摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
上篇 文献综述 | 第10-29页 |
第一章 我国作物孢囊线虫研究概述 | 第11-17页 |
1 禾谷孢囊线虫 | 第11-13页 |
2 菲利普孢囊线虫 | 第13-14页 |
3 大豆孢囊线虫 | 第14-15页 |
4 旱稻孢囊线虫 | 第15-16页 |
5 甜菜孢囊线虫 | 第16-17页 |
第二章 孢囊线虫分子检测研究概述 | 第17-23页 |
1 基于基因组DNA的随机扩增多态性DNA技术 | 第17-18页 |
2 基于核糖体DNA的限制性片段长度多态性技术 | 第18-19页 |
3 特异性引物PCR扩增技术 | 第19-20页 |
4 实时荧光定量PCR技术 | 第20页 |
5 LAMP技术 | 第20-21页 |
6 DNA条形码 | 第21页 |
7 微卫星DNA标记技术 | 第21-23页 |
第三章 微卫星分子标记及其应用 | 第23-29页 |
1 微卫星的多态性和产生机制 | 第23-26页 |
2 微卫星的开发策略 | 第26-27页 |
3 微卫星的应用 | 第27-28页 |
4 微卫星在线虫中的应用 | 第28-29页 |
下篇 研究内容 | 第29-59页 |
第一章 基于线粒体DNA-COI序列的禾谷孢囊线虫和菲利普孢囊线虫双重PCR检测 | 第31-47页 |
1 材料与方法 | 第32-37页 |
1.1 供试线虫 | 第32-33页 |
1.2 孢囊的分离及2龄幼虫的孵化 | 第33-34页 |
1.3 线虫DNA的提取 | 第34页 |
1.4 基于COI序列设计孢囊线虫特异性引物 | 第34-35页 |
1.5 单组及双重PCR反应条件的优化 | 第35页 |
1.6 单组PCR及双重PCR特异性检测 | 第35-36页 |
1.7 双重PCR灵敏度检测 | 第36页 |
1.8 双重PCR鉴定我国黄淮麦区禾谷类作物孢囊线虫CCN种类 | 第36-37页 |
2 结果与分析 | 第37-45页 |
2.1 特异性引物的设计和筛选 | 第37页 |
2.2 单组及双重PCR反应条件的优化 | 第37-40页 |
2.3 单组PCR特异性检测 | 第40-41页 |
2.4 双重PCR特异性检测 | 第41-42页 |
2.5 双重PCR灵敏度检测 | 第42-44页 |
2.6 我国黄淮麦区CCN种类的双重PCR检测 | 第44-45页 |
3 讨论 | 第45-47页 |
第二章 基于EST数据库开发禾谷孢囊线虫的微卫星标记 | 第47-59页 |
1 材料与方法 | 第49-51页 |
1.1 供试线虫 | 第49页 |
1.2 孢囊的分离 | 第49页 |
1.3 孢囊DNA的提取 | 第49-50页 |
1.4 禾谷孢囊线虫的双重PCR鉴定 | 第50页 |
1.5 微卫星引物的设计 | 第50页 |
1.6 微卫星引物的筛选 | 第50-51页 |
1.7 引物的验证 | 第51页 |
1.8 数据分析 | 第51页 |
2 结果分析 | 第51-58页 |
2.1 单孢囊DNA提取结果 | 第51-52页 |
2.2 双重PCR分子检测 | 第52页 |
2.3 微卫星标记引物的开发 | 第52-54页 |
2.4 引物的验证分析 | 第54-58页 |
3 讨论 | 第58-59页 |
全文结论 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-73页 |
附录 | 第73-79页 |
攻读硕士学位期间发表的文章 | 第79-81页 |
致谢 | 第81页 |