| 中文摘要 | 第12-14页 |
| Abstract | 第14-15页 |
| 符号说明 | 第16-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-31页 |
| 1.1 糖胺聚糖 | 第18-19页 |
| 1.2 透明质酸 | 第19-21页 |
| 1.2.1 透明质酸的代谢 | 第20页 |
| 1.2.2 透明质酸的生产 | 第20-21页 |
| 1.3 糖核苷酸合成 | 第21-26页 |
| 1.3.1 糖核苷酸的种类 | 第21-22页 |
| 1.3.2 糖核苷酸的化学合成 | 第22-23页 |
| 1.3.3 糖核苷酸的生物合成 | 第23-26页 |
| 1.4 多糖及其应用 | 第26-29页 |
| 1.4.1 壳聚糖及其应用 | 第26-27页 |
| 1.4.2 海藻酸钠及其应用 | 第27-29页 |
| 1.5 论文内容大纲 | 第29-31页 |
| 第二章 E.coli GlmU-Tr229的分子改造 | 第31-47页 |
| 2.1 引言 | 第31页 |
| 2.2 实验材料 | 第31-33页 |
| 2.2.1 载体和菌株 | 第31-32页 |
| 2.2.2 酶、试剂和耗材 | 第32页 |
| 2.2.3 培养基和缓冲液 | 第32-33页 |
| 2.2.4 主要仪器 | 第33页 |
| 2.3 实验方法 | 第33-38页 |
| 2.3.1 tGlmU定点突变引物设计 | 第33-34页 |
| 2.3.2 tGlmU点突变构建 | 第34-36页 |
| 2.3.3 tGlmU突变酶的表达及纯化 | 第36页 |
| 2.3.4 酶活检测 | 第36-37页 |
| 2.3.5 CDP-GlcNAc的大量合成及纯化 | 第37-38页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第38-45页 |
| 2.4.1 tGlmU定点突变 | 第38-39页 |
| 2.4.2 突变酶蛋白表达及纯化 | 第39-40页 |
| 2.4.3 tGlmU突变酶的酶活测定 | 第40-44页 |
| 2.4.4 CDP-GlcNAc的合成及纯化 | 第44-45页 |
| 2.5 本章小结 | 第45-47页 |
| 第三章 Arabidopsis thaliana来源GlcAK的克隆表达及其酶活研究 | 第47-60页 |
| 3.1 引言 | 第47页 |
| 3.2 实验材料 | 第47-48页 |
| 3.2.1 载体和菌株 | 第47-48页 |
| 3.2.2 酶、试剂和耗材 | 第48页 |
| 3.2.3 培养基和缓冲液 | 第48页 |
| 3.3 实验方法 | 第48-51页 |
| 3.3.1 引物设计 | 第48页 |
| 3.3.2 GlcAK的克隆及载体构建 | 第48-50页 |
| 3.3.3 蛋白表达及纯化 | 第50页 |
| 3.3.4 酶活检测 | 第50-51页 |
| 3.3.5 底物特异性研究 | 第51页 |
| 3.3.6 GlcA-1-P的大量合成及分离纯化 | 第51页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第51-59页 |
| 3.4.1 GlcAK的克隆及载体构建 | 第51-54页 |
| 3.4.2 GlcAK的蛋白表达及纯化 | 第54-56页 |
| 3.4.3 酶活检测 | 第56-57页 |
| 3.4.4 底物特异性研究 | 第57页 |
| 3.4.5 GlcA-1-P的大量合成及分离纯化 | 第57-59页 |
| 3.5 本章小结 | 第59-60页 |
| 第四章 一锅酶法合成透明质酸 | 第60-74页 |
| 4.1 引言 | 第60-61页 |
| 4.2 实验材料 | 第61-62页 |
| 4.2.1 载体和菌株 | 第61-62页 |
| 4.2.2 酶、试剂和耗材 | 第62页 |
| 4.2.3 培养基和缓冲液 | 第62页 |
| 4.2.4 主要仪器 | 第62页 |
| 4.3 实验方法 | 第62-67页 |
| 4.3.1 蛋白表达纯化 | 第62页 |
| 4.3.2 酶活检测 | 第62-64页 |
| 4.3.3 酶动力学参数测定 | 第64-65页 |
| 4.3.4 酶浓度比例优化 | 第65-66页 |
| 4.3.5 透明质酸的大量合成 | 第66页 |
| 4.3.6 透明质酸的鉴定 | 第66-67页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第67-73页 |
| 4.4.1 蛋白表达及纯化 | 第67页 |
| 4.4.2 酶活检测 | 第67-69页 |
| 4.4.3 酶动力学参数的测定 | 第69-70页 |
| 4.4.4 酶浓度优化 | 第70-71页 |
| 4.4.5 透明质酸的大量合成、纯化及鉴定 | 第71-73页 |
| 4.5 本章小结 | 第73-74页 |
| 第五章 多糖纳米微球的制备及其应用 | 第74-86页 |
| 5.1 引言 | 第74-75页 |
| 5.2 实验材料 | 第75页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第75页 |
| 5.2.2 主要仪器 | 第75页 |
| 5.3 实验方法 | 第75-78页 |
| 5.3.1 纳米微球的制备 | 第75-76页 |
| 5.3.2 纳米微球的表征 | 第76页 |
| 5.3.3 纳米微球的抑菌能力测定 | 第76-77页 |
| 5.3.4 纳米微球的吸附能力测定 | 第77-78页 |
| 5.3.5 纳米微球的毒性测定 | 第78页 |
| 5.4 实验结果 | 第78-84页 |
| 5.4.1 纳米微球制备 | 第78-82页 |
| 5.4.2 纳米微球的抑菌能力测定 | 第82-83页 |
| 5.4.3 纳米微球的吸附能力测定 | 第83-84页 |
| 5.4.4 纳米微球的毒性测定 | 第84页 |
| 5.5 本章小结 | 第84-86页 |
| 全文总结 | 第86-88页 |
| 本论文取得的创新性成果 | 第87页 |
| 本论文的不足之处 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第95-96页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第96页 |