| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 绪论 | 第18-28页 |
| 1.1 肾毒性 | 第18-20页 |
| 1.1.1 肾毒性的定义 | 第18页 |
| 1.1.2 肾毒性与顺铂 | 第18-19页 |
| 1.1.3 肾毒性的预防和治疗 | 第19-20页 |
| 1.2 外泌体（exosome） | 第20-23页 |
| 1.2.1 Exosome的定义与特点 | 第20页 |
| 1.2.2 Exosome的来源和生物学功能 | 第20-21页 |
| 1.2.3 Exosome的分离与鉴定 | 第21-22页 |
| 1.2.4 HucMSC来源的exosome与损伤修复 | 第22-23页 |
| 1.3 细胞自噬 | 第23-25页 |
| 1.3.1 细胞自噬的定义 | 第23-24页 |
| 1.3.2 细胞自噬的功能 | 第24页 |
| 1.3.3 细胞自噬与损伤修复 | 第24-25页 |
| 1.4 1433 蛋白及功能 | 第25-28页 |
| 1.4.1 1433 的特点与功能 | 第25-26页 |
| 1.4.2 1433 与细胞自噬 | 第26-27页 |
| 1.4.3 1433 与损伤修复 | 第27-28页 |
| 第二章 研究目的、方法、实验设计方案和研究意义 | 第28-32页 |
| 2.1 研究目的 | 第28页 |
| 2.2 研究方法 | 第28-29页 |
| 2.3 实验设计方案 | 第29-31页 |
| 2.4 研究意义 | 第31-32页 |
| 第三章 HucMSC-ex预处理可减缓顺铂对HK-2 细胞的损伤 | 第32-41页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第32-34页 |
| 3.1.1 实验所用细胞 | 第32页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第32-33页 |
| 3.1.3 主要仪器和耗材 | 第33-34页 |
| 3.2 方法 | 第34-37页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第34页 |
| 3.2.2 HucMSC-ex的提取 | 第34-35页 |
| 3.2.3 HucMSC-ex的鉴定 | 第35页 |
| 3.2.4 细胞总蛋白提取 | 第35-36页 |
| 3.2.5 Western blot | 第36页 |
| 3.2.6 流式凋亡双染 | 第36页 |
| 3.2.7 TUNEL-FITC | 第36-37页 |
| 3.2.8 数据处理与统计分析 | 第37页 |
| 3.3 结果 | 第37-40页 |
| 3.3.1 HucMSC-ex的表面标记鉴定 | 第37-38页 |
| 3.3.2 HucMSC-ex预处理减少顺铂诱导的HK-2 细胞凋亡 | 第38-39页 |
| 3.3.3 HucMSC-ex预处理促进顺铂损伤的HK-2 细胞增殖 | 第39-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-41页 |
| 第四章 HucMSC-ex通过增强自噬发挥预防顺铂对HK-2 细胞的损伤作用 | 第41-48页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第41-42页 |
| 4.1.1 实验所用细胞 | 第41页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第41-42页 |
| 4.1.3 主要仪器与耗材 | 第42页 |
| 4.2 方法 | 第42-44页 |
| 4.2.1 实验分组 | 第42页 |
| 4.2.2 细胞总蛋白提取和Western blot | 第42页 |
| 4.2.3 自噬小体检测 | 第42-43页 |
| 4.2.4 免疫荧光检测PCNA | 第43页 |
| 4.2.5 TUNEL-FITC | 第43页 |
| 4.2.6 数据处理与统计 | 第43-44页 |
| 4.3 结果 | 第44-46页 |
| 4.3.1 HucMSC-ex预处理上调自噬相关蛋白LC3B表达水平 | 第44页 |
| 4.3.2 HucMSC-ex预处理促进自噬小体的形成 | 第44-45页 |
| 4.3.3 自噬抑制剂抑制hucMSC-ex引起的细胞增殖 | 第45-46页 |
| 4.3.4 自噬抑制剂增加了HK-2 细胞的凋亡 | 第46页 |
| 4.4 讨论 | 第46-48页 |
| 第五章 HucMSC-ex携带 1433ζ 参与自噬的调节预防顺铂肾毒性 | 第48-64页 |
| 5.1 材料与仪器 | 第48-49页 |
| 5.1.1 实验所用细胞 | 第48页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第48-49页 |
| 5.1.3 主要仪器与耗材 | 第49页 |
| 5.2 方法 | 第49-51页 |
| 5.2.1 细胞总蛋白提取及Western blot | 第49页 |
| 5.2.2 HK-2 细胞及 293T细胞过表达 1433ζ | 第49-50页 |
| 5.2.3 敲减 14-3-3ζHK-2 细胞株及 huc MSC 细胞的筛选及建立 | 第50页 |
| 5.2.4 免疫荧光检测PCNA的表达 | 第50页 |
| 5.2.5 TUNEL分析 | 第50-51页 |
| 5.2.6 数据处理与统计分析 | 第51页 |
| 5.3 结果 | 第51-62页 |
| 5.3.1 HucMSC-ex携带丰富的 1433ζ | 第51页 |
| 5.3.2 HucMSC-ex的预处理增加了 1433ζ的表达 | 第51-52页 |
| 5.3.3 不同自噬抑制剂对 1433ζ表达的影响存在差异 | 第52页 |
| 5.3.4 敲减 1433ζ 的hucMSC-ex的验证 | 第52-53页 |
| 5.3.5 敲减 1433ζ 的hucMSC-ex上调HK-2 细胞自噬水平的能力减弱 | 第53-54页 |
| 5.3.6 敲减 1433ζ 的hucMSC-ex促进HK-2 细胞增殖的能力减弱 | 第54页 |
| 5.3.7 敲减 1433ζ 的hucMSC-ex抑制HK-2 细胞凋亡的能力减弱 | 第54-55页 |
| 5.3.8 过表达 1433ζ HK-2 细胞株构建 | 第55-56页 |
| 5.3.9 HK-2 细胞过表达 1433ζ 后自噬相关蛋白LC3B的表达水平增加 | 第56页 |
| 5.3.10 HK-2 细胞过表达 1433ζ 促进细胞增殖 | 第56-57页 |
| 5.3.11 HK-2 细胞过表达 1433ζ 减少细胞凋亡 | 第57-58页 |
| 5.3.12 HEK293T细胞过表达 1433ζ 并验证其功能 | 第58-59页 |
| 5.3.13 敲减HK-2 细胞中的 1433ζ 下调自噬，加剧顺铂损伤 | 第59-61页 |
| 5.3.14 HucMSC-ex携带 1433ζ 回补后减缓顺铂对HK-2 细胞的损伤 | 第61-62页 |
| 5.4 讨论 | 第62-64页 |
| 第六章 结论与展望 | 第64-66页 |
| 6.1 结论 | 第64-65页 |
| 6.2 展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
| 攻读硕士学位期间发表的科研成果、参加的学术会议及获奖情况 | 第78-79页 |
| 一、科研成果 | 第78页 |
| 二、参加会议 | 第78-79页 |
| 三、获奖情况 | 第79页 |
