摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
第一章 绪论 | 第8-15页 |
1.1 蓝细菌概述 | 第8-9页 |
1.1.1 集胞藻PCC 6803 | 第8页 |
1.1.2 生物能源现状 | 第8-9页 |
1.2 生物燃料丁醇概述 | 第9-11页 |
1.2.1 生物燃料丁醇使用现状及存在问题 | 第9-10页 |
1.2.2 合成生物学策略生产丁醇 | 第10-11页 |
1.3 蓝细菌丁醇耐受性的研究进展 | 第11-14页 |
1.3.1 生物燃料毒性概述 | 第11-12页 |
1.3.2 蓝细菌丁醇耐受的研究进展 | 第12-14页 |
1.4 本研究的主要内容概述 | 第14-15页 |
第二章 丁醇胁迫相关双组份反应调控基因slr1037的鉴定 | 第15-32页 |
2.1 实验材料 | 第15-19页 |
2.1.1 实验对象及其来源 | 第15-19页 |
2.2 实验设计与方法 | 第19-26页 |
2.2.1 基因敲除突变体的构建 | 第19-25页 |
2.2.2 胁迫条件下的比较生长分析 | 第25-26页 |
2.3 实验结果与讨论 | 第26-30页 |
2.3.1 Cm抗性片段及目的基因上下游的扩增 | 第26-27页 |
2.3.2 融合PCR片段的扩增 | 第27页 |
2.3.3 菌落PCR验证基因敲除突变株 | 第27-28页 |
2.3.4 丁醇胁迫条件下突变株与野生株生长速率的差异 | 第28-29页 |
2.3.5 其他胁迫条件下突变株与野生株生长速率的差异 | 第29-30页 |
2.4 本章小结 | 第30-32页 |
第三章 蛋白组技术分析丁醇胁迫集胞藻中slr1037的调控机制 | 第32-48页 |
3.1 实验材料与方法 | 第33-36页 |
3.1.1 实验材料 | 第33-34页 |
3.1.2 实验方法 | 第34-36页 |
3.2 实验结果与讨论 | 第36-47页 |
3.2.1 蛋白组学分析概述 | 第36-37页 |
3.2.2 Slr1037介导的丁醇耐受可能的机制 | 第37-47页 |
3.3 本章小结 | 第47-48页 |
第四章 RT-qPCR对蛋白组数据的验证 | 第48-55页 |
4.1 实验材料与方法 | 第48-53页 |
4.1.1 实验材料 | 第48-50页 |
4.1.2 实验方法 | 第50-53页 |
4.2 实验结果与讨论 | 第53-54页 |
4.2.1 RNA浓度测定及质量鉴定 | 第53页 |
4.2.2 RT-qPCR结果与蛋白质组数据的相关性分析 | 第53-54页 |
4.3 本章小结 | 第54-55页 |
第五章 丁醇耐受相关基因slr1037过表达分析 | 第55-68页 |
5.1 实验材料 | 第55-56页 |
5.1.1 试验对象及其来源 | 第55页 |
5.1.2 实验试剂 | 第55-56页 |
5.1.3 实验仪器与设备 | 第56页 |
5.2 实验设计与方法 | 第56-62页 |
5.2.1 基因过表达平台的构建 | 第56-61页 |
5.2.2 丁醇胁迫条件下的比较生长分析 | 第61页 |
5.2.3 RT-qPCR鉴定基因的表达水平 | 第61-62页 |
5.3 实验结果与讨论 | 第62-67页 |
5.3.1 过表达载体pTX的构建与验证 | 第62-63页 |
5.3.2 重组质粒pTX-slr1037的构建 | 第63-64页 |
5.3.3 集胞藻PCC 6803过表达菌株的验证 | 第64-65页 |
5.3.4 丁醇胁迫下的生长表型分析 | 第65-66页 |
5.3.5 RT-qPCR鉴定基因的表达量 | 第66-67页 |
5.4 本章小结 | 第67-68页 |
第六章 结论与展望 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-78页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第78-79页 |
致谢 | 第79-80页 |