中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
符号说明 | 第12-14页 |
第一章 前言 | 第14-21页 |
1. 阿尔茨海默病 | 第14-16页 |
2. BACE1 | 第16-17页 |
3. Kv2.1 | 第17-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-35页 |
1. 主要实验试剂及仪器 | 第21-23页 |
2. 实验操作 | 第23-35页 |
2.1 构建质粒 | 第23-27页 |
2.2 培养传代细胞 | 第27页 |
2.3 细胞转染 | 第27-28页 |
2.4 提取并培养大鼠原代神经元及慢病毒感染原代神经元 | 第28-29页 |
2.5 蛋白免疫印迹(Western Blotting) | 第29-30页 |
2.6 免疫沉淀及共沉淀(Co-Immunoprecipitation,CO-IP) | 第30-31页 |
2.7 RNA的提取 | 第31页 |
2.8 半定量-PCR | 第31-32页 |
2.9 体外酶切反应及质谱检测 | 第32页 |
2.10 制备细胞爬片及免疫荧光染色 | 第32-33页 |
2.11 激光共聚焦及细胞全内反射显微镜照相 | 第33页 |
2.12 TUNEL凋亡检测 | 第33-34页 |
2.13 电生理记录 | 第34页 |
2.14 数据分析 | 第34-35页 |
第三章 实验结果 | 第35-51页 |
1. Kv2.1是BACE1的新底物,BACE1能降低Kv2.1的蛋白水平 | 第35页 |
2. 确定BACE1对Kv2.1的切割位点 | 第35-38页 |
3. 确定BACE1在Kv2.1蛋白的376-508片段上的切割位点 | 第38-44页 |
4. 确定BACE1在Kv2.1蛋白的508-683片段上的切割位点 | 第44-47页 |
5. 确定BACE1在Kv2.1蛋白的683-858片段上的切割位点 | 第47-51页 |
第四章 讨论 | 第51-55页 |
第五章 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第62页 |