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缺氧诱导胃癌AGS细胞中microRNA-574-3p表达的研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第1章 绪论第12-20页
    1.1 胃癌及其危害第12-13页
    1.2 缺氧诱导因子第13-16页
        1.2.1 转录因子第13页
        1.2.2 缺氧诱导因子第13-14页
        1.2.3 缺氧诱导因子的成员及结构第14页
        1.2.4 缺氧诱导因子的功能和作用机制第14-15页
        1.2.5 缺氧诱导因子的临床意义第15-16页
    1.3 microRNA第16-18页
        1.3.1 miRNA的发现和命名第16页
        1.3.2 miRNA的生物合成第16-17页
        1.3.3 miRNA的功能及作用机制第17-18页
        1.3.4 miRNA的应用第18页
    1.4 肿瘤细胞的分子调控第18-20页
第2章 HIF-1α与miRNA5743p在胃癌AGS细胞的研究第20-44页
    2.1 仪器和材料第20-23页
        2.1.1 主要仪器第20-21页
        2.1.2 主要试剂和耗材第21-23页
        2.1.3 主要试剂配制第23页
        2.1.4 细胞株来源第23页
    2.2 实验方法第23-32页
        2.2.1 胃癌AGS细胞培养第23-24页
        2.2.2 光镜下观察AGS细胞的形态第24页
        2.2.3 缺氧培养条件第24页
        2.2.4 Western Blot法检测相关蛋白表达第24-28页
        2.2.5 RNA提取第28页
        2.2.6 RNA定量第28-29页
        2.2.7 DNA&RNA转染第29页
        2.2.8 逆转录反应第29-30页
        2.2.9 PCR反应第30-31页
        2.2.10 实时定量PCR反应第31页
        2.2.11 琼脂糖凝胶电泳第31页
        2.2.12 双荧光素酶报告系统第31页
        2.2.13 质粒的提取第31-32页
    2.3 数据处理第32页
    2.4 实验结果第32-44页
        2.4.1 CoCl_2和缺氧环境下AGS细胞的形态学变化第32-33页
        2.4.2 CoCl_2或缺氧环境下AGS细胞HIF-1α蛋白的水平第33-34页
        2.4.3 CoCl_2刺激上调AGS细胞中VEGF mRNA的表达第34-35页
        2.4.4 CoCl_2或缺氧环境下AGS细胞中miR5743p的表达第35-36页
        2.4.5 HIF-1α的抑制剂能够抑制miR5743p的表达第36-38页
        2.4.6 si-HIF-1α能够抑制miR5743p的表达第38-39页
        2.4.7 pcDNA3-HIF-1α(Mut)质粒的酶切验证第39页
        2.4.8 转染pcDNA3-HIF-1α(Mut)质粒的蛋白表达第39-40页
        2.4.9 转染pcDNA3-HIF-1α(Mut)质粒上调miR5743p的表达第40-41页
        2.4.10 双荧光素酶报告基因的验证第41-42页
        2.4.11 转染pEGFP(C1)-miR574质粒检测其的表达第42-43页
        2.4.12 转染pEGFP(C1)-mi R574质粒上调HIF-1α的表达第43-44页
第3章 讨论第44-46页
第4章 结论第46-47页
参考文献第47-52页
在学期间获得的研究成果第52-53页
致谢第53页

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