摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
缩略语表(Abbreviation) | 第13-16页 |
第1章 文献综述 | 第16-30页 |
1.1 小反刍兽疫概述 | 第16页 |
1.2 小反刍兽疫病原学特征 | 第16-19页 |
1.2.1 病毒的分类、形态与结构 | 第16-17页 |
1.2.2 病毒基因组的结构与功能 | 第17-18页 |
1.2.3 PPRV病毒的理化特性 | 第18页 |
1.2.4 培养特性 | 第18-19页 |
1.2.5 病毒的致病机理 | 第19页 |
1.3 小反刍兽疫的流行病学 | 第19-21页 |
1.3.1 分布和流行地域 | 第19-20页 |
1.3.2 贮存宿主和传播媒介 | 第20页 |
1.3.3 易感动物 | 第20页 |
1.3.4 流行特点 | 第20-21页 |
1.3.5 症状和病变 | 第21页 |
1.4 小反刍兽疫的免疫防控 | 第21-23页 |
1.4.1 RPV异源弱毒疫苗 | 第22页 |
1.4.2 PPRV同源弱毒疫苗 | 第22页 |
1.4.3 基因工程疫苗 | 第22-23页 |
1.5 小反刍兽疫的检测技术 | 第23-30页 |
1.5.1 病料采集 | 第23-24页 |
1.5.2 病原学检测 | 第24-26页 |
1.5.3 血清学检测 | 第26-27页 |
1.5.4 分子生物学检测 | 第27-30页 |
第2章 小反刍兽疫血清抗体超敏荧光量子点免疫层析快速检测技术(QDs-LFIAS)的建立及评估 | 第30-40页 |
2.1 研究目的与意义 | 第30页 |
2.2 实验材料 | 第30-31页 |
2.2.1 细胞、毒株 | 第30页 |
2.2.2 血清 | 第30-31页 |
2.2.2.1 阳性血清 | 第30-31页 |
2.2.2.2 质控血清 | 第31页 |
2.2.2.3 田间样本 | 第31页 |
2.2.3 其它试剂与材料 | 第31页 |
2.3 实验方法 | 第31-33页 |
2.3.1 PPRV重组N蛋白抗原的制备 | 第31页 |
2.3.2 荧光量子点CdSe/ZnS PMAH-QDs与SPG标记偶联 | 第31-32页 |
2.3.3 量子点侧向流动免疫层析检测体系(QDs-LFIAS)的构建 | 第32页 |
2.3.4 QDs-LFIAS的检测步骤 | 第32-33页 |
2.3.5 QDs-LFIAS的分析学特异性、敏感性及最低检测限(LOD)评估 | 第33页 |
2.3.6 田间样本检测 | 第33页 |
2.4 结果与分析 | 第33-38页 |
2.4.1 PPRV N蛋白鉴定及划线浓度的选择 | 第33-34页 |
2.4.2 水溶性羧基功能化量子点与SPG的偶联 | 第34-35页 |
2.4.3 QDs-LFIAS的检测低限(LOD) | 第35-36页 |
2.4.4 QDs-LFIAS分析敏感性、特异性 | 第36-38页 |
2.4.5 田间样品检测 | 第38页 |
2.5 讨论 | 第38-40页 |
第3章 小反刍兽疫病毒双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测方法的建立及评估 | 第40-61页 |
3.1 研究目的与意义 | 第40页 |
3.2 实验材料 | 第40-41页 |
3.2.1 病毒和细胞株 | 第40-41页 |
3.2.2 血清 | 第41页 |
3.2.3 实验动物 | 第41页 |
3.2.4 主要生化试剂及试剂盒 | 第41页 |
3.3 实验方法 | 第41-46页 |
3.3.1 PPRV N蛋白单克隆抗体的制备 | 第41-44页 |
3.3.2 抗PPRV特异性IgY抗体的制备 | 第44-45页 |
3.3.3 PPRV双抗体夹心ELISA方法的建立 | 第45-46页 |
3.4 结果与分析 | 第46-58页 |
3.4.1 PPRV N蛋白单克隆抗体的制备 | 第46-51页 |
3.4.2 PPRV特异性IgY的制备 | 第51-53页 |
3.4.3 PPRV双抗体夹心ELISA方法的建立 | 第53-58页 |
3.5 讨论 | 第58-61页 |
3.5.1 双抗体夹心ELISA方法(DAS-ELISA) | 第58-59页 |
3.5.2 单克隆抗体 | 第59页 |
3.5.3 鸡卵黄免疫球蛋白(egg yolk immunoglobulin,IgY) | 第59-61页 |
第4章 区分小反刍兽疫疫苗株与野毒株的实时荧光定量RT-PCR鉴别诊断方法的建立及评估 | 第61-73页 |
4.1 研究目的与意义 | 第61页 |
4.2 实验材料 | 第61-64页 |
4.2.1 病毒与细胞 | 第61页 |
4.2.2 病毒核酸、生化试剂及试剂盒 | 第61-62页 |
4.2.3 引物和探针 | 第62-63页 |
4.2.4 临床检测样本 | 第63-64页 |
4.3 实验方法 | 第64-67页 |
4.3.1 小反刍兽疫疫苗病毒株基因组序列的测定 | 第64-65页 |
4.3.2 小反刍兽疫疫苗株病毒滴度的测定 | 第65页 |
4.3.3 病毒核酸的提取 | 第65页 |
4.3.4 PPRV实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立和条件优化 | 第65-66页 |
4.3.5 PPRV实时荧光定量RT-PCR的特异性试验 | 第66页 |
4.3.6 PPRV实时荧光定量RT-PCR灵敏度/检测低限(LOD)试验 | 第66页 |
4.3.7 PPRV实时荧光定量RT-PCR的重复性试验 | 第66-67页 |
4.3.8 PPRV实时荧光定量RT-PCR的临床检测 | 第67页 |
4.4 结果与分析 | 第67-71页 |
4.4.1 小反刍兽疫疫苗株病毒基因组序列测定结果 | 第67页 |
4.4.2 筛选及优化PPRV实时荧光定量RT-PCR反应条件 | 第67-68页 |
4.4.3 PPRV实时荧光定量RT-PCR方法的特异性试验结果 | 第68-69页 |
4.4.4 PPRV实时荧光定量RT-PCR的灵敏度/检测低限(LOD)试验结果 | 第69-70页 |
4.4.5 PPRV实时荧光定量RT-PCR检测方法重复性试验 | 第70-71页 |
4.4.6 PPRV实时荧光定量RT-PCR方法的临床检测 | 第71页 |
4.5 讨论 | 第71-73页 |
第5章 结论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
附录 | 第84-94页 |
个人资料 | 第94页 |
教育经历 | 第94页 |
在读期间发表的主要文章 | 第94-95页 |