摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
中英文缩略表 | 第8-13页 |
第一章 绪论 | 第13-25页 |
·小菜蛾概况 | 第13-14页 |
·小菜蛾抗药性研究进展 | 第14-19页 |
·小菜蛾抗药性的发生现状 | 第14页 |
·小菜蛾抗药性形成与发展的机制 | 第14-16页 |
·小菜蛾的抗药性综合治理 | 第16-19页 |
·阿维菌素研究概况 | 第19-21页 |
·阿维菌素的作用机理 | 第19-20页 |
·害虫对阿维菌素的抗药性和交互抗性 | 第20-21页 |
·害虫对阿维菌素的抗性遗传方式及分子机制研究 | 第21页 |
·谷氨酸受体的研究进展 | 第21-24页 |
·GluCl受体的分子特性 | 第22-23页 |
·GluCl受体的生理功能 | 第23-24页 |
·研究目的与意义 | 第24-25页 |
第二章 阿维菌素对小菜蛾的抗性筛选 | 第25-28页 |
·材料与方法 | 第25页 |
·供试昆虫 | 第25页 |
·供试药剂 | 第25页 |
·主要研究方法 | 第25-26页 |
·小菜蛾的饲养 | 第25页 |
·阿维菌素抗性小菜蛾的汰选 | 第25-26页 |
·小菜蛾的生物测定 | 第26页 |
·结果与分析 | 第26-27页 |
·讨论 | 第27-28页 |
第三章 小菜蛾GluClα亚基基因的克隆和序列分析 | 第28-40页 |
·材料与方法 | 第28-29页 |
·供试昆虫 | 第28页 |
·主要仪器 | 第28页 |
·主要试剂及试剂盒 | 第28页 |
·培养基及常用溶液 | 第28页 |
·引物和测序 | 第28-29页 |
·试验方法 | 第29-32页 |
·总RNA提取 | 第29页 |
·RNA检测 | 第29页 |
·cDNA合成 | 第29页 |
·cDNA合成效率的内参检测 | 第29-30页 |
·小菜蛾GluClα亚基全长序列的克隆 | 第30页 |
·PCR产物的回收与纯化 | 第30-31页 |
·PCR纯化产物与pEASY-T1载体的连接 | 第31页 |
·PCR纯化产物与pEASY-T1载体的转化 | 第31页 |
·阳性克隆检测 | 第31-32页 |
·序列测定 | 第32页 |
·生物信息学分析 | 第32页 |
·结果与分析 | 第32-36页 |
·小菜蛾总RNA的提取 | 第32-33页 |
·Actin检测cDNA效果 | 第33页 |
·cDNA全长序列的验证 | 第33-34页 |
·小菜蛾GluClα亚基cDNA测序结果及推测的氨基酸序列 | 第34-36页 |
·GluClα推测的氨基酸生物信息学分析 | 第36-39页 |
·氨基酸序列信号肽分析 | 第36页 |
·GluClα推导氨基酸二级结构预测 | 第36-37页 |
·GluClα氨基酸跨膜结构预测 | 第37-38页 |
·G1uClα编码蛋白的氨基酸组成 | 第38页 |
·GluClα推导氨基酸亲脂性分析 | 第38-39页 |
·GluClα蛋白的分子量及等电点 | 第39页 |
·讨论 | 第39-40页 |
第四章 抗性品系小菜蛾GluClα亚基基因克隆和变异位点分析 | 第40-48页 |
·材料与方法 | 第40-41页 |
·供试昆虫 | 第40-41页 |
·主要仪器 | 第41页 |
·主要试剂及试剂盒 | 第41页 |
·培养基及常用溶液 | 第41页 |
·引物和测序 | 第41页 |
·试验方法 | 第41-42页 |
·总RNA提取 | 第41页 |
·RNA检测 | 第41页 |
·cDNA合成 | 第41页 |
·cDNA合成效率的内参检测 | 第41页 |
·不同品系小菜蛾GluClα亚基全长序列的克隆 | 第41-42页 |
·PCR产物的回收与纯化 | 第42页 |
·PCR纯化产物与pEASY-T1载体的连接 | 第42页 |
·PCR纯化产物与pEASY-T1载体的转化 | 第42页 |
·阳性克隆检测 | 第42页 |
·序列测定 | 第42页 |
·突变点分析 | 第42页 |
·结果与分析 | 第42-46页 |
·测序结果比对 | 第42-45页 |
·不同抗性水平小菜蛾种群GluClα基因差异分析 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46-48页 |
第五章 不同品系小菜蛾GluClα亚基基因的表达量分析 | 第48-60页 |
·材料与方法 | 第48-49页 |
·供试昆虫 | 第48页 |
·主要仪器 | 第48页 |
·主要试剂及试剂盒 | 第48页 |
·培养基及常用溶液 | 第48页 |
·引物和测序 | 第48-49页 |
·试验方法 | 第49-51页 |
·总RNA提取 | 第49页 |
·cDNA合成 | 第49页 |
·实时荧光定量PCR引物的设计 | 第49-50页 |
·内参基因的克隆 | 第50-51页 |
·实时荧光定量PCR条件的优化 | 第51页 |
·结果分析 | 第51-59页 |
·总RNA的提取 | 第51页 |
·cDNA的合成 | 第51-52页 |
·传统PCR验证引物特异性 | 第52页 |
·β-Actin引物的内参验证 | 第52-53页 |
·qRT-PCR条件的优化 | 第53页 |
·标准曲线和扩增曲线的建立 | 第53-54页 |
·扩增曲线的建立 | 第54-55页 |
·熔解曲线的建立 | 第55-56页 |
·可重复性GluCl基因表达差异的检测 | 第56-57页 |
·田间小菜蛾种群GluClα相对表达量的测定 | 第57-58页 |
·抗Bt种群小菜蛾GluClα基因表达量测定 | 第58-59页 |
·讨论 | 第59-60页 |
第六章 全文结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-66页 |
附录 | 第66-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
作者简历 | 第74页 |