摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
前言 | 第12-13页 |
材料和方法 | 第13-28页 |
1. 实验材料 | 第13-16页 |
1.1 细胞培养材料及来源 | 第13页 |
1.2 主要试剂及来源 | 第13-14页 |
1.3 主要器材及来源 | 第14-15页 |
1.4 主要试剂配制 | 第15-16页 |
2. 实验方法 | 第16-28页 |
2.1 NCI-H460细胞培养 | 第16页 |
2.2 UCH-L3真核表达质粒的构建 | 第16-24页 |
2.3 重组质粒pcDNA3.1(+)-UCH-L3-EGFP转染NCI-H460细胞 | 第24-25页 |
2.4 实时荧光定量PCR检测UCH-L3 mRNA的表达 | 第25-26页 |
2.5 western blot检测上调UCH-L3基因表达对雷帕霉素诱导的细胞自噬的影响 | 第26-28页 |
2.6 统计学分析 | 第28页 |
结果 | 第28-33页 |
1. UCH-L3真核表达质粒的构建 | 第28-31页 |
1.1 UCH-L3基因的获取 | 第28-29页 |
1.2 重组质粒(TA克隆产物)的鉴定 | 第29-30页 |
1.3 重组质粒(pcDNA3.1(+)-UCH-L3-EGFP)的鉴定 | 第30-31页 |
2. 重组质粒pcDNA3.1(+)-UCH-L3-EGFP转染NCI-H460细胞 | 第31-32页 |
3. 实时荧光定量PCR方法检测UCH-L3 mRNA的表达 | 第32页 |
4. western blot检测上调UCH-L3基因表达对雷帕霉素诱导的细胞自噬的影响 | 第32-33页 |
讨论 | 第33-37页 |
结论 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-41页 |
综述 | 第41-51页 |
参考文献 | 第46-51页 |
致谢 | 第51页 |