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Btg4在小鼠卵母细胞和早期胚胎发育过程中的重要作用

致谢第4-5页
前言第5-10页
摘要第10-12页
Abstract第12-13页
缩写、符号清单、术语表第14-17页
1 绪论第17-19页
2 材料与方法第19-34页
    2.1 小鼠构建第19-20页
    2.2 小鼠基因型鉴定第20-21页
    2.3 卵巢形态学分析第21-23页
    2.4 卵母细胞超排实验第23页
    2.5 卵母细胞体外培养第23页
    2.6 早期胚胎收集以及体外培养第23-24页
    2.7 BrdU染色第24页
    2.8 卵母细胞和胚胎荧光染色第24-25页
    2.9 卵母细胞染色体铺片第25-26页
    2.10 小鼠胚胎移植第26页
    2.11 Btg4蛋白结构预测第26-27页
    2.12 点突变第27-28页
    2.13 免疫沉淀第28页
    2.14 实时定量PCR第28-31页
    2.15 单细胞RNA测序第31页
    2.16 体外去腺苷酸化实验第31页
    2.17 细胞免疫荧光染色分析第31-32页
    2.18 卵母细胞注射RNA第32页
    2.19 Western blot第32-34页
3 结果第34-48页
    3.1 TALEN小鼠构建以及鉴定第34-35页
    3.2 Btg4是一个典型的母源效应基因第35-36页
    3.3 Btg4~(-/-)小鼠体重上没有显著的变化并且雌性不育第36页
    3.4 Btg4~(-/-)雌鼠卵巢形态学分析第36-37页
    3.5 Btg4敲除对卵母细胞减数分裂以及MII阻滞的没有影响第37-38页
    3.6 MII期卵母细胞染色体铺片结果第38-39页
    3.7 Btg4~(-/-)雌鼠卵母细胞阻滞受精卵时期第39-40页
    3.8 Btg4~(-/-)卵母细胞受精后形成原核,但是核膜不破裂第40-41页
    3.9 免疫荧光分析受精卵阶段的原核形成情况第41-42页
    3.10 胚胎移植分析Btg4~(-/-)雌性不育表型第42-43页
    3.11 BTG4能与CNOT7相互结合第43-44页
    3.12 Btg4~(-/-)卵母细胞受精后形成的受精卵的mRNA比野生型mRNA更加稳定第44页
    3.13 单细胞RNA测序结果第44-47页
    3.14 BTG4促进CNOT7在体外的去腺苷酸化活性第47-48页
4 讨论第48-51页
参考文献第51-57页
作者简历第57页

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