致谢 | 第4-5页 |
前言 | 第5-10页 |
摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-13页 |
缩写、符号清单、术语表 | 第14-17页 |
1 绪论 | 第17-19页 |
2 材料与方法 | 第19-34页 |
2.1 小鼠构建 | 第19-20页 |
2.2 小鼠基因型鉴定 | 第20-21页 |
2.3 卵巢形态学分析 | 第21-23页 |
2.4 卵母细胞超排实验 | 第23页 |
2.5 卵母细胞体外培养 | 第23页 |
2.6 早期胚胎收集以及体外培养 | 第23-24页 |
2.7 BrdU染色 | 第24页 |
2.8 卵母细胞和胚胎荧光染色 | 第24-25页 |
2.9 卵母细胞染色体铺片 | 第25-26页 |
2.10 小鼠胚胎移植 | 第26页 |
2.11 Btg4蛋白结构预测 | 第26-27页 |
2.12 点突变 | 第27-28页 |
2.13 免疫沉淀 | 第28页 |
2.14 实时定量PCR | 第28-31页 |
2.15 单细胞RNA测序 | 第31页 |
2.16 体外去腺苷酸化实验 | 第31页 |
2.17 细胞免疫荧光染色分析 | 第31-32页 |
2.18 卵母细胞注射RNA | 第32页 |
2.19 Western blot | 第32-34页 |
3 结果 | 第34-48页 |
3.1 TALEN小鼠构建以及鉴定 | 第34-35页 |
3.2 Btg4是一个典型的母源效应基因 | 第35-36页 |
3.3 Btg4~(-/-)小鼠体重上没有显著的变化并且雌性不育 | 第36页 |
3.4 Btg4~(-/-)雌鼠卵巢形态学分析 | 第36-37页 |
3.5 Btg4敲除对卵母细胞减数分裂以及MII阻滞的没有影响 | 第37-38页 |
3.6 MII期卵母细胞染色体铺片结果 | 第38-39页 |
3.7 Btg4~(-/-)雌鼠卵母细胞阻滞受精卵时期 | 第39-40页 |
3.8 Btg4~(-/-)卵母细胞受精后形成原核,但是核膜不破裂 | 第40-41页 |
3.9 免疫荧光分析受精卵阶段的原核形成情况 | 第41-42页 |
3.10 胚胎移植分析Btg4~(-/-)雌性不育表型 | 第42-43页 |
3.11 BTG4能与CNOT7相互结合 | 第43-44页 |
3.12 Btg4~(-/-)卵母细胞受精后形成的受精卵的mRNA比野生型mRNA更加稳定 | 第44页 |
3.13 单细胞RNA测序结果 | 第44-47页 |
3.14 BTG4促进CNOT7在体外的去腺苷酸化活性 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
作者简历 | 第57页 |