摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
第一章 文献综述和立项依据 | 第10-23页 |
1 引言 | 第10-15页 |
·蓝藻简介 | 第10-11页 |
·藻胆体简介 | 第11-12页 |
·藻胆蛋白简介 | 第12-15页 |
2 藻蓝胆素的研究进展 | 第15-19页 |
·藻蓝胆素的结构 | 第15-16页 |
·藻蓝胆素的捕获和传递光能的作用 | 第16-17页 |
·影响藻蓝胆素光谱特性的因素 | 第17-18页 |
·藻蓝胆素的生物合成及重组 | 第18-19页 |
3 亚铁血红素氧化酶I与藻蓝胆素铁氧还蛋白还原酶的研究进展 | 第19-20页 |
4 实验目的及意义 | 第20-23页 |
·hox1基因和pcyA基因的克隆 | 第21页 |
·hox1基因和pcyA基因的序列分析 | 第21-22页 |
·表达载体的构建 | 第22-23页 |
第二章 hox1基因和pcyA基因的克隆和序列分析 | 第23-44页 |
1 材料与方法 | 第23-31页 |
·试验材料 | 第23-24页 |
·组织样品 | 第23页 |
·菌株与克隆载体 | 第23页 |
·DNA分析软件 | 第23页 |
·主要仪器设备 | 第23-24页 |
·药品和酶 | 第24页 |
·实验方法 | 第24-31页 |
·聚球藻和钝顶节旋藻的培养 | 第24页 |
·改进的CTAB法提取微藻总DNA | 第24-25页 |
·PCR扩增 | 第25-28页 |
·PCR产物的克隆 | 第28-29页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒转化 | 第29页 |
·阳性克隆的筛选及鉴定 | 第29-30页 |
·测序 | 第30页 |
·序列分析和系统树的构建 | 第30-31页 |
2 结果与分析 | 第31-41页 |
·总DNA的提取 | 第31页 |
·电泳检测PCR产物 | 第31-32页 |
·hox1基因和pcyA基因的测序结果 | 第32-33页 |
·开放阅读框分析 | 第33-34页 |
·GC含量分析 | 第34-35页 |
·氨基酸序列分析结果 | 第35-37页 |
·蛋白质二级结构分析 | 第37-38页 |
·hox1和pcyA基因的序列同源性分析 | 第38-40页 |
·分子系统树的构建 | 第40-41页 |
3 讨论 | 第41-44页 |
·改良的CTAB法提取微藻的总DNA | 第41-42页 |
·降落PCR | 第42-44页 |
第三章 表达载体的构建 | 第44-70页 |
1 材料与方法 | 第44-61页 |
·材料 | 第44-45页 |
·菌株及表达载体 | 第44页 |
·试剂 | 第44-45页 |
·主要试剂及培养基的配制 | 第45页 |
·仪器设备 | 第45页 |
·实验方法 | 第45-61页 |
·hox1基因及pcyA基因与启动子和终止子连接 | 第45-55页 |
·H片段与P片段和pUC18载体的连接 | 第55-59页 |
·表达载体的构建 | 第59-61页 |
2 结果与分析 | 第61-67页 |
·启动子和终止子的连接 | 第61-64页 |
·四个插入基因的双酶切结果 | 第61-62页 |
·PCR筛选鉴定转化子的结果 | 第62-63页 |
·双酶切鉴定转化子结果 | 第63-64页 |
·两片段与pUC18载体的连接 | 第64-66页 |
·线性载体的获得 | 第64-65页 |
·H片段和P片段的扩增 | 第65页 |
·融合实验检测结果 | 第65-66页 |
·表达载体的构建 | 第66-67页 |
·pSB130线性载体的获得 | 第66-67页 |
·转化子的鉴定 | 第67页 |
3 讨论 | 第67-70页 |
·In-Fusion~(TM)试剂盒的使用 | 第67-68页 |
·载体选择策略 | 第68页 |
·有关酶切体系 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
个人简历 | 第76页 |
发表的学术论文 | 第76页 |