| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 绪论 | 第11-16页 |
| 1.1 课题来源、研究目的和意义 | 第11-12页 |
| 1.1.1 课题来源 | 第11页 |
| 1.1.2 研究目的 | 第11-12页 |
| 1.1.3 研究意义 | 第12页 |
| 1.2 国内外研究概况 | 第12-15页 |
| 1.2.1 国外研究 | 第12-13页 |
| 1.2.2 国内研究 | 第13-15页 |
| 1.3 论文主要研究内容 | 第15-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-23页 |
| 2.1 研究资料及仪器设备 | 第16-18页 |
| 2.1.1 研究对象 | 第16-17页 |
| 2.1.2 主要仪器与试剂 | 第17-18页 |
| 2.2 研究方法 | 第18-23页 |
| 2.2.1 ELISA检测人肝癌外周血Wnt3a表达 | 第18页 |
| 2.2.2 免疫组织化学分析 | 第18-19页 |
| 2.2.3 细胞复苏﹑培养和冻存 | 第19页 |
| 2.2.4 细胞计数和细胞活力检测 | 第19-20页 |
| 2.2.5 Crispr/cas9-sgRNA双载体慢病毒构建、感染及筛选 | 第20页 |
| 2.2.6 Surveyor法验证基因敲除效率 | 第20-21页 |
| 2.2.7 细胞蛋白分析 | 第21-22页 |
| 2.2.8 CCK-8 法检测细胞增殖 | 第22页 |
| 2.2.9 统计学分析 | 第22-23页 |
| 第三章 结果 | 第23-35页 |
| 3.1 血清Wnt3a在良、恶性肝病中的诊断价值 | 第23页 |
| 3.2 HCC血清Wnt3a表达与临床病理学特征的相关性 | 第23-24页 |
| 3.3 Wnt3a诊断HCC的临床评价 | 第24-26页 |
| 3.4 Wnt3a在肝癌组织中的诊断价值 | 第26-27页 |
| 3.5 肝癌组织Wnt3a表达与HCC临床分期关系 | 第27页 |
| 3.6 肝癌组织Wnt3a表达的临床病理学特征 | 第27-28页 |
| 3.7 肝癌组织Wnt3a高表达与预后相关性 | 第28-30页 |
| 3.8 Crispr/cas9-sgRNA慢病毒感染及其筛选 | 第30-31页 |
| 3.9 基因水平验证敲除效率 | 第31-32页 |
| 3.10 蛋白水平验证敲除效率 | 第32页 |
| 3.11 敲除Wnt3a影响Wnt信号通路下游关键蛋白的表达 | 第32-33页 |
| 3.12 敲除Wnt3a抑制HepG2细胞增殖活性 | 第33-35页 |
| 第四章 讨论 | 第35-37页 |
| 第五章 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 综述 | 第42-52页 |
| 综述参考文献 | 第49-52页 |
| 攻读硕士学位期间公开发表的论文与参加的项目 | 第52-55页 |
| A: 国内、外专业刊物上正式发表论文 | 第52-53页 |
| B: 国际学术会议上发表论文 | 第53-54页 |
| C: 所参加的项目 | 第54页 |
| D: 参加主办国家级医学继续教育项目 | 第54页 |
| E: 国家发明专利申报 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
