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内耳前体细胞增殖中的信号通路调控机制

缩略语简表第7-9页
中文摘要第9-13页
ABSTRACT第13-17页
参考文献第18-20页
第一部分 pRb在新生鸡椭圆囊前体细胞增殖中的作用第20-58页
    引言第20-24页
    第一节 抑制pRb的磷酸化降低了损伤后的新生鸡椭圆囊支持细胞的增殖第24-40页
        1.1 材料和方法第24-30页
            1.1.1 实验动物第24页
            1.1.2 主要仪器设备和试剂第24-26页
            1.1.3 实验方法第26-30页
                1.1.3.1 新生鸡椭圆囊的分离与培养第26页
                1.1.3.2 新生鸡椭圆囊感觉细胞的损伤模型第26-27页
                1.1.3.3 免疫组织化学染色第27-28页
                1.1.3.4 抑制pRb磷酸化对损伤后的椭圆囊支持细胞增殖的影响第28页
                1.1.3.5 免疫组织化学染色第28-29页
                1.1.3.6 免疫荧光染色结果的观察、图像的采集和细胞计数第29-30页
            1.1.4 统计方法第30页
        1.2 结果第30-38页
            1.2.1 新生鸡内耳正常结构第30-34页
            1.2.2 庆大霉素对新生鸡椭圆囊感觉细胞的损伤第34页
            1.2.3 U0126、RRD-251抑制pRb磷酸化后,使庆大霉素损伤后的新生鸡椭圆囊的支持细胞增殖减少第34-38页
        1.3 讨论第38-40页
    第二节 MEK/ERK和Rb/Raf-1信号通路均参与调控损伤后的新生鸡椭圆囊支持细胞的增殖中pRb的磷酸化过程第40-56页
        2.1 材料和方法第40-48页
            2.1.1 实验动物第40页
            2.1.2 主要仪器设备第40-41页
            2.1.3 主要试剂第41页
            2.1.4 实验方法第41-48页
                2.1.4.1 新生鸡椭圆囊的分离与培养第41-42页
                2.1.4.2 RNA的提取第42-43页
                2.1.4.3 cDNA的合成第43-44页
                2.1.4.4 realtime PCR第44-45页
                2.1.4.5 总蛋白的提取第45-46页
                2.1.4.6 Western-blot第46-48页
            2.1.5 统计方法第48页
        2.2 结果第48-54页
            2.2.1 阻断MEK/ERK通路或/和Raf-1/Rb通路后,降低了在损伤后的新生鸡椭圆囊上的调控pRb的相关基因和细胞周期相关基因表达第48-49页
            2.2.2 阻断MEK/ERK通路或Raf-1/Rb通路后,损伤后的新生鸡椭圆囊上皮中pRb和磷酸化的pRb蛋白、b-raf、c-raf、磷酸化p44/42 ERK蛋白和p44/42 ERK蛋白表达下降第49-54页
        2.3 讨论第54-56页
    参考文献第56-58页
第二部分 Notch信号通路和Wnt信号通路在小鼠内耳前体细胞增殖中的作用第58-102页
    引言第58-61页
    第一节 Notch信号通路和Wnt信号通路在新生小鼠正常内耳前体细胞增殖中的作用第61-80页
        1.1 材料和方法第61-66页
            1.1.1 实验动物第61页
            1.1.2 主要仪器设备和试剂第61-63页
            1.1.3 实验方法第63-66页
                1.1.3.1 新生小鼠内耳基底膜的分离与培养第63-64页
                1.1.3.2 免疫组织化学染色第64-65页
                1.1.3.3 毛细胞标记FM1-43FX第65-66页
            1.1.4 统计方法第66页
        1.2 结果第66-80页
            1.2.1 Notch信号抑制剂可以有效的抑制Notch通路第66-69页
            1.2.2 DBZ抑制Notch信号通路,可促使新生小鼠内耳感觉前体细胞发生增殖第69-72页
            1.2.3 阻断Notch信号通路后增殖产生的新生毛细胞具有纤毛结构第72-73页
            1.2.4 小剂量DAPT抑制Notch信号通路,也同样可以促使新生小鼠内耳感觉前体细胞发生增殖第73-75页
            1.2.5 DAPT抑制Notch信号通路的同时,QS11激活Wnt信号通路,促使新生鼠内耳毛细胞的增殖性再生更为明显第75-77页
            1.2.6 同时阻断Notch信号通路并激活Wnt信号通路增殖的新生毛细胞是功能性毛细胞第77页
            1.2.7 抑制Notch、激活Wnt信号通路,促使小鼠内耳前体细胞的增殖有着年龄限制性第77-80页
    第二节 Notch信号通路和Wnt信号通路在新生小鼠损伤后的内耳前体细胞增殖和再生中的作用第80-87页
        2.1 材料和方法第80-84页
            2.1.1 实验动物第80页
            2.1.2 主要仪器设备和试剂第80-82页
            2.1.3 实验方法第82-84页
                2.1.3.1 新生小鼠内耳基底膜的分离与培养第82-83页
                2.1.3.2 免疫组织化学染色第83-84页
            2.1.4 统计方法第84页
        2.2 结果第84-87页
            2.2.1 在损伤后的新生鼠基底膜上,抑制Notch、激活Wnt信号通路,仍可促使毛细胞发生增殖并再生出新生的毛细胞第84-87页
    第三节 抑制Notch信号通路、激活Wnt信号通路促进新生小鼠正常内耳前体细胞增殖中的相关机制分析第87-100页
        3.1 材料和方法第87-95页
            3.1.1 实验动物第87页
            3.1.2 主要仪器设备和试剂第87-88页
            3.1.3 实验方法第88-94页
                3.1.3.1 新生小鼠内耳基底膜的分离与培养第88-89页
                3.1.3.2 RNA的提取第89-90页
                3.1.3.3 cDNA的合成第90-91页
                3.1.3.4 realtime PCR第91-92页
                3.1.3.5 总蛋白的提取第92页
                3.1.3.6 Western-blot第92-94页
            3.1.4 统计方法第94-95页
        3.2 结果第95-97页
            3.2.1 抑制Notch、激活Wnt信号通路后,信号通路和前体细胞相关基因表达的变化情况第95-96页
            3.2.2 抑制Notch信号通路,或者抑制Notch同时激活Wnt信号通路后,新生小鼠耳蜗感觉上皮的蛋白β-catenin的表达均升高第96-97页
        3.3 讨论第97-100页
    参考文献第100-102页
综述第102-112页
    参考文献第108-112页
致谢第112-113页

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