转fat-1基因体细胞克隆绵羊的研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-18页 |
| 1 引言 | 第18-59页 |
| ·动物转基因技术的研究历史 | 第19-25页 |
| ·动物转基因技术研究的初级阶段 | 第19-20页 |
| ·动物转基因技术研究的初级应用阶段 | 第20-21页 |
| ·动物转基因技术研究的高潮阶段 | 第21-25页 |
| ·小结 | 第25页 |
| ·转基因动物制作方法及其发展概况 | 第25-48页 |
| ·显微注射法 | 第26-28页 |
| ·逆转录病毒载体介导的转基因 | 第28-29页 |
| ·精子介导的基因转移 | 第29-30页 |
| ·生殖干细胞法 | 第30-33页 |
| ·胚胎干细胞介导的转基因 | 第33-34页 |
| ·iPS 介导转基因技术 | 第34-35页 |
| ·基因打靶介导的转基因技术 | 第35-40页 |
| ·化学诱变介导的基因敲除技术 | 第40-41页 |
| ·RNA 干涉介导的基因沉默技术 | 第41-44页 |
| ·锌指核酸酶介导的基因沉默技术 | 第44-45页 |
| ·转座子介导的基因转移 | 第45-47页 |
| ·转基因体细胞克隆法 | 第47-48页 |
| ·动物转基因技术的应用 | 第48-53页 |
| ·动物转基因技术在基础研究领域的应用 | 第49页 |
| ·动物转基因技术在生物药剂和生物材料生产中的应用 | 第49-50页 |
| ·动物转基因技术在农业生产中的应用 | 第50-53页 |
| ·动物转基因技术在环保方面的应用 | 第53页 |
| ·动物转基因技术在应用方面存在的问题 | 第53页 |
| ·ω-3 PUFAs 的研究概况 | 第53-58页 |
| ·ω-3 PUFAs 的研究背景 | 第53-55页 |
| ·ω-3 PUFAs 的生物学功能 | 第55-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 2 绵羊体细胞克隆体系的优化 | 第59-79页 |
| ·实验材料 | 第59-60页 |
| ·动物材料 | 第59-60页 |
| ·实验设备 | 第60页 |
| ·实验用药品、试剂和耗材 | 第60页 |
| ·实验方法 | 第60-66页 |
| ·绵羊耳皮肤成纤维细胞的分离培养 | 第60-61页 |
| ·绵羊耳皮肤成纤维细胞生长曲线的测定 | 第61-62页 |
| ·绵羊耳皮肤成纤维细胞的染色体数目分析 | 第62页 |
| ·绵羊卵母细胞的采集和体外成熟培养 | 第62页 |
| ·供体细胞的准备 | 第62页 |
| ·受体卵母细胞的准备 | 第62-63页 |
| ·核移植制备重构胚 | 第63页 |
| ·重构胚的融合 | 第63页 |
| ·重构胚的激活和发育培养 | 第63页 |
| ·胚胎移植 | 第63-64页 |
| ·妊娠的确定和克隆羔羊的接产 | 第64页 |
| ·克隆羔羊的鉴定 | 第64页 |
| ·克隆羊生殖能力检测 | 第64页 |
| ·数据统计 | 第64-66页 |
| ·结果 | 第66-75页 |
| ·绵羊耳皮肤成纤维细胞的分离培养 | 第66-67页 |
| ·绵羊耳皮肤成纤维细胞生长曲线的测定 | 第67页 |
| ·绵羊耳皮肤成纤维细胞的染色体数目分析 | 第67页 |
| ·绵羊卵母细胞的采集与体外成熟 | 第67-68页 |
| ·克隆胚构建中融合条件的摸索 | 第68-69页 |
| ·绵羊体细胞克隆胚的构建、体外发育和胚胎移植 | 第69-71页 |
| ·克隆羔羊的接产及其鉴定 | 第71-74页 |
| ·克隆羊生殖能力检测 | 第74-75页 |
| ·讨论 | 第75-79页 |
| ·卵巢的运输和保存 | 第75-76页 |
| ·卵母细胞体外成熟与重构胚的制作 | 第76-77页 |
| ·克隆胚移植胚龄的摸索 | 第77-79页 |
| 3 绵羊胎儿成纤维细胞的分离培养 | 第79-87页 |
| ·材料 | 第79-80页 |
| ·活体材料 | 第79页 |
| ·实验设备 | 第79页 |
| ·实验用药品、试剂和耗材 | 第79-80页 |
| ·实验方法 | 第80-81页 |
| ·绵羊胎儿性别的鉴定 | 第80-81页 |
| ·绵羊胎儿成纤维细胞的分离培养 | 第81页 |
| ·绵羊胎儿成纤维细胞生长曲线的测定 | 第81页 |
| ·绵羊胎儿成纤维细胞的染色体数目分析 | 第81页 |
| ·结果 | 第81-85页 |
| ·绵羊胎儿的性别鉴定 | 第81-82页 |
| ·绵羊胎儿成纤维细胞的分离培养 | 第82-83页 |
| ·绵羊胎儿成纤维细胞生长曲线的测定 | 第83-84页 |
| ·绵羊胎儿成纤维细胞的染色体数目分析 | 第84-85页 |
| ·讨论 | 第85-87页 |
| 4 绵羊胎儿成纤维细胞的基因转染 | 第87-101页 |
| ·材料 | 第88-89页 |
| ·实验材料 | 第88页 |
| ·实验设备 | 第88页 |
| ·实验用药品、试剂和耗材 | 第88-89页 |
| ·实验方法 | 第89-92页 |
| ·转fat-1 基因表达载体的构建 | 第89-90页 |
| ·绵羊胎儿成纤维细胞 G418 敏感度的研究 | 第90页 |
| ·绵羊胎儿皮肤成纤维细胞的基因转染 | 第90页 |
| ·转基因绵羊胎儿成纤维细胞的筛选和纯化 | 第90-91页 |
| ·转基因绵羊胎儿成纤维细胞的鉴定 | 第91-92页 |
| ·转基因绵羊胎儿成纤维细胞的染色体数目分析 | 第92页 |
| ·结果 | 第92-99页 |
| ·转fat-1 基因表达载体的构建 | 第92-95页 |
| ·绵羊胎儿成纤维细胞 G418 敏感度的研究 | 第95-96页 |
| ·绵羊胎儿成纤维细胞的转染和筛选 | 第96页 |
| ·转基因绵羊胎儿成纤维细胞的鉴定 | 第96-98页 |
| ·转基因绵羊胎儿成纤维细胞的染色体数目分析 | 第98-99页 |
| ·讨论 | 第99-101页 |
| 5 转fat-1 基因克隆胚的构建与移植 | 第101-109页 |
| ·实验材料 | 第102页 |
| ·动物材料 | 第102页 |
| ·实验设备 | 第102页 |
| ·实验用药品、试剂和耗材 | 第102页 |
| ·实验方法 | 第102-103页 |
| ·绵羊卵母细胞的采集和体外培养 | 第102页 |
| ·转fat-1 基因绵羊胎儿成纤维细胞的准备 | 第102-103页 |
| ·受体卵母细胞的准备 | 第103页 |
| ·转fat-1 基因绵羊克隆胚的制备 | 第103页 |
| ·转fat-1 基因绵羊克隆胚的融合 | 第103页 |
| ·转fat-1 基因绵羊克隆胚的激活和发育培养 | 第103页 |
| ·转fat-1 基因绵羊克隆胚的移植 | 第103页 |
| ·转fat-1 基因克隆羔羊的接产 | 第103页 |
| ·结果 | 第103-107页 |
| ·绵羊卵母细胞的采集和体外培养 | 第103-104页 |
| ·转fat-1 基因绵羊克隆胚的制备及其移植 | 第104-105页 |
| ·转fat-1 基因克隆羔羊的接产 | 第105-107页 |
| ·讨论 | 第107-109页 |
| 6 转fat-1 基因克隆羊的鉴定 | 第109-118页 |
| ·材料 | 第109-110页 |
| ·活体材料 | 第109页 |
| ·实验设备 | 第109页 |
| ·实验用药品、试剂和耗材 | 第109-110页 |
| ·实验方法 | 第110页 |
| ·转基因克隆羊羊膜细胞的培养 | 第110页 |
| ·羊膜细胞染色体数目的分析 | 第110页 |
| ·转基因克隆羊的鉴定 | 第110页 |
| ·结果 | 第110-117页 |
| ·转基因克隆羊羊膜细胞的培养 | 第110-111页 |
| ·羊膜细胞染色体数目的分析 | 第111页 |
| ·转基因克隆羊的鉴定 | 第111-117页 |
| ·讨论 | 第117-118页 |
| 7 结论 | 第118-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |
| 参考文献 | 第120-151页 |
| 作者简介 | 第151-152页 |
