| 摘要 | 第3-6页 |
| abstract | 第6-9页 |
| 第1章 引言 | 第13-16页 |
| 第2章 材料与方法 | 第16-29页 |
| 2.1 主要试剂 | 第16-17页 |
| 2.2 主要仪器 | 第17页 |
| 2.3 健康人外周血 | 第17页 |
| 2.4 外周血单个核细胞（PBMC）的提取 | 第17-18页 |
| 2.5 免疫磁珠分选与纯化CD14~+单核细胞 | 第18-19页 |
| 2.6 人单核细胞来源巨噬细胞的培养及鉴定 | 第19页 |
| 2.7 巨噬细胞极化模型建立 | 第19-20页 |
| 2.8 巨噬细胞极化模型的鉴定 | 第20-23页 |
| 2.8.1 流式细胞术检测巨噬细胞表面分子CD86和CD206的表达 | 第20页 |
| 2.8.2 ELISA检测巨噬细胞培养上清液中IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α、CCL17和CCL18的分泌 | 第20-21页 |
| 2.8.3 RT-PCR检测巨噬细胞极化基因CXCL10、CXCL11、Nos2、CCL17、CCL18、CCL22的表达 | 第21-23页 |
| 2.9 lncRNA和mRNA芯片检测 | 第23-25页 |
| 2.9.1 样品标记 | 第23-24页 |
| 2.9.2 cRNA样品片段化和芯片杂交 | 第24-25页 |
| 2.9.3 芯片清洗及扫描 | 第25页 |
| 2.10 筛选差异表达的lncRNA和mRNA | 第25页 |
| 2.11 对差异表达的mRNA数据进行Pathway及GO分析 | 第25-26页 |
| 2.12 RT-PCR验证部分差异表达的lncRNA | 第26-27页 |
| 2.12.1 lncRNA引物设计及合成 | 第26页 |
| 2.12.2 巨噬细胞极化模型的构建 | 第26页 |
| 2.12.3 细胞总RNA的提取 | 第26页 |
| 2.12.4 RT-PCR检测差异lncRNA表达 | 第26-27页 |
| 2.13 巨噬细胞重极化模型的构建 | 第27页 |
| 2.14 细胞转染 | 第27页 |
| 2.15 RT-PCR检测不同极化类型巨噬细胞中lncRNA NEAT1的表达 | 第27页 |
| 2.16 ELISA检测巨噬细胞培养上清液中IL-10 和IL-12 的分泌 | 第27页 |
| 2.17 统计学分析 | 第27-29页 |
| 第3章 结果 | 第29-49页 |
| 3.1 原代巨噬细胞的培养和鉴定 | 第29页 |
| 3.2 M1型和M2型巨噬细胞的鉴定 | 第29-33页 |
| 3.2.1 极化的巨噬细胞光学显微镜下形态变化 | 第29-30页 |
| 3.2.2 ELISA检测巨噬细胞IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α、CCL17和CCL18的分泌 | 第30-31页 |
| 3.2.3 RT-PCR检测巨噬细胞极化标志基因的表达 | 第31-32页 |
| 3.2.4 流式细胞术检测IFN-γ 及LPS、IL-4 刺激后的巨噬细胞CD86和CD206的表达 | 第32-33页 |
| 3.3 RNA质量控制 | 第33页 |
| 3.4 芯片实验结果 | 第33-43页 |
| 3.4.1 芯片杂交扫描图像 | 第33-34页 |
| 3.4.2 箱形图（Box-Plot）分析 | 第34页 |
| 3.4.3 散点图（Scatter-Plot）分析 | 第34-35页 |
| 3.4.4 分层群聚图（Hierarchical Clustering）分析 | 第35页 |
| 3.4.5 lncRNA和mRNA数据差异表达分析 | 第35-39页 |
| 3.4.6 差异表达mRNA的生物信息学分析 | 第39-43页 |
| 3.5 RT-PCR验证芯片结果 | 第43-44页 |
| 3.6 巨噬细胞极化表型相互转换时lncRNA NEAT1的表达变化 | 第44-46页 |
| 3.7 干扰lncRNA NEAT1表达有效抑制M1型巨噬细胞极化，促进M2型巨噬细胞极化 | 第46-49页 |
| 第4章 讨论 | 第49-52页 |
| 第5章 结论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第58-59页 |
| 综述 | 第59-68页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
