| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第16-33页 |
| 1.1 研究背景 | 第16-22页 |
| 1.1.1 焦性没食子酸的概述 | 第16页 |
| 1.1.2 焦性没食子酸的应用 | 第16-18页 |
| 1.1.3 焦性没食子酸的制备 | 第18-21页 |
| 1.1.4 焦性没食子酸的检测 | 第21-22页 |
| 1.2 GAD的国内外研究现状 | 第22-29页 |
| 1.2.1 GAD的提取与分离方法 | 第22-23页 |
| 1.2.2 蛋白质的含量分析方法 | 第23-24页 |
| 1.2.3 蛋白质的结构鉴定 | 第24页 |
| 1.2.4 GAD菌株筛选与特性 | 第24-29页 |
| 1.3 研究目标和主要研究内容 | 第29-31页 |
| 1.3.1 研究目标及意义 | 第29-30页 |
| 1.3.2 研究内容 | 第30-31页 |
| 1.3.3 重点解决的问题 | 第31页 |
| 1.3.4 主要创新点 | 第31页 |
| 1.4 项目来源与经费支持 | 第31页 |
| 1.5 技术路线 | 第31-33页 |
| 第二章 没食子酸脱羧酶（GAD）菌株筛选及工艺优化 | 第33-53页 |
| 2.1 引言 | 第33页 |
| 2.2 实验部分 | 第33-38页 |
| 2.2.1 材料、菌种及仪器 | 第33-34页 |
| 2.2.2 方法 | 第34-35页 |
| 2.2.3 HPLC检测焦性没食子酸收率及没食子酸降解率 | 第35-37页 |
| 2.2.4 产物的抗氧化活性 | 第37-38页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第38-52页 |
| 2.3.1 菌种筛选与诱导 | 第38-40页 |
| 2.3.2 单因素发酵实验 | 第40-47页 |
| 2.3.3 响应面优化 | 第47-52页 |
| 2.3.4 产物的抗氧化活性 | 第52页 |
| 2.4 本章小结 | 第52-53页 |
| 第三章 没食子酸脱羧酶（GAD）提取与分析 | 第53-64页 |
| 3.1 引言 | 第53页 |
| 3.2 实验部分 | 第53-60页 |
| 3.2.1 试验原料、试剂和仪器 | 第53-54页 |
| 3.2.2 试剂的配制与样品处理 | 第54-55页 |
| 3.2.3 凯式定氮法分析GAD蛋白质 | 第55页 |
| 3.2.4 分光光度法分析GAD蛋白质 | 第55-56页 |
| 3.2.5 双缩脲法分析GAD蛋白质 | 第56-58页 |
| 3.2.6 SDS-PAGE聚丙烯酰胺法分析GAD蛋白质 | 第58-60页 |
| 3.3 结果与分析 | 第60-63页 |
| 3.3.1 凯式定氮法分析GAD结果 | 第60页 |
| 3.3.2 考马斯亮蓝法分析GAD结果 | 第60-61页 |
| 3.3.3 双缩脲法分析GAD结果 | 第61-62页 |
| 3.3.4 SDS-PAGE聚丙烯酰胺电泳法分析GAD结果 | 第62-63页 |
| 3.4 小结 | 第63-64页 |
| 第四章 没食子酸脱羧酶（GAD）分离及结构鉴定 | 第64-87页 |
| 4.1 引言 | 第64-65页 |
| 4.2 实验部分 | 第65-70页 |
| 4.2.1 实验原料、试剂及仪器 | 第65页 |
| 4.2.2 (NH_4)_2SO_4沉淀蛋白质的影响因素分析 | 第65-66页 |
| 4.2.3 膜分离技术 | 第66页 |
| 4.2.4 DEAE-Cellulose树脂柱层析 | 第66-68页 |
| 4.2.5 凝胶层析纯化 | 第68页 |
| 4.2.6 测定纯化的样品 | 第68-69页 |
| 4.2.7 GAD样品全波长扫描 | 第69页 |
| 4.2.8 MALDI-TOF/TOF分析样品条带蛋白质 | 第69-70页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第70-86页 |
| 4.3.1 (NH_4)_2SO_4沉淀蛋白质的影响因素结果分析 | 第70-72页 |
| 4.3.2 膜分离结果 | 第72-73页 |
| 4.3.3 除盐分离GAD | 第73-74页 |
| 4.3.4 DEAE-Cellulose树脂静态吸附的影响因素试验结果 | 第74-77页 |
| 4.3.5 葡聚糖凝胶层析 | 第77-79页 |
| 4.3.6 GAD纯化样品蛋白含量和吸收波长测定 | 第79页 |
| 4.3.7 GAD纯化样品的电泳分离 | 第79-80页 |
| 4.3.8 GAD蛋白条带belt1的质谱结构解析 | 第80-86页 |
| 4.4 小结 | 第86-87页 |
| 第五章 没食子酸脱羧酶（GAD）酶学性质的研究 | 第87-98页 |
| 5.1 前言 | 第87页 |
| 5.2 实验部分 | 第87-91页 |
| 5.2.1 试验原料、试剂及仪器 | 第87-88页 |
| 5.2.2 GAD酶活测定方法 | 第88-89页 |
| 5.2.3 GAD酶活影响条件 | 第89-91页 |
| 5.3 实验结果与讨论 | 第91-97页 |
| 5.3.1 GAD的底物专一性 | 第91页 |
| 5.3.2 GAD含量对酶活力的影响 | 第91-92页 |
| 5.3.3 底物浓度对酶活力的影响 | 第92-93页 |
| 5.3.4 温度对酶活力的影响 | 第93-94页 |
| 5.3.5 磷酸盐缓冲溶液含量对酶活力的影响 | 第94-95页 |
| 5.3.6 初始pH值对酶活力的影响 | 第95页 |
| 5.3.7 金属离子对酶活力的影响 | 第95-96页 |
| 5.3.8 添加剂对酶活力的影响 | 第96-97页 |
| 5.4 小节 | 第97-98页 |
| 第六章 结论及展望 | 第98-100页 |
| 参考文献 | 第100-106页 |
| 主要符号对照表 | 第106-107页 |
| 在读期间的学术研究 | 第107-108页 |
| 致谢 | 第108页 |
