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十字花科作物根肿病生防放线菌研究

摘要第1-9页
Abstract第9-19页
第一章 文献综述第19-39页
 1 十字花科作物根肿病研究进展第20-28页
   ·根肿病的寄主和危害第20页
     ·寄主范围第20页
     ·危害及症状第20页
   ·根肿病的病原第20-24页
     ·分类地位、形态及生活史第20-22页
     ·致病性分化第22-23页
     ·生物学特性第23页
     ·休眠孢子的分离、保存与检测第23-24页
   ·根肿病病害发生规律第24-25页
     ·病害循环第24-25页
     ·发病条件第25页
   ·根肿病的防治第25-28页
     ·农业措施第25-26页
     ·化学防治第26-27页
     ·抗病品种的选育第27-28页
     ·生物防治第28页
 2 生防放线菌研究进展第28-37页
   ·放线菌的简介第29页
   ·放线菌的生境分布第29-30页
     ·土壤放线菌第29页
     ·植物内生放线菌第29-30页
   ·生防放线菌在植物病害生物防治中的应用第30-32页
   ·生防放线菌的作用机制第32-33页
   ·放线菌的分类学研究概况第33-35页
     ·经典分类法第33-34页
     ·化学分类法第34页
     ·分子分类法第34-35页
   ·生防放线菌的定殖第35-37页
     ·定殖研究方法第35-36页
     ·影响生防菌定殖的因子第36-37页
 3 拮抗微生物在生物防治应用中存在的问题与解决对策第37-38页
   ·拮抗微生物资源挖掘与应用有限第37页
   ·生防效果不稳定第37页
   ·拮抗和促生的结合较难第37页
   ·有益微生物的抗病基因利用少第37页
   ·对生物农药的宣传力度不够第37-38页
 4 本研究的目的和意义第38-39页
第二章 十字花科根肿病菌生防放线菌的分离、筛选及其防治效果测定第39-51页
 1 材料与方法第40-43页
   ·水培液和培养基第40页
   ·材料的采集和搜集第40-41页
   ·放线菌的分离第41页
     ·土壤放线菌的分离第41页
     ·植物内生放线菌的分离第41页
   ·根肿病菌生防放线菌的初筛第41-42页
     ·制备休眠孢子悬浮液第41页
     ·收集根分泌物第41-42页
     ·放线菌培养液、发酵液与菌体悬浮液的制备第42页
     ·放线菌培养液对根肿病菌休眠孢子萌发的抑制第42页
     ·生防放线菌A316和A10发酵液及菌悬液对根肿病菌的抑菌活性第42页
     ·菌株A316和A10遗传稳定性测定第42页
     ·休眠孢子萌发的判定第42页
   ·根肿病菌生防放线菌的复筛第42-43页
   ·生防放线菌的大田小区防效试验第43页
 2 结果与分析第43-48页
   ·放线菌的分离第43-44页
   ·根肿病菌生防放线菌的初筛第44-46页
     ·放线菌培养液对根肿病菌休眠孢子萌发的抑制第44-45页
     ·生防放线菌A316和A10发酵液及菌悬液对根肿病菌的抑菌活性第45-46页
     ·菌株A316和A10的遗传稳定性第46页
   ·根肿病菌生防放线菌的复筛第46-47页
   ·生防放线菌A316和A10对根肿病的大田小区防治效果第47-48页
 3 讨论第48-51页
第三章 生防放线菌A316和A10的鉴定第51-68页
 1 材料与方法第51-59页
   ·供试培养基第51-52页
   ·主要试剂第52-53页
   ·主要仪器第53页
   ·形态与培养特征观察第53-54页
   ·生理生化特性分析第54-55页
     ·明胶液化第54页
     ·牛奶凝固与胨化第54页
     ·淀粉水解第54-55页
     ·纤维素分解第55页
     ·硝酸盐还原第55页
     ·黑色素的产生第55页
     ·H_2S的产生第55页
     ·碳源利用第55页
   ·生防菌株的细胞壁化学组分分析第55-56页
   ·生防放线菌16S rDNA PCR序列测定及系统发育分析第56-59页
     ·生防放线菌基因组DNA的制备第56-57页
     ·生防放线菌16S rDNA的PCR扩增第57页
     ·生防放线菌PCR扩增产物的回收第57-58页
     ·生防放线菌16S rDNA的克隆与测序第58-59页
 2 结果与分析第59-66页
   ·生防放线菌A316和A10的形态与培养特征观察第60-62页
   ·生防放线菌A316和A10的生理生化特性分析第62页
   ·细胞壁化学类型和全细胞水解物糖型第62-63页
   ·16S rDNA序列测定及系统发育分析第63-66页
 3 讨论第66-68页
第四章 A316和A10发酵产物稳定性及其抗菌谱测定第68-78页
 1 材料与方法第68-70页
   ·供试菌种第68页
   ·种子液的制备第68-69页
   ·发酵液的制备第69页
   ·对根肿病菌的抑菌活性测定第69页
   ·发酵产物稳定性测定第69-70页
     ·发酵液的热处理第69页
     ·发酵液的酸碱处理第69页
     ·发酵液的紫外处理第69页
     ·储藏稳定性测定第69页
     ·抗蛋白酶K稳定性测定第69-70页
   ·抗菌谱的测定第70页
     ·菌株A316和A10对植物病原真菌的抑菌效果第70页
     ·菌株A316和A10对细菌的抑菌效果第70页
     ·发酵液对植物病原真菌菌丝生长的影响第70页
     ·发酵液对细菌的抑制作用第70页
 2 结果与分析第70-77页
   ·生防放线菌A316和A10发酵产物的稳定性第70-74页
     ·热稳定性第70-72页
     ·酸碱稳定性第72页
     ·UV稳定性第72-73页
     ·储藏稳定性第73-74页
     ·抗蛋白酶K稳定性第74页
   ·抗菌谱的测定第74-77页
     ·菌株A316和A10对植物病原真菌的抑菌效果第74-75页
     ·菌株A316和A10对细菌的抑菌效果第75页
     ·A316和A10的发酵液对植物病原真菌菌丝生长的影响第75-76页
     ·A316和A10的发酵液对细菌的抑制作用第76-77页
 3 讨论第77-78页
第五章 A316和A10发酵液对白菜防御酶系的影响第78-85页
 1 材料与方法第78-80页
   ·材料第78页
   ·生防放线菌发酵液的制备第78页
   ·放线菌发酵液灌根第78-79页
   ·苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性测定第79页
   ·过氧化物酶(POD)活性测定第79页
   ·多酚氧化酶(PPO)活性测定第79-80页
 2 结果与分析第80-84页
   ·生防放线菌A316和A10对苯丙氨酸解氨酶(PAL)的影响第80-81页
   ·生防放线菌A316和A10对过氧化物酶(POD)的影响第81-83页
   ·生防放线菌A316和A10对多酚氧化酶(PPO)的影响第83-84页
 3 讨论第84-85页
第六章 生防放线菌A316和A1 0的定殖第85-93页
 1 材料与方法第85-86页
   ·材料第85页
   ·抗利福平(Rif)突变菌株的筛选第85-86页
   ·生防放线菌在土壤中的定殖第86页
   ·生防放线菌在白菜体内的定殖第86页
     ·抗利福平突变菌株培养液灌根第86页
     ·菌株回收第86页
 2 结果与分析第86-91页
   ·菌株A316和A10抗利福平(Rif)突变菌株的筛选第86-87页
   ·抗Rif突变菌株遗传稳定性第87页
   ·生防放线菌A316和A10在土壤中的定殖第87-88页
   ·生防放线菌A316和A10在白菜体内的定殖第88-91页
 3 讨论第91-93页
第七章 生防放线菌A316和A10发酵条件的优化第93-106页
 1 材料与方法第94-97页
   ·供试菌种第94页
   ·种子液的制备第94页
   ·发酵液的制备第94页
   ·拮抗活性测定第94页
   ·发酵培养基的改良第94-96页
     ·不同碳源对生防放线菌抑菌活性的影响第95页
     ·不同氮源对生防放线菌抑菌活性的影响第95页
     ·无机盐对生防放线菌抑菌活性的影响第95页
     ·培养基碳氮源正交优化设计第95-96页
   ·培养条件的优化第96-97页
     ·初始pH值对生防放线菌抑菌活性的影响第96页
     ·种龄对生防放线菌抑菌活性的影响第96页
     ·接种量对生防放线菌抑菌活性的影响第96页
     ·温度对生防放线菌抑菌活性的影响第96页
     ·装液量对生防放线菌抑菌活性的影响第96页
     ·发酵时间对生防放线菌抑菌活性的影响第96页
     ·摇床转速对生防放线菌抑菌活性的影响第96-97页
 2 结果与分析第97-104页
   ·发酵培养基的改良第97-100页
     ·不同碳源对生防放线菌A316和A10抑菌活性的影响第97页
     ·不同氮源对生防放线菌A316和A10抑菌活性的影响第97-98页
     ·无机盐对生防放线菌A316和A10抑菌活性的影响第98页
     ·生防放线菌A316和A10发酵培养基的碳氮源正交优化设计第98-100页
   ·培养条件的优化第100-104页
     ·初始pH值对对生防放线菌A316和A10抑菌活性的影响第100-101页
     ·种龄对生防放线菌A316和A10抑菌活性的影响第101页
     ·接种量对生防放线菌A316和A10抑菌活性的影响第101-102页
     ·温度对生防放线菌A316和A10抑菌活性的影响第102-103页
     ·装液量对生防放线菌A316和A10抑菌活性的影响第103页
     ·发酵时间对生防放线菌A316和A10抑菌活性的影响第103-104页
     ·摇床转速对生防放线菌A316和A10抑菌活性的影响第104页
 3 讨论第104-106页
第八章 生防放线菌A316抗根肿病菌活性物质的初步分离及鉴定第106-114页
 1 材料与方法第106-108页
   ·供试菌种第106页
   ·主要试剂第106-107页
   ·主要仪器第107页
   ·生防放线菌A316有效组分的分布第107页
   ·萃取剂的选择第107页
   ·生防放线菌A316活性物质的粗分离第107页
   ·硅胶薄层层析(TLC)条件探索第107-108页
   ·硅胶柱层析分离第108页
   ·活性组分结构的解析第108页
 2 结果与分析第108-112页
   ·活性物质的分布第108-109页
   ·萃取剂的选择第109页
   ·层析展开剂的选择第109页
   ·硅胶柱层析分离第109页
   ·活性组分结构的解析第109-112页
 3 讨论第112-114页
第九章 创新点及展望第114-115页
 1 论文的创新点第114页
 2 有待进一步解决的问题第114-115页
参考文献第115-131页
致谢第131-132页
攻读博士学位期间发表论著情况第132页

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