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GPER基因羟甲基化调控在胰岛素诱导子宫内膜异常增生中的作用及机制

第一部分 胰岛素通过增加 GPER(G protein-coupled estrogen receptor)表达促进子宫内膜癌细胞增殖第8-33页
    摘要第8-9页
    Abstract第9-11页
    1. 引言第11-12页
    2. 材料与方法第12-26页
        2.1 材料第12-17页
            2.1.1 主要试剂、耗材及仪器第12-17页
            2.1.2 细胞系第17页
        2.2 方法第17-26页
            2.2.1 细胞培养第17页
            2.2.2 转染第17-18页
            2.2.3 Western Blotting第18-21页
            2.2.4 SRB第21-22页
            2.2.5 免疫荧光共聚焦试验第22-23页
            2.2.6 实时荧光定量PCR技术第23-26页
    3. 结果第26-32页
        3.1 胰岛素通过调控AKT/PI3K通路磷酸化水平促进子宫内膜癌细胞增殖第26-28页
        3.2 胰岛素增加子宫内膜癌细胞对雌激素的敏感性第28-30页
        3.3 胰岛素在子宫内膜癌细胞系中上调GPER的表达第30-31页
        3.4 GPER参与胰岛素促进子宫内膜癌细胞增殖过程第31-32页
    4. 讨论第32-33页
第二部分 胰岛素通过增加 TET1(Ten Eleven translocation 1)表达促进子宫内膜癌细胞增殖第33-47页
    摘要第33-34页
    Abstract第34-35页
    1. 引言第35-36页
    2. 材料与方法第36-43页
        2.1 材料第36-40页
            2.1.1 主要试剂、耗材及仪器第36-40页
            2.1.2 细胞系第40页
        2.2 方法第40-43页
            2.2.1 细胞培养第40页
            2.2.2 提取基因组DNA第40-41页
            2.2.3 点杂交第41页
            2.2.4 目的质粒扩增及提取第41-43页
    3. 结果第43-46页
        3.1 胰岛素上调子宫内膜癌细胞中TET1的表达和 5第44-45页
        3.2 TET1参与胰岛素促进子宫内膜癌细胞增殖过程第45-46页
    4. 讨论第46-47页
第三部分 TET1 在子宫内膜病变中的表达及其对子宫内膜癌细胞增殖和迁移能力的影响第47-64页
    摘要第47-48页
    Abstract第48-49页
    1. 引言第49-50页
    2. 材料与方法第50-57页
        2.1 材料第50-54页
            2.1.1 主要试剂、耗材及仪器第50-53页
            2.1.2 细胞系第53页
            2.1.3 标本收集第53-54页
        2.2 方法第54-57页
            2.2.1 细胞培养第54页
            2.2.2 划痕试验第54页
            2.2.3 Transwell试验第54页
            2.2.4 免疫组化第54-56页
            2.2.5 细胞周期检测第56页
            2.2.6 统计学分析第56-57页
    3. 结果第57-61页
        3.1 子宫内膜增生性病变和子宫内膜癌中TET1的表达随病变进展而升高第57-58页
        3.2 干扰TET1表达后子宫内膜癌细胞的增殖能力下降第58-59页
        3.3 干扰TET1表达后子宫内膜癌细胞的迁移能力下降第59-60页
        3.4 干扰TET1表达后子宫内膜癌细胞的侵袭能力下降第60页
        3.5 干扰TET1表达后子宫内膜癌细胞的细胞周期变化第60-61页
    4. 讨论第61-64页
第四部分 胰岛素通过上调 TET1 促进 GPER 启动子区域羟甲基化增加GPER 表达第64-79页
    摘要第64-65页
    Abstract第65-66页
    1. 引言第66页
    2. 材料与方法第66-75页
        2.1 材料第66-71页
            2.1.1 主要试剂、耗材及仪器第66-71页
            2.1.2 细胞系第71页
        2.2 方法第71-75页
            2.2.1 细胞培养第71页
            2.2.2 Hme Dip第71-73页
            2.2.3 荧光素酶报告基因第73-74页
            2.2.4 组织芯片TMA的制备第74-75页
    3 结果第75-78页
        3.1 在不同病理类型的子宫内膜组织中GPER和TET1呈正相关性表达第75-77页
        3.2 TET1与GPER的关系及两者对子宫内膜癌细胞增殖的影响第77-78页
    4 讨论第78-79页
参考文献第79-83页
致谢第83-84页
攻读硕士学位期间已发表或录用的论文第84页

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