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猪瘟C株疫苗免疫猪CD8~+T细胞TCRα、β链CDR3谱系及分子特征初步分析

摘要第6-8页
abstract第8-9页
英文缩略表第14-15页
第一章 引言第15-31页
    1.1 前言第15-16页
    1.2 TCR的抗原识别作用第16-18页
    1.3 αβTCR作为健康和疾病的预测因子第18-23页
        1.3.1 胸腺选择前TCR库的多态性第21页
        1.3.2 初始T细胞TCR库的多样性第21-22页
        1.3.3 抗原特异性反应中的TCR偏好性第22页
        1.3.4 健康和疾病状态下TCR的多样性第22-23页
    1.4 CDR3谱型分析在TCR与疾病相关性研究中的应用第23-29页
        1.4.1 免疫介导的疾病第23-27页
            1.4.1.1 关节疾病第23-24页
            1.4.1.2 皮肤疾病第24页
            1.4.1.3 神经性疾病第24-25页
            1.4.1.4 肌肉性疾病第25页
            1.4.1.5 肾脏疾病第25-26页
            1.4.1.6 消化系统疾病第26页
            1.4.1.7 免疫缺陷综合征第26页
            1.4.1.8 其他情况第26-27页
        1.4.2 感染性疾病第27-28页
            1.4.2.1 人类免疫缺陷病毒第27页
            1.4.2.2 丙型肝炎病毒和乙型肝炎病毒第27页
            1.4.2.3 单纯疱疹病毒第27-28页
            1.4.2.4 肺结核第28页
            1.4.2.5 其他第28页
        1.4.3 血液肿瘤第28-29页
            1.4.3.1 骨髓肿瘤第28页
            1.4.3.2 淋巴瘤第28-29页
        1.4.4 实体瘤第29页
    1.5 CDR3谱型分析在猪瘟病毒感染中的研究意义第29-31页
第二章 猪瘟C株疫苗初次免疫后CD8~+ T细胞 αβTCR谱型变化及其克隆化分析第31-46页
    2.1 材料和方法第31-37页
        2.1.1 试验动物第31页
        2.1.2 主要试剂和试剂盒第31-32页
        2.1.3 主要溶液第32页
        2.1.4 引物设计与合成第32-34页
        2.1.5 免疫接种第34页
        2.1.6 采血第34页
        2.1.7 抗体检测第34页
        2.1.8 密度梯度离心法分离猪外周血单个核细胞 (PBMCs)第34-35页
        2.1.9 免疫磁珠法分选CD8~+ T细胞第35页
        2.1.10 RNA的提取第35-36页
        2.1.11 cDNA的合成第36页
        2.1.12 TRAV和TRBV家族RT-PCR第36页
        2.1.13 核酸电泳鉴定第36页
        2.1.14 CDR3谱型分析第36-37页
    2.2 试验结果第37-44页
        2.2.1 抗体检测第37-38页
        2.2.2 TRAV和TRBV家族RT-PCR结果第38页
        2.2.3 基因扫描分析初次免疫前后TCR CDR3谱型变化第38-44页
    2.3 讨论第44-46页
第三章 猪瘟C株疫苗二次免疫前后CD8~+ T细胞 αβTCR谱型变化及其克隆化分析第46-55页
    3.1 材料和方法第46-48页
        3.1.1 试验动物及试剂第46页
        3.1.2 引物设计与合成第46页
        3.1.3 免疫接种第46页
        3.1.4 采血第46-47页
        3.1.5 抗体检测第47页
        3.1.8 密度梯度离心法分离、纯化猪外周血单个核细胞 (PBMCs)第47页
        3.1.9 免疫磁珠法分选 CD8~+ T 细胞第47页
        3.1.10 RNA的提取第47页
        3.1.11 cDNA的合成第47页
        3.1.12 TRAV和TRBV家族RT-PCR第47页
        3.1.13 核酸电泳鉴定第47-48页
        3.1.14 CDR3谱型分析第48页
    3.2 试验结果第48-53页
        3.2.1 抗体检测第48-49页
        3.2.2 TRAV和TRBV家族RT-PCR结果第49页
        3.2.3 基因扫描分析二次免疫前后TCR CDR3谱型变化第49-53页
    3.3 讨论第53-55页
第四章 克隆性增殖CD8~+ T细胞TRAV和BV家族CDR3序列分析第55-60页
    4.1 材料和方法第55-56页
        4.1.1 菌种第55页
        4.1.2 主要试剂和试剂盒第55页
        4.1.3 引物设计与合成第55-56页
        4.1.4 克隆性增殖CD8~+ T细胞TRAV和TRBV家族的PCR扩增第56页
        4.1.5 克隆载体的构建第56页
        4.1.6 克隆性增殖CD8~+ T细胞TCR Vα 和Vβ 基因家族CDR3序列分析第56页
    4.2 试验结果第56-59页
        4.2.1 克隆性增殖CD8~+ T细胞TRAV和TRBV家族的PCR扩增第56页
        4.2.2 克隆性增殖CD8~+ T细胞TRAV和TRBV家族CDR3序列分析第56-59页
    4.3 讨论第59-60页
第五章 全文结论第60-61页
参考文献第61-71页
致谢第71-72页
作者简历第72页

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