| 中文摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 前言 | 第14-17页 |
| 材料与方法 | 第17-35页 |
| 1. 材料 | 第17-18页 |
| 1.1 质粒与菌种 | 第17-18页 |
| 1.2 主要试剂 | 第18页 |
| 1.3 主要仪器 | 第18页 |
| 2. 实验方法 | 第18-35页 |
| 2.1 结核分枝杆菌Rv2981c基因的过表达及D-丙氨酰-D-丙氨酸连接酶活性的鉴定 | 第18-28页 |
| 2.1.1 结核分枝杆菌 Rv2981c（ddl A）基因的扩增 | 第18-20页 |
| 2.1.2 pMD18-Tb-ddlA克隆载体的构建 | 第20-22页 |
| 2.1.3 pCold II-Tb-ddlA表达载体的构建 | 第22-23页 |
| 2.1.4 结核分枝杆菌DdlA蛋白在大肠杆菌中表达体系的建立及诱导表达 | 第23-24页 |
| 2.1.5 DdlA蛋白的鉴定 | 第24-26页 |
| 2.1.6 DdlA蛋白的D-丙氨酰-D-丙氨酸连接酶活性鉴定 | 第26-27页 |
| 2.1.7 抗DdlA多克隆抗体的制备与鉴定 | 第27-28页 |
| 2.2 耻垢分枝杆菌pMind-Sm-ddlA-As反义下调表达对细菌的影响 | 第28-35页 |
| 2.2.1 目的基因Sm-ddlA-AS的的PCR扩增 | 第28-29页 |
| 2.2.2 pJET-Sm-ddlA-AS克隆载体构建 | 第29-30页 |
| 2.2.3 pMind-Sm-ddlA-AS反义下调表达载体的构建 | 第30-32页 |
| 2.2.4 耻垢分枝杆菌ddlA基因的反义下调表达模型的建立 | 第32-33页 |
| 2.2.5 强力霉素对耻垢分枝杆菌Sm-ddlA反义 RNA表达系统诱导效果的检测 | 第33-34页 |
| 2.2.6 应用透射电镜对ddlA基因表达下调的耻垢分枝杆菌细菌形态的分析 | 第34-35页 |
| 结果 | 第35-46页 |
| 3.1 结核分枝杆菌Rv2981c基因的表达及D-丙氨酰-D-丙氨酸连接酶活性的鉴定 | 第35-41页 |
| 3.1.1 结核分枝杆菌Rv2981c（ddl A）基因的扩增 | 第35页 |
| 3.1.2 pMD18-Tb-ddlA克隆载体的构建 | 第35-37页 |
| 3.1.3 pCold II-Tb-ddlA表达载体的构建 | 第37页 |
| 3.1.4 Tb-DdlA蛋白的诱导表达 | 第37页 |
| 3.1.5 DdlA蛋白的D-丙氨酰-D-丙氨酸连接酶活性鉴定 | 第37-40页 |
| 3.1.6 抗Tb-DdlA蛋白多克隆抗体的效价与特异性 | 第40-41页 |
| 3.2 耻垢分枝杆菌pMind-Sm-ddlA-AS反义下调表达对细菌的影响 | 第41-46页 |
| 3.2.1 耻垢分枝杆菌截短的Sm-ddlA-AS（396bp）基因的扩增 | 第41-42页 |
| 3.2.2 pJET-Sm-ddlA-AS克隆质粒的构建 | 第42页 |
| 3.2.3 pMind-Sm-ddlA-AS表达载体的构建 | 第42-43页 |
| 3.2.4 耻垢分枝杆菌Sm-ddlA反义下调表达生长曲线的绘制及最佳诱导条件的确定 | 第43-45页 |
| 3.2.4.1 耻垢分枝杆菌受Sm-ddlA反义RNA下调表达的生长曲线绘制 | 第43-44页 |
| 3.2.4.2 pMind-Sm-ddlA-As Smeg菌株受到反义RNA下调调控的Sm-DdlA蛋白的鉴定 | 第44-45页 |
| 3.2.5 耻垢分枝杆菌Sm-ddlA反义RNA的诱导表达对耻垢分枝杆菌形态的影响 | 第45-46页 |
| 讨论 | 第46-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-51页 |
| 综述 | 第51-61页 |
| 参考文献 | 第58-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
