摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-21页 |
·大麦黄矮病的生物学特性 | 第10-12页 |
·大麦黄矮病毒的基因组结构特征和基因功能 | 第12-15页 |
·与复制有关的蛋白 | 第13页 |
·与结构有关的蛋白 | 第13-14页 |
·与运动有关的蛋白 | 第14-15页 |
·P6 蛋白 | 第15页 |
·其他蛋白 | 第15页 |
·昆虫传播植物病毒种类 | 第15-18页 |
·蚜虫传播大麦黄矮病毒循环型过程 | 第18-20页 |
·本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
第二章 试验材料与方法 | 第21-33页 |
·试验材料 | 第21页 |
·植物材料 | 第21页 |
·菌种和质粒 | 第21页 |
·试剂与仪器 | 第21-22页 |
·试剂 | 第21页 |
·仪器 | 第21-22页 |
·培养基及各种缓冲液配制 | 第22页 |
·方法 | 第22-33页 |
·BYDV PAV 株系CP 基因的获得 | 第22-26页 |
·GFP 基因的获得 | 第26-27页 |
·CP 与GFP 融合基因的构建 | 第27-28页 |
·稀有密码子及蛋白的理化性质分析 | 第28页 |
·CP-GFP 的原核表达 | 第28-29页 |
·诱导表达蛋白的SDS-PAGE 分析 | 第29-30页 |
·诱导菌液的荧光显微镜的观察 | 第30页 |
·表达蛋白的Western Blotting 检测 | 第30-31页 |
·CP-GFP 融合蛋白纯化和抗血清制备 | 第31-32页 |
·多克隆抗体的效价测定 | 第32-33页 |
第三章 结果与分析 | 第33-39页 |
·RNA 的提取 | 第33页 |
·BYDV PAV 株系CP 基因的克隆 | 第33-34页 |
·GFP 基因的克隆 | 第34页 |
·CP 与GFP 的融合构建 | 第34-35页 |
·CP-GFP 融合基因的稀有密码子预测 | 第35-36页 |
·CP-GFP 融合蛋白的理化性质分析 | 第36页 |
·CP-GFP 基因在大肠杆菌中表达的检测结果 | 第36-37页 |
·荧光显微镜的观察结果 | 第37页 |
·Western blot 分析结果 | 第37-38页 |
·琼脂双扩结果 | 第38-39页 |
第四章 结论与讨论 | 第39-42页 |
·结论 | 第39页 |
·讨论 | 第39-42页 |
·对原核表达载体的构建应注意事项 | 第39页 |
·原核载体在E.coli 中的诱导表达应注意事项 | 第39-40页 |
·对于重叠延伸PCR 的应用 | 第40页 |
·关于病毒样品的保存应注意 | 第40页 |
·对于荧光显微镜的观察应注意 | 第40页 |
·稀有密码子的预测 | 第40页 |
·根据蛋白理化性质预测结果应注意 | 第40-41页 |
·对于抗体制备的方法 | 第41页 |
·试剂配制时应注意 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-47页 |
英文缩略表 | 第47-48页 |
附表 | 第48-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
作者简介 | 第50页 |
硕士期间发表论文 | 第50页 |