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大麦黄矮病毒PAV株系CP与GFP融合基因构建和原核表达及其抗血清制备

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-10页
第一章 文献综述第10-21页
   ·大麦黄矮病的生物学特性第10-12页
   ·大麦黄矮病毒的基因组结构特征和基因功能第12-15页
     ·与复制有关的蛋白第13页
     ·与结构有关的蛋白第13-14页
     ·与运动有关的蛋白第14-15页
     ·P6 蛋白第15页
     ·其他蛋白第15页
   ·昆虫传播植物病毒种类第15-18页
   ·蚜虫传播大麦黄矮病毒循环型过程第18-20页
   ·本研究的目的和意义第20-21页
第二章 试验材料与方法第21-33页
   ·试验材料第21页
     ·植物材料第21页
     ·菌种和质粒第21页
   ·试剂与仪器第21-22页
     ·试剂第21页
     ·仪器第21-22页
     ·培养基及各种缓冲液配制第22页
   ·方法第22-33页
     ·BYDV PAV 株系CP 基因的获得第22-26页
     ·GFP 基因的获得第26-27页
     ·CP 与GFP 融合基因的构建第27-28页
     ·稀有密码子及蛋白的理化性质分析第28页
     ·CP-GFP 的原核表达第28-29页
     ·诱导表达蛋白的SDS-PAGE 分析第29-30页
     ·诱导菌液的荧光显微镜的观察第30页
     ·表达蛋白的Western Blotting 检测第30-31页
     ·CP-GFP 融合蛋白纯化和抗血清制备第31-32页
     ·多克隆抗体的效价测定第32-33页
第三章 结果与分析第33-39页
   ·RNA 的提取第33页
   ·BYDV PAV 株系CP 基因的克隆第33-34页
   ·GFP 基因的克隆第34页
   ·CP 与GFP 的融合构建第34-35页
   ·CP-GFP 融合基因的稀有密码子预测第35-36页
   ·CP-GFP 融合蛋白的理化性质分析第36页
   ·CP-GFP 基因在大肠杆菌中表达的检测结果第36-37页
   ·荧光显微镜的观察结果第37页
   ·Western blot 分析结果第37-38页
   ·琼脂双扩结果第38-39页
第四章 结论与讨论第39-42页
   ·结论第39页
   ·讨论第39-42页
     ·对原核表达载体的构建应注意事项第39页
     ·原核载体在E.coli 中的诱导表达应注意事项第39-40页
     ·对于重叠延伸PCR 的应用第40页
     ·关于病毒样品的保存应注意第40页
     ·对于荧光显微镜的观察应注意第40页
     ·稀有密码子的预测第40页
     ·根据蛋白理化性质预测结果应注意第40-41页
     ·对于抗体制备的方法第41页
     ·试剂配制时应注意第41-42页
参考文献第42-47页
英文缩略表第47-48页
附表第48-49页
致谢第49-50页
作者简介第50页
硕士期间发表论文第50页

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