| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 1 文献综述 | 第16-44页 |
| 1.1 引言 | 第16页 |
| 1.2 siRNA治疗药物简介 | 第16-20页 |
| 1.2.1 siRNA的作用机制 | 第16-18页 |
| 1.2.2 siRNA药物分子的研发及应用 | 第18-20页 |
| 1.2.3 siRNA药物应用中存在的问题 | 第20页 |
| 1.3 siRNA药物的输递体系 | 第20-34页 |
| 1.3.1 病毒载体 | 第21-23页 |
| 1.3.2 非病毒载体 | 第23-34页 |
| 1.3.2.1 阳离子脂质体 | 第23-28页 |
| 1.3.2.2 合物 | 第28-30页 |
| 1.3.2.3 枝状大分子 | 第30-32页 |
| 1.3.2.4 无机纳米载体 | 第32-34页 |
| 1.4 siRNA药物输递障碍及解决方法 | 第34-38页 |
| 1.4.1 siRNA药物的高效包载 | 第34页 |
| 1.4.2 血液稳定性 | 第34-35页 |
| 1.4.3 细胞内吞 | 第35页 |
| 1.4.4 内涵体逃逸 | 第35页 |
| 1.4.5 病因复杂性 | 第35页 |
| 1.4.6 PEG在克服输递体系障碍中的应用 | 第35-38页 |
| 1.5 两性离子聚合物抗非特异性蛋白吸附材料 | 第38-40页 |
| 1.6 立题依据及研究目标 | 第40-44页 |
| 1.6.1 论文立题依据 | 第40-41页 |
| 1.6.2 论文工作目标 | 第41-44页 |
| 2 DSPE-PCB_n修饰的新型长循环阳离子脂质体用于siRNA药物的递送 | 第44-74页 |
| 2.1 引言 | 第44-45页 |
| 2.2 实验方法 | 第45-54页 |
| 2.2.1 实验材料及药品 | 第45-46页 |
| 2.2.2 细胞与动物 | 第46页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第46页 |
| 2.2.4 DSPE-PCB_n脂质分子的合成与表征 | 第46-48页 |
| 2.2.5 阳离子脂质体和复合物的制备与表征 | 第48-49页 |
| 2.2.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第49页 |
| 2.2.7 siRNA药物包埋率的测定 | 第49-50页 |
| 2.2.8 DSPE-PCB_n阳离子脂质体/siRNA复合物的血清稳定性 | 第50页 |
| 2.2.9 DSPE-PCB_n阳离子脂质体/siRNA复合物的细胞毒性 | 第50页 |
| 2.2.10 流式细胞仪测定复合物的细胞内吞 | 第50页 |
| 2.2.11 激光扫描共聚焦显微镜测定复合物的细胞内吞和内涵体逃逸 | 第50-51页 |
| 2.2.12 IN Cell Analyzer 2000测定复合物的内涵体逃逸能力 | 第51页 |
| 2.2.13 DSPE-PCB_n阳离子脂质体/siRNA复合物的pH敏感性测定 | 第51页 |
| 2.2.14 荧光共振能力转移实验 | 第51-52页 |
| 2.2.15 DSPE-PCB_n阳离子脂质体/siRNA复合物的体外作用效果 | 第52页 |
| 2.2.16 DSPE-PCB_n阳离子脂质体/siRNA复合物的生物分布测定 | 第52-53页 |
| 2.2.17 DSPE-PCB_n阳离子脂质体/siRNA复合物的体内作用效果 | 第53页 |
| 2.2.18 数据分析 | 第53-54页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第54-71页 |
| 2.3.1 DSPE-PCB_n脂质分子的表征 | 第54-55页 |
| 2.3.2 阳离子脂质体和复合物的物理化学表征 | 第55-57页 |
| 2.3.3 阳离子脂质体对siRNA药物的复合能力 | 第57-59页 |
| 2.3.4 DSPE-PCB_n阳离子脂质体/siRNA复合物的血清稳定性 | 第59-60页 |
| 2.3.5 DSPE-PCB_(20)阳离子脂质体/siRNA复合物的生物相容性 | 第60-61页 |
| 2.3.6 DSPE-PCB_(20)阳离子脂质体/siRNA复合物的细胞内吞 | 第61-63页 |
| 2.3.7 DSPE-PCB_(20)阳离子脂质体/siRNA复合物的内涵体逃逸能力 | 第63-66页 |
| 2.3.8 DSPE-PCB_(20)阳离子脂质体/siRNA复合物的酸性敏感性 | 第66-67页 |
| 2.3.9 DSPE-PCB_(20)阳离子脂质体/siRNA复合物的内涵体膜扰动能力 | 第67-68页 |
| 2.3.10 DSPE-PCB_(20)阳离子脂质体/siRNA复合物的体外基因沉默效果 | 第68-69页 |
| 2.3.11 DSPE-PCB_(20)阳离子脂质体/siRNA复合物的体内生物分布 | 第69-70页 |
| 2.3.12 DSPE-PCB_(20)阳离子脂质体/siRNA复合物的体内作用效果 | 第70-71页 |
| 2.4 本章小结 | 第71-74页 |
| 3 避免ABC现象的DSPE-PCB_n长循环阳离子脂质体用于肿瘤治疗 | 第74-104页 |
| 3.1 引言 | 第74-75页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第75-84页 |
| 3.2.1 实验试剂 | 第75-76页 |
| 3.2.2 细胞与动物 | 第76页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第76页 |
| 3.2.4 阳离子脂质体和复合物的制备与表征 | 第76-77页 |
| 3.2.5 siRNA药物包埋率的测定 | 第77页 |
| 3.2.6 DSPE-PCB_(20)阳离子脂质体/siRNA复合物的血清稳定性 | 第77页 |
| 3.2.7 DSPE-PCB_(20)阳离子脂质体/siRNA复合物的细胞毒性 | 第77-78页 |
| 3.2.8 流式细胞仪测定复合物的入胞能力和机制 | 第78页 |
| 3.2.9 阳离子脂质体/siRNA复合物的内涵体逃逸能力测定 | 第78-79页 |
| 3.2.10 定量siRNA药物的细胞内释放 | 第79页 |
| 3.2.11 DSPE-PCB_(20)阳离子脂质体/siRNA复合物的pH敏感性测定 | 第79页 |
| 3.2.12 DSPE-PCB_(20)阳离子脂质体/siRNA复合物的药物动力学 | 第79-80页 |
| 3.2.13 DSPE-PCB_(20)阳离子脂质体/siRNA复合物的脏器分布 | 第80-81页 |
| 3.2.14 血液中IgM和IgG蛋白的测定 | 第81-82页 |
| 3.2.15 阳离子脂质体/siRNA复合物的肿瘤分布 | 第82-83页 |
| 3.2.16 阳离子脂质体/siRNA复合物的肿瘤抑制效果 | 第83-84页 |
| 3.2.17 数据分析 | 第84页 |
| 3.3 结果与分析 | 第84-102页 |
| 3.3.1 阳离子脂质体及复合物的表征 | 第84-87页 |
| 3.3.2 DSPE-PCB_(20)阳离子脂质体/siRNA复合物的血清稳定性 | 第87-88页 |
| 3.3.3 DSPE-PCB_(20)阳离子脂质体/siRNA复合物的细胞毒性 | 第88-89页 |
| 3.3.4 DSPE-PCB_(20)阳离子脂质体/siRNA复合物的药物动力学性质 | 第89-90页 |
| 3.3.5 DSPE-PCB_(20)阳离子脂质体/siRNA复合物的肝、脾脏分布 | 第90-91页 |
| 3.3.6 血浆中IgM和IgG蛋白浓度变化水平测定 | 第91-93页 |
| 3.3.7 DSPE-PCB_(20)阳离子脂质体/siRNA复合物的肿瘤分布 | 第93-96页 |
| 3.3.8 DSPE-PCB_(20)阳离子脂质体/siRNA复合物的肿瘤细胞内吞作用 | 第96-97页 |
| 3.3.9 DSPE-PCB_(20)阳离子脂质体/siRNA复合物的内涵体逃逸 | 第97-99页 |
| 3.3.10 DSPE-PCB_(20)阳离子脂质体/siRNA复合物的体内肿瘤抑制效果 | 第99-100页 |
| 3.3.11 DSPE-PCB_(20)阳离子脂质体/siRNA复合物靶基因沉默效果 | 第100-101页 |
| 3.3.12 TUNEL肿瘤组织细胞凋亡检测 | 第101-102页 |
| 3.4 本章小结 | 第102-104页 |
| 4 程序释放CPT-PCB_n前药脂质体siRNA药物输递体系用于肿瘤治疗 | 第104-146页 |
| 4.1 引言 | 第104-106页 |
| 4.2 实验仪器与方法 | 第106-117页 |
| 4.2.1 实验材料与药品 | 第106-107页 |
| 4.2.2 细胞与动物 | 第107页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第107页 |
| 4.2.4 CPT-PCB_n类脂质分子的合成与表征 | 第107-110页 |
| 4.2.5 临界胶束浓度的测定 | 第110-111页 |
| 4.2.6 CPT-PCB_n阳离子脂质体及复合物的制备与表征 | 第111页 |
| 4.2.7 CPT及siRNA药物包埋率和载药率的测定 | 第111-112页 |
| 4.2.8 CPT阳离子脂质体/siRNA复合物的血清稳定性 | 第112页 |
| 4.2.9 CPT的药物释放 | 第112页 |
| 4.2.10 CPT阳离子脂质体/siRNA复合物的pH敏感性 | 第112-113页 |
| 4.2.11 CPT阳离子脂质体/siRNA复合物的细胞内吞能力和机制 | 第113页 |
| 4.2.12 CPT阳离子脂质体/siRNA复合物的内涵体逃逸 | 第113-114页 |
| 4.2.13 CPT阳离子脂质体/siRNA复合物的细胞内药物释放 | 第114页 |
| 4.2.14 CPT阳离子脂质体/siRNA复合物的靶基因沉默效果 | 第114页 |
| 4.2.15 测定CPT阳离子脂质体/siRNA复合物诱导细胞凋亡能力 | 第114页 |
| 4.2.16 测定CPT阳离子脂质体/siRNA复合物的细胞毒性 | 第114-115页 |
| 4.2.17 CPT的药物动力学测定 | 第115页 |
| 4.2.18 CPT阳离子脂质体/siRNA复合物的生物分布测定 | 第115-116页 |
| 4.2.19 CPT阳离子脂质体/siRNA复合物的肿瘤抑制效果 | 第116-117页 |
| 4.2.20 数据分析 | 第117页 |
| 4.3 结果与分析 | 第117-144页 |
| 4.3.1 CPT-PCBn类脂质分子的表征 | 第117-121页 |
| 4.3.2 CPT-PCB_n质分子的临界胶束浓度 | 第121页 |
| 4.3.3 CPT阳离子脂质体及复合物的物理化学表征 | 第121-125页 |
| 4.3.4 CPT阳离子脂质体/siRNA复合物的血清稳定性 | 第125-126页 |
| 4.3.5 CPT在不同环境中的药物释放 | 第126-127页 |
| 4.3.6 PCB和PMPC修饰复合物的质子缓冲能力 | 第127-128页 |
| 4.3.7 CPT阳离子脂质体/siRNA复合物的细胞内吞和机制 | 第128-131页 |
| 4.3.8 CPT阳离子脂质体/siRNA复合物的内涵体逃逸 | 第131-134页 |
| 4.3.9 CPT阳离子脂质体/siRNA复合物的细胞内药物释放 | 第134页 |
| 4.3.10 CPT阳离子脂质体/siRNA复合物的细胞水平基因沉默效果 | 第134-136页 |
| 4.3.11 CPT阳离子脂质体/siRNA复合物的细胞水平抑制效果 | 第136-138页 |
| 4.3.12 CPT阳离子脂质体/siRNA复合物的药物动力学和生物分布 | 第138-141页 |
| 4.3.13 CPT阳离子脂质体/siRNA复合物的体内肿瘤抑制效果 | 第141-144页 |
| 4.4 本章小结 | 第144-146页 |
| 5 结论和展望 | 第146-150页 |
| 5.1 引言 | 第146页 |
| 5.2 主要结论 | 第146-148页 |
| 5.3 创新点总结 | 第148页 |
| 5.4 今后的工作建议 | 第148-150页 |
| 参考文献 | 第150-162页 |
| 主要符号表 | 第162-164页 |
| 个人简历及发表文章目录 | 第164-166页 |
| 致谢 | 第166页 |
