| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 综述 | 第9-18页 |
| 第一节 Stathmin1基因及其功能 | 第9-14页 |
| 1.1 Stathmin蛋白家族的组成 | 第9页 |
| 1.2 Stathmin1蛋白的一般特点 | 第9-10页 |
| 1.3 Stathmin1在微管调节中的作用 | 第10-13页 |
| 1.3.1 Stathmin1参与细胞生长 | 第11-12页 |
| 1.3.2 Stathmin1参与细胞迁移 | 第12页 |
| 1.3.3 Stathmin1参与细胞分化 | 第12-13页 |
| 1.4 Stathmin1在肿瘤的预防与治疗中的研究现状 | 第13-14页 |
| 1.4.1 肿瘤的预测 | 第13页 |
| 1.4.2 肿瘤的治疗 | 第13-14页 |
| 第二节 RNA干扰技术的研究进展 | 第14-16页 |
| 2.1 RNA干扰的作用机制 | 第14-15页 |
| 2.2 siRNA制备的方法 | 第15-16页 |
| 2.3 siRNA降低Stathmin1的表达在基因功能研究中的应用 | 第16页 |
| 第三节 本实验研究的内容 | 第16-18页 |
| 第二章 Stathmin1在成肌细胞分化过程中的表达 | 第18-32页 |
| 2.1 前言 | 第18页 |
| 2.2 实验材料 | 第18-21页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.2.2 实验动物和细胞 | 第19页 |
| 2.2.3 主要试剂和耗材 | 第19-20页 |
| 2.2.4 主要溶液配制 | 第20-21页 |
| 2.3 实验方法 | 第21-25页 |
| 2.3.1 不同年龄BALB/c小鼠肌肉的分离 | 第21页 |
| 2.3.2 小鼠肌肉组织蛋白的提取 | 第21页 |
| 2.3.3 小鼠肌肉组织RNA的提取 | 第21-22页 |
| 2.3.4 小鼠成肌细胞系C2C12的培养和诱导分化 | 第22页 |
| 2.3.5 小鼠成肌细胞诱导分化后蛋白提取 | 第22-23页 |
| 2.3.6 小鼠成肌细胞诱导分化后总RNA提取 | 第23页 |
| 2.3.7 蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第23-24页 |
| 2.3.8 实时荧光定量PCR | 第24-25页 |
| 2.3.9 数据处理与统计 | 第25页 |
| 2.4 实验结果 | 第25-29页 |
| 2.4.1 不同年龄BALB/c小鼠肌肉中Stathmin1的表达水平分析 | 第25-27页 |
| 2.4.2 小鼠成肌细胞系C2C12诱导分化 | 第27-28页 |
| 2.4.3 小鼠成肌细胞系C2C12诱导分化中Stathmin1的表达情况 | 第28-29页 |
| 2.5 讨论 | 第29-32页 |
| 第三章 Stathmin1基因对黑色素瘤细胞B16F10迁移的影响 | 第32-48页 |
| 3.1 前言 | 第32页 |
| 3.2 实验材料 | 第32-35页 |
| 3.2.1 主要仪器 | 第32-33页 |
| 3.2.2 实验菌株、质粒和细胞 | 第33页 |
| 3.2.3 主要试剂和耗材 | 第33-34页 |
| 3.2.4 主要溶液配制 | 第34-35页 |
| 3.3 实验方法 | 第35-39页 |
| 3.3.1 Stathmin1 shRNA载体的构建 | 第35-38页 |
| 3.3.2 Stathmin1 shRNA干扰效率的鉴定 | 第38-39页 |
| 3.3.3 划痕实验检测Stathmin1shRNA对小鼠黑色素瘤细胞B16F10迁移的影响 | 第39页 |
| 3.3.4 数据处理与统计 | 第39页 |
| 3.4 实验结果 | 第39-45页 |
| 3.4.1 选取的RNA干扰片段和设计的shRNA引物序列 | 第39-40页 |
| 3.4.2 Stathmin1 shRNA载体的构建及鉴定 | 第40-42页 |
| 3.4.3 Stathmin1 shRNA干扰效率的鉴定 | 第42-44页 |
| 3.4.4 Stathmin1 shRNA对小鼠黑色素瘤细胞B16F10迁移的影响 | 第44-45页 |
| 3.5 讨论 | 第45-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
