摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
缩略语 | 第7-11页 |
第一章 前言 | 第11-21页 |
1.1 日本三角涡虫概述 | 第11-12页 |
1.2 日本三角涡虫再生研究进展 | 第12-16页 |
1.3 Spsb基因的研究进展 | 第16-18页 |
1.3.1 Spsb蛋白的结构 | 第16页 |
1.3.2 Spsb基因的功能 | 第16-18页 |
1.4 立题依据与意义 | 第18-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-49页 |
2.1 材料 | 第21-26页 |
2.1.1 涡虫的采集与培养 | 第21页 |
2.1.2 实验仪器 | 第21-22页 |
2.1.3 实验试剂 | 第22-25页 |
2.1.4 实验所用引物 | 第25-26页 |
2.2 实验方法与步骤 | 第26-49页 |
2.2.1 日本三角涡虫总RNA的提取与检测 | 第26-27页 |
2.2.2 一般PCR扩增模板的制备 | 第27-28页 |
2.2.3 3′-RACE cDNA模板的制备 | 第28页 |
2.2.4 5′-cDNA模板的制备 | 第28-31页 |
2.2.5 Real-time-PCR模板的制备 | 第31-32页 |
2.2.6 RACE技术扩增基因的全长 | 第32-39页 |
2.2.7 DjSpsb基因的生物信息学分析及系统进化树构建 | 第39页 |
2.2.8 DjSpsb基因原位杂交 | 第39-46页 |
2.2.9 DjSpsb基因的RT-PCR | 第46页 |
2.2.10 应激反应 | 第46-49页 |
第三章 结果 | 第49-65页 |
3.1 日本三角涡虫RNA的提取 | 第49-50页 |
3.1.1 总RNA的提取 | 第49页 |
3.1.2 RT-PCR RNA的提取 | 第49-50页 |
3.2 反转录模板cDNA的检测 | 第50页 |
3.3 DjSpsb基因的cDNA全长及序列分析 | 第50-52页 |
3.4 DjSPSB蛋白理化性质分析 | 第52-57页 |
3.4.1 DjSPSB蛋白基本理化性质 | 第52-53页 |
3.4.2 DjSPSB蛋白质信号肽的预测 | 第53-54页 |
3.4.3 DjSPSB蛋白磷酸化位点预测 | 第54-55页 |
3.4.4 DjSPSB蛋白核输出信号预测 | 第55页 |
3.4.5 DjSPSB蛋白跨膜预测 | 第55-56页 |
3.4.6 DjSPSB蛋白二级结构预测 | 第56页 |
3.4.7 DjSPSB蛋白三级结构预测 | 第56-57页 |
3.5 DjSpsb基因的同源性比对和进化分析 | 第57-59页 |
3.6 DjSpsb在整体和再生涡虫中的表达模式 | 第59-61页 |
3.7 DjSpsb在头部再生过程中实时定量PCR结果 | 第61-62页 |
3.8 应激反应对DjSpsb基因表达量的影响 | 第62-65页 |
3.8.1 热应激反应 | 第62-63页 |
3.8.2 化学应激反应 | 第63-65页 |
第四章 讨论 | 第65-69页 |
第五章 结论 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-81页 |
致谢 | 第81-83页 |
攻读硕士学位期间发表的论文和参与的课题 | 第83-85页 |