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玉米BRI1基因的功能分析及其响应ABA调控的蛋白组学研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
缩略词中英文对照表第6-11页
第一章 绪论第11-24页
    1.1 油菜素内酯的作用第11-19页
        1.1.1 油菜素内酯和营养生长第11-15页
        1.1.2 油菜素内酯和生殖生长第15-17页
        1.1.3 油菜素内酯和逆境胁迫第17-18页
        1.1.4 外源油菜素内酯和油菜素内酯抑制剂在农业上的使用第18-19页
    1.2 油菜素内酯的合成与代谢第19-21页
    1.3 油菜素内酯的信号传导第21-22页
    1.4 iTRAQ技术的原理和应用第22-23页
    1.5 本研究的目的和意义第23-24页
第二章 BR抑制剂丙环唑对玉米幼苗生长发育的调控第24-34页
    2.1 试验材料第24页
        2.1.1 植物材料和试验试剂第24页
        2.1.2 仪器与设备第24页
    2.2 试验方法第24-27页
        2.2.1 材料的培养第24-25页
        2.2.2 玉米RNA的提取第25-26页
        2.2.3 荧光定量PCR测定基因表达第26-27页
        2.2.4 石蜡切片第27页
        2.2.5 玉米样品中内源激素含量的测定第27页
    2.3 结果与分析第27-32页
        2.3.1 Pcz对玉米幼苗植株生长的调控第27-28页
        2.3.2 Pcz对玉米幼苗GA和BR的含量及相关基因表达的影响第28-30页
        2.3.3 Pcz对玉米叶片不同部位细胞显微结构的影响第30-31页
        2.3.4 Pcz对叶鞘扩展蛋白与木葡聚糖内糖基转移酶基因表达的调控第31-32页
    2.4 小结第32页
    2.5 讨论第32-34页
第三章 ZmBRI1基因的克隆与功能分析第34-67页
    3.1 试验材料第34-36页
        3.1.1 植物材料及培养第34页
        3.1.2 菌株和质粒载体第34页
        3.1.3 试验常用试剂第34-35页
        3.1.4 培养基及溶液的配置第35-36页
        3.1.5 仪器与设备第36页
    3.2 试验方法第36-45页
        3.2.1 材料的培养和处理第36-37页
        3.2.2 植物DNA和RNA的提取第37页
        3.2.3 RNA质量的检测和反转录第37-38页
        3.2.4 同源克隆玉米ZmBRI1基因第38-41页
        3.2.5 ZmBRI1的同源比对分析以及生物进化树的构建第41页
        3.2.6 拟南芥超表达载体P1300-35S:ZmBRI1-GFP的构建第41-43页
        3.2.7 PCR产物的回收与纯化第43页
        3.2.8 质粒DNA的提取及鉴定(TIANGEN)第43-44页
        3.2.9 农杆菌浸花法转化拟南芥第44页
        3.2.10 荧光定量PCR测定基因表达第44-45页
    3.3 结果与分析第45-64页
        3.3.1 玉米ZmBRI1基因的克隆第45-47页
        3.3.2 玉米ZmBRI1的氨基酸序列和结构分析第47-50页
        3.3.3 ZmBRI1蛋白的亚细胞定位分析第50页
        3.3.4 ZmBRI1基因在玉米各组织中的表达及其对BR的响应第50-51页
        3.3.5 ZmBRI1转基因拟南芥的获得第51-53页
        3.3.6 ZmBRI1基因的表达修复了突变体bri1-5的表型第53-56页
        3.3.7 ZmBRI1基因的表达修复了BR的信号通路第56-60页
        3.3.8 ZmBRI1基因的表达降低了拟南芥对ABA的敏感性第60-64页
    3.4 小结第64-65页
    3.5 讨论第65-67页
第四章 ZmBRI1基因响应ABA诱导的蛋白组学研究第67-93页
    4.1 试验材料第67-68页
        4.1.1 植物材料第67页
        4.1.2 主要溶液的配置第67页
        4.1.3 仪器与设备第67-68页
    4.2 试验方法第68-74页
        4.2.1 材料的培养第68页
        4.2.2 拟南芥蛋白的提取和定量第68-69页
        4.2.3 蛋白的酶解(膜上酶解)第69页
        4.2.4 iTRAQ试剂标记样品第69-70页
        4.2.5 强阳离子交换色谱(SCX)第70-71页
        4.2.6 脱盐(Ziptip C18柱子)第71页
        4.2.7 LC-MS/MS分离检测第71-72页
        4.2.8 荧光定量PCR测定基因表达第72-73页
        4.2.9 试验设计和蛋白组学工作流程第73-74页
    4.3 结果与分析第74-90页
        4.3.1 定量蛋白组学的质量分析第74-75页
        4.3.2 蛋白功能分类(GO分析)第75-76页
        4.3.3 ZmBRI1响应ABA差异蛋白的鉴定和GO富集分析第76-82页
        4.3.4 ZmBRI1响应ABA差异蛋白的功能分析和株系间的比较第82-86页
        4.3.5 ZmBRI1响应ABA差异蛋白的互作网络分析第86-89页
        4.3.6 ZmBRI1响应ABA差异蛋白的qRT-PCR基因表达验证第89-90页
    4.4 小结第90-91页
    4.5 讨论第91-93页
第五章 结论第93-95页
    5.1 丙环唑对玉米幼苗生长发育的调控第93页
    5.2 ZmBRI1基因的克隆与功能分析第93页
    5.3 ZmBRI1基因响应ABA诱导的蛋白组学研究第93-95页
参考文献第95-108页
致谢第108-109页
附录第109-119页
个人简介第119页

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