第一部分 胰岛素通过增加 GPER(G protein-coupled estrogen receptor)表达促进子宫内膜癌细胞增殖 | 第8-33页 |
摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
1. 引言 | 第11-12页 |
2. 材料与方法 | 第12-26页 |
2.1 材料 | 第12-17页 |
2.1.1 主要试剂、耗材及仪器 | 第12-17页 |
2.1.2 细胞系 | 第17页 |
2.2 方法 | 第17-26页 |
2.2.1 细胞培养 | 第17页 |
2.2.2 转染 | 第17-18页 |
2.2.3 Western Blotting | 第18-21页 |
2.2.4 SRB | 第21-22页 |
2.2.5 免疫荧光共聚焦试验 | 第22-23页 |
2.2.6 实时荧光定量PCR技术 | 第23-26页 |
3. 结果 | 第26-32页 |
3.1 胰岛素通过调控AKT/PI3K通路磷酸化水平促进子宫内膜癌细胞增殖 | 第26-28页 |
3.2 胰岛素增加子宫内膜癌细胞对雌激素的敏感性 | 第28-30页 |
3.3 胰岛素在子宫内膜癌细胞系中上调GPER的表达 | 第30-31页 |
3.4 GPER参与胰岛素促进子宫内膜癌细胞增殖过程 | 第31-32页 |
4. 讨论 | 第32-33页 |
第二部分 胰岛素通过增加 TET1(Ten Eleven translocation 1)表达促进子宫内膜癌细胞增殖 | 第33-47页 |
摘要 | 第33-34页 |
Abstract | 第34-35页 |
1. 引言 | 第35-36页 |
2. 材料与方法 | 第36-43页 |
2.1 材料 | 第36-40页 |
2.1.1 主要试剂、耗材及仪器 | 第36-40页 |
2.1.2 细胞系 | 第40页 |
2.2 方法 | 第40-43页 |
2.2.1 细胞培养 | 第40页 |
2.2.2 提取基因组DNA | 第40-41页 |
2.2.3 点杂交 | 第41页 |
2.2.4 目的质粒扩增及提取 | 第41-43页 |
3. 结果 | 第43-46页 |
3.1 胰岛素上调子宫内膜癌细胞中TET1的表达和 5 | 第44-45页 |
3.2 TET1参与胰岛素促进子宫内膜癌细胞增殖过程 | 第45-46页 |
4. 讨论 | 第46-47页 |
第三部分 TET1 在子宫内膜病变中的表达及其对子宫内膜癌细胞增殖和迁移能力的影响 | 第47-64页 |
摘要 | 第47-48页 |
Abstract | 第48-49页 |
1. 引言 | 第49-50页 |
2. 材料与方法 | 第50-57页 |
2.1 材料 | 第50-54页 |
2.1.1 主要试剂、耗材及仪器 | 第50-53页 |
2.1.2 细胞系 | 第53页 |
2.1.3 标本收集 | 第53-54页 |
2.2 方法 | 第54-57页 |
2.2.1 细胞培养 | 第54页 |
2.2.2 划痕试验 | 第54页 |
2.2.3 Transwell试验 | 第54页 |
2.2.4 免疫组化 | 第54-56页 |
2.2.5 细胞周期检测 | 第56页 |
2.2.6 统计学分析 | 第56-57页 |
3. 结果 | 第57-61页 |
3.1 子宫内膜增生性病变和子宫内膜癌中TET1的表达随病变进展而升高 | 第57-58页 |
3.2 干扰TET1表达后子宫内膜癌细胞的增殖能力下降 | 第58-59页 |
3.3 干扰TET1表达后子宫内膜癌细胞的迁移能力下降 | 第59-60页 |
3.4 干扰TET1表达后子宫内膜癌细胞的侵袭能力下降 | 第60页 |
3.5 干扰TET1表达后子宫内膜癌细胞的细胞周期变化 | 第60-61页 |
4. 讨论 | 第61-64页 |
第四部分 胰岛素通过上调 TET1 促进 GPER 启动子区域羟甲基化增加GPER 表达 | 第64-79页 |
摘要 | 第64-65页 |
Abstract | 第65-66页 |
1. 引言 | 第66页 |
2. 材料与方法 | 第66-75页 |
2.1 材料 | 第66-71页 |
2.1.1 主要试剂、耗材及仪器 | 第66-71页 |
2.1.2 细胞系 | 第71页 |
2.2 方法 | 第71-75页 |
2.2.1 细胞培养 | 第71页 |
2.2.2 Hme Dip | 第71-73页 |
2.2.3 荧光素酶报告基因 | 第73-74页 |
2.2.4 组织芯片TMA的制备 | 第74-75页 |
3 结果 | 第75-78页 |
3.1 在不同病理类型的子宫内膜组织中GPER和TET1呈正相关性表达 | 第75-77页 |
3.2 TET1与GPER的关系及两者对子宫内膜癌细胞增殖的影响 | 第77-78页 |
4 讨论 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
攻读硕士学位期间已发表或录用的论文 | 第84页 |