页 |
| 2.2.10 重组蛋白ATPase活性测定 | 第29-31页 |
| 3 实验结果 | 第31-42页 |
| 3.1 鹿角杯形珊瑚RNA及cDNA文库的制备 | 第31-32页 |
| 3.2 PdHSP70基因的分子特征 | 第32-37页 |
| 3.2.1 PdHSP70基因序列分析 | 第32-33页 |
| 3.2.2 PdHSP70分子量及等电点分析 | 第33-34页 |
| 3.2.3 PdHSP70蛋白结构域预测 | 第34页 |
| 3.2.4 PdHSP70蛋白质功能位点分析预测 | 第34-35页 |
| 3.2.5 PdHSP70信号肽预测 | 第35页 |
| 3.2.6 PdHSP70跨膜区预测 | 第35-36页 |
| 3.2.7 PdHSP70的亚细胞定位预测 | 第36页 |
| 3.2.8 PdHSP70蛋白三维结构预测 | 第36-37页 |
| 3.3 PdHSP70的同源性分析 | 第37-38页 |
| 3.4 热胁迫条件下PdHSP70基因的表达变化 | 第38-39页 |
| 3.4.1 荧光实时定量RT-PCR引物分析 | 第38页 |
| 3.4.2 热胁迫条件下PdHSP70的基因表达水平 | 第38-39页 |
| 3.5 原核表达载体的构建 | 第39页 |
| 3.6 重组HSP70的重组表达及纯化 | 第39-40页 |
| 3.7 HSP70重组蛋白浓度测定 | 第40-41页 |
| 3.8 HSP70重组蛋白的ATPase活性测定 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-45页 |
| 4.1 PdHSP70的分子特征 | 第42页 |
| 4.2 热胁迫能诱导PdHSP70基因的转录表达 | 第42-44页 |
| 4.3 热胁迫下PdHSP70能维持稳定的生物学活性 | 第44-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-55页 |
| 已完成和发表的论文 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
