| 缩略语简表 | 第7-9页 |
| 中文摘要 | 第9-13页 |
| ABSTRACT | 第13-17页 |
| 参考文献 | 第18-20页 |
| 第一部分 pRb在新生鸡椭圆囊前体细胞增殖中的作用 | 第20-58页 |
| 引言 | 第20-24页 |
| 第一节 抑制pRb的磷酸化降低了损伤后的新生鸡椭圆囊支持细胞的增殖 | 第24-40页 |
| 1.1 材料和方法 | 第24-30页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第24页 |
| 1.1.2 主要仪器设备和试剂 | 第24-26页 |
| 1.1.3 实验方法 | 第26-30页 |
| 1.1.3.1 新生鸡椭圆囊的分离与培养 | 第26页 |
| 1.1.3.2 新生鸡椭圆囊感觉细胞的损伤模型 | 第26-27页 |
| 1.1.3.3 免疫组织化学染色 | 第27-28页 |
| 1.1.3.4 抑制pRb磷酸化对损伤后的椭圆囊支持细胞增殖的影响 | 第28页 |
| 1.1.3.5 免疫组织化学染色 | 第28-29页 |
| 1.1.3.6 免疫荧光染色结果的观察、图像的采集和细胞计数 | 第29-30页 |
| 1.1.4 统计方法 | 第30页 |
| 1.2 结果 | 第30-38页 |
| 1.2.1 新生鸡内耳正常结构 | 第30-34页 |
| 1.2.2 庆大霉素对新生鸡椭圆囊感觉细胞的损伤 | 第34页 |
| 1.2.3 U0126、RRD-251抑制pRb磷酸化后,使庆大霉素损伤后的新生鸡椭圆囊的支持细胞增殖减少 | 第34-38页 |
| 1.3 讨论 | 第38-40页 |
| 第二节 MEK/ERK和Rb/Raf-1信号通路均参与调控损伤后的新生鸡椭圆囊支持细胞的增殖中pRb的磷酸化过程 | 第40-56页 |
| 2.1 材料和方法 | 第40-48页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第40页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第40-41页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第41页 |
| 2.1.4 实验方法 | 第41-48页 |
| 2.1.4.1 新生鸡椭圆囊的分离与培养 | 第41-42页 |
| 2.1.4.2 RNA的提取 | 第42-43页 |
| 2.1.4.3 cDNA的合成 | 第43-44页 |
| 2.1.4.4 realtime PCR | 第44-45页 |
| 2.1.4.5 总蛋白的提取 | 第45-46页 |
| 2.1.4.6 Western-blot | 第46-48页 |
| 2.1.5 统计方法 | 第48页 |
| 2.2 结果 | 第48-54页 |
| 2.2.1 阻断MEK/ERK通路或/和Raf-1/Rb通路后,降低了在损伤后的新生鸡椭圆囊上的调控pRb的相关基因和细胞周期相关基因表达 | 第48-49页 |
| 2.2.2 阻断MEK/ERK通路或Raf-1/Rb通路后,损伤后的新生鸡椭圆囊上皮中pRb和磷酸化的pRb蛋白、b-raf、c-raf、磷酸化p44/42 ERK蛋白和p44/42 ERK蛋白表达下降 | 第49-54页 |
| 2.3 讨论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-58页 |
| 第二部分 Notch信号通路和Wnt信号通路在小鼠内耳前体细胞增殖中的作用 | 第58-102页 |
| 引言 | 第58-61页 |
| 第一节 Notch信号通路和Wnt信号通路在新生小鼠正常内耳前体细胞增殖中的作用 | 第61-80页 |
| 1.1 材料和方法 | 第61-66页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第61页 |
| 1.1.2 主要仪器设备和试剂 | 第61-63页 |
| 1.1.3 实验方法 | 第63-66页 |
| 1.1.3.1 新生小鼠内耳基底膜的分离与培养 | 第63-64页 |
| 1.1.3.2 免疫组织化学染色 | 第64-65页 |
| 1.1.3.3 毛细胞标记FM1-43FX | 第65-66页 |
| 1.1.4 统计方法 | 第66页 |
| 1.2 结果 | 第66-80页 |
| 1.2.1 Notch信号抑制剂可以有效的抑制Notch通路 | 第66-69页 |
| 1.2.2 DBZ抑制Notch信号通路,可促使新生小鼠内耳感觉前体细胞发生增殖 | 第69-72页 |
| 1.2.3 阻断Notch信号通路后增殖产生的新生毛细胞具有纤毛结构 | 第72-73页 |
| 1.2.4 小剂量DAPT抑制Notch信号通路,也同样可以促使新生小鼠内耳感觉前体细胞发生增殖 | 第73-75页 |
| 1.2.5 DAPT抑制Notch信号通路的同时,QS11激活Wnt信号通路,促使新生鼠内耳毛细胞的增殖性再生更为明显 | 第75-77页 |
| 1.2.6 同时阻断Notch信号通路并激活Wnt信号通路增殖的新生毛细胞是功能性毛细胞 | 第77页 |
| 1.2.7 抑制Notch、激活Wnt信号通路,促使小鼠内耳前体细胞的增殖有着年龄限制性 | 第77-80页 |
| 第二节 Notch信号通路和Wnt信号通路在新生小鼠损伤后的内耳前体细胞增殖和再生中的作用 | 第80-87页 |
| 2.1 材料和方法 | 第80-84页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第80页 |
| 2.1.2 主要仪器设备和试剂 | 第80-82页 |
| 2.1.3 实验方法 | 第82-84页 |
| 2.1.3.1 新生小鼠内耳基底膜的分离与培养 | 第82-83页 |
| 2.1.3.2 免疫组织化学染色 | 第83-84页 |
| 2.1.4 统计方法 | 第84页 |
| 2.2 结果 | 第84-87页 |
| 2.2.1 在损伤后的新生鼠基底膜上,抑制Notch、激活Wnt信号通路,仍可促使毛细胞发生增殖并再生出新生的毛细胞 | 第84-87页 |
| 第三节 抑制Notch信号通路、激活Wnt信号通路促进新生小鼠正常内耳前体细胞增殖中的相关机制分析 | 第87-100页 |
| 3.1 材料和方法 | 第87-95页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第87页 |
| 3.1.2 主要仪器设备和试剂 | 第87-88页 |
| 3.1.3 实验方法 | 第88-94页 |
| 3.1.3.1 新生小鼠内耳基底膜的分离与培养 | 第88-89页 |
| 3.1.3.2 RNA的提取 | 第89-90页 |
| 3.1.3.3 cDNA的合成 | 第90-91页 |
| 3.1.3.4 realtime PCR | 第91-92页 |
| 3.1.3.5 总蛋白的提取 | 第92页 |
| 3.1.3.6 Western-blot | 第92-94页 |
| 3.1.4 统计方法 | 第94-95页 |
| 3.2 结果 | 第95-97页 |
| 3.2.1 抑制Notch、激活Wnt信号通路后,信号通路和前体细胞相关基因表达的变化情况 | 第95-96页 |
| 3.2.2 抑制Notch信号通路,或者抑制Notch同时激活Wnt信号通路后,新生小鼠耳蜗感觉上皮的蛋白β-catenin的表达均升高 | 第96-97页 |
| 3.3 讨论 | 第97-100页 |
| 参考文献 | 第100-102页 |
| 综述 | 第102-112页 |
| 参考文献 | 第108-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
