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小反刍兽疫新型快速实用检测方法的建立及评估

摘要第7-10页
Abstract第10-12页
缩略语表(Abbreviation)第13-16页
第1章 文献综述第16-30页
    1.1 小反刍兽疫概述第16页
    1.2 小反刍兽疫病原学特征第16-19页
        1.2.1 病毒的分类、形态与结构第16-17页
        1.2.2 病毒基因组的结构与功能第17-18页
        1.2.3 PPRV病毒的理化特性第18页
        1.2.4 培养特性第18-19页
        1.2.5 病毒的致病机理第19页
    1.3 小反刍兽疫的流行病学第19-21页
        1.3.1 分布和流行地域第19-20页
        1.3.2 贮存宿主和传播媒介第20页
        1.3.3 易感动物第20页
        1.3.4 流行特点第20-21页
        1.3.5 症状和病变第21页
    1.4 小反刍兽疫的免疫防控第21-23页
        1.4.1 RPV异源弱毒疫苗第22页
        1.4.2 PPRV同源弱毒疫苗第22页
        1.4.3 基因工程疫苗第22-23页
    1.5 小反刍兽疫的检测技术第23-30页
        1.5.1 病料采集第23-24页
        1.5.2 病原学检测第24-26页
        1.5.3 血清学检测第26-27页
        1.5.4 分子生物学检测第27-30页
第2章 小反刍兽疫血清抗体超敏荧光量子点免疫层析快速检测技术(QDs-LFIAS)的建立及评估第30-40页
    2.1 研究目的与意义第30页
    2.2 实验材料第30-31页
        2.2.1 细胞、毒株第30页
        2.2.2 血清第30-31页
            2.2.2.1 阳性血清第30-31页
            2.2.2.2 质控血清第31页
            2.2.2.3 田间样本第31页
        2.2.3 其它试剂与材料第31页
    2.3 实验方法第31-33页
        2.3.1 PPRV重组N蛋白抗原的制备第31页
        2.3.2 荧光量子点CdSe/ZnS PMAH-QDs与SPG标记偶联第31-32页
        2.3.3 量子点侧向流动免疫层析检测体系(QDs-LFIAS)的构建第32页
        2.3.4 QDs-LFIAS的检测步骤第32-33页
        2.3.5 QDs-LFIAS的分析学特异性、敏感性及最低检测限(LOD)评估第33页
        2.3.6 田间样本检测第33页
    2.4 结果与分析第33-38页
        2.4.1 PPRV N蛋白鉴定及划线浓度的选择第33-34页
        2.4.2 水溶性羧基功能化量子点与SPG的偶联第34-35页
        2.4.3 QDs-LFIAS的检测低限(LOD)第35-36页
        2.4.4 QDs-LFIAS分析敏感性、特异性第36-38页
        2.4.5 田间样品检测第38页
    2.5 讨论第38-40页
第3章 小反刍兽疫病毒双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测方法的建立及评估第40-61页
    3.1 研究目的与意义第40页
    3.2 实验材料第40-41页
        3.2.1 病毒和细胞株第40-41页
        3.2.2 血清第41页
        3.2.3 实验动物第41页
        3.2.4 主要生化试剂及试剂盒第41页
    3.3 实验方法第41-46页
        3.3.1 PPRV N蛋白单克隆抗体的制备第41-44页
        3.3.2 抗PPRV特异性IgY抗体的制备第44-45页
        3.3.3 PPRV双抗体夹心ELISA方法的建立第45-46页
    3.4 结果与分析第46-58页
        3.4.1 PPRV N蛋白单克隆抗体的制备第46-51页
        3.4.2 PPRV特异性IgY的制备第51-53页
        3.4.3 PPRV双抗体夹心ELISA方法的建立第53-58页
    3.5 讨论第58-61页
        3.5.1 双抗体夹心ELISA方法(DAS-ELISA)第58-59页
        3.5.2 单克隆抗体第59页
        3.5.3 鸡卵黄免疫球蛋白(egg yolk immunoglobulin,IgY)第59-61页
第4章 区分小反刍兽疫疫苗株与野毒株的实时荧光定量RT-PCR鉴别诊断方法的建立及评估第61-73页
    4.1 研究目的与意义第61页
    4.2 实验材料第61-64页
        4.2.1 病毒与细胞第61页
        4.2.2 病毒核酸、生化试剂及试剂盒第61-62页
        4.2.3 引物和探针第62-63页
        4.2.4 临床检测样本第63-64页
    4.3 实验方法第64-67页
        4.3.1 小反刍兽疫疫苗病毒株基因组序列的测定第64-65页
        4.3.2 小反刍兽疫疫苗株病毒滴度的测定第65页
        4.3.3 病毒核酸的提取第65页
        4.3.4 PPRV实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立和条件优化第65-66页
        4.3.5 PPRV实时荧光定量RT-PCR的特异性试验第66页
        4.3.6 PPRV实时荧光定量RT-PCR灵敏度/检测低限(LOD)试验第66页
        4.3.7 PPRV实时荧光定量RT-PCR的重复性试验第66-67页
        4.3.8 PPRV实时荧光定量RT-PCR的临床检测第67页
    4.4 结果与分析第67-71页
        4.4.1 小反刍兽疫疫苗株病毒基因组序列测定结果第67页
        4.4.2 筛选及优化PPRV实时荧光定量RT-PCR反应条件第67-68页
        4.4.3 PPRV实时荧光定量RT-PCR方法的特异性试验结果第68-69页
        4.4.4 PPRV实时荧光定量RT-PCR的灵敏度/检测低限(LOD)试验结果第69-70页
        4.4.5 PPRV实时荧光定量RT-PCR检测方法重复性试验第70-71页
        4.4.6 PPRV实时荧光定量RT-PCR方法的临床检测第71页
    4.5 讨论第71-73页
第5章 结论第73-74页
参考文献第74-83页
致谢第83-84页
附录第84-94页
个人资料第94页
教育经历第94页
在读期间发表的主要文章第94-95页

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