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GluCl受体在小菜蛾对阿维菌素抗性中的作用研究

摘要第1-7页
Abstract第7-8页
中英文缩略表第8-13页
第一章 绪论第13-25页
   ·小菜蛾概况第13-14页
   ·小菜蛾抗药性研究进展第14-19页
     ·小菜蛾抗药性的发生现状第14页
     ·小菜蛾抗药性形成与发展的机制第14-16页
     ·小菜蛾的抗药性综合治理第16-19页
   ·阿维菌素研究概况第19-21页
     ·阿维菌素的作用机理第19-20页
     ·害虫对阿维菌素的抗药性和交互抗性第20-21页
     ·害虫对阿维菌素的抗性遗传方式及分子机制研究第21页
   ·谷氨酸受体的研究进展第21-24页
     ·GluCl受体的分子特性第22-23页
     ·GluCl受体的生理功能第23-24页
   ·研究目的与意义第24-25页
第二章 阿维菌素对小菜蛾的抗性筛选第25-28页
   ·材料与方法第25页
     ·供试昆虫第25页
     ·供试药剂第25页
   ·主要研究方法第25-26页
     ·小菜蛾的饲养第25页
     ·阿维菌素抗性小菜蛾的汰选第25-26页
     ·小菜蛾的生物测定第26页
   ·结果与分析第26-27页
   ·讨论第27-28页
第三章 小菜蛾GluClα亚基基因的克隆和序列分析第28-40页
   ·材料与方法第28-29页
     ·供试昆虫第28页
     ·主要仪器第28页
     ·主要试剂及试剂盒第28页
     ·培养基及常用溶液第28页
     ·引物和测序第28-29页
   ·试验方法第29-32页
     ·总RNA提取第29页
     ·RNA检测第29页
     ·cDNA合成第29页
     ·cDNA合成效率的内参检测第29-30页
     ·小菜蛾GluClα亚基全长序列的克隆第30页
     ·PCR产物的回收与纯化第30-31页
     ·PCR纯化产物与pEASY-T1载体的连接第31页
     ·PCR纯化产物与pEASY-T1载体的转化第31页
     ·阳性克隆检测第31-32页
     ·序列测定第32页
     ·生物信息学分析第32页
   ·结果与分析第32-36页
     ·小菜蛾总RNA的提取第32-33页
     ·Actin检测cDNA效果第33页
     ·cDNA全长序列的验证第33-34页
     ·小菜蛾GluClα亚基cDNA测序结果及推测的氨基酸序列第34-36页
   ·GluClα推测的氨基酸生物信息学分析第36-39页
     ·氨基酸序列信号肽分析第36页
     ·GluClα推导氨基酸二级结构预测第36-37页
     ·GluClα氨基酸跨膜结构预测第37-38页
     ·G1uClα编码蛋白的氨基酸组成第38页
     ·GluClα推导氨基酸亲脂性分析第38-39页
     ·GluClα蛋白的分子量及等电点第39页
   ·讨论第39-40页
第四章 抗性品系小菜蛾GluClα亚基基因克隆和变异位点分析第40-48页
   ·材料与方法第40-41页
     ·供试昆虫第40-41页
     ·主要仪器第41页
     ·主要试剂及试剂盒第41页
     ·培养基及常用溶液第41页
     ·引物和测序第41页
   ·试验方法第41-42页
     ·总RNA提取第41页
     ·RNA检测第41页
     ·cDNA合成第41页
     ·cDNA合成效率的内参检测第41页
     ·不同品系小菜蛾GluClα亚基全长序列的克隆第41-42页
     ·PCR产物的回收与纯化第42页
     ·PCR纯化产物与pEASY-T1载体的连接第42页
     ·PCR纯化产物与pEASY-T1载体的转化第42页
     ·阳性克隆检测第42页
     ·序列测定第42页
     ·突变点分析第42页
   ·结果与分析第42-46页
     ·测序结果比对第42-45页
     ·不同抗性水平小菜蛾种群GluClα基因差异分析第45-46页
   ·讨论第46-48页
第五章 不同品系小菜蛾GluClα亚基基因的表达量分析第48-60页
   ·材料与方法第48-49页
     ·供试昆虫第48页
     ·主要仪器第48页
     ·主要试剂及试剂盒第48页
     ·培养基及常用溶液第48页
     ·引物和测序第48-49页
   ·试验方法第49-51页
     ·总RNA提取第49页
     ·cDNA合成第49页
     ·实时荧光定量PCR引物的设计第49-50页
     ·内参基因的克隆第50-51页
     ·实时荧光定量PCR条件的优化第51页
   ·结果分析第51-59页
     ·总RNA的提取第51页
     ·cDNA的合成第51-52页
     ·传统PCR验证引物特异性第52页
     ·β-Actin引物的内参验证第52-53页
     ·qRT-PCR条件的优化第53页
     ·标准曲线和扩增曲线的建立第53-54页
     ·扩增曲线的建立第54-55页
     ·熔解曲线的建立第55-56页
     ·可重复性GluCl基因表达差异的检测第56-57页
     ·田间小菜蛾种群GluClα相对表达量的测定第57-58页
     ·抗Bt种群小菜蛾GluClα基因表达量测定第58-59页
   ·讨论第59-60页
第六章 全文结论第60-61页
参考文献第61-66页
附录第66-73页
致谢第73-74页
作者简历第74页

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