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UCH-L3基因真核表达质粒的构建及其在雷帕霉素诱导的NCI-H460细胞自噬中的作用的研究

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
前言第12-13页
材料和方法第13-28页
    1. 实验材料第13-16页
        1.1 细胞培养材料及来源第13页
        1.2 主要试剂及来源第13-14页
        1.3 主要器材及来源第14-15页
        1.4 主要试剂配制第15-16页
    2. 实验方法第16-28页
        2.1 NCI-H460细胞培养第16页
        2.2 UCH-L3真核表达质粒的构建第16-24页
        2.3 重组质粒pcDNA3.1(+)-UCH-L3-EGFP转染NCI-H460细胞第24-25页
        2.4 实时荧光定量PCR检测UCH-L3 mRNA的表达第25-26页
        2.5 western blot检测上调UCH-L3基因表达对雷帕霉素诱导的细胞自噬的影响第26-28页
        2.6 统计学分析第28页
结果第28-33页
    1. UCH-L3真核表达质粒的构建第28-31页
        1.1 UCH-L3基因的获取第28-29页
        1.2 重组质粒(TA克隆产物)的鉴定第29-30页
        1.3 重组质粒(pcDNA3.1(+)-UCH-L3-EGFP)的鉴定第30-31页
    2. 重组质粒pcDNA3.1(+)-UCH-L3-EGFP转染NCI-H460细胞第31-32页
    3. 实时荧光定量PCR方法检测UCH-L3 mRNA的表达第32页
    4. western blot检测上调UCH-L3基因表达对雷帕霉素诱导的细胞自噬的影响第32-33页
讨论第33-37页
结论第37-38页
参考文献第38-41页
综述第41-51页
    参考文献第46-51页
致谢第51页

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