摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 丙戊酸对人外周血淋巴细胞的影响 | 第11-31页 |
一.引言 | 第11-15页 |
1 表观遗传学 | 第11-12页 |
2 VPA药理作用 | 第12-14页 |
·抗肿瘤作用 | 第12-13页 |
·免疫调节活性 | 第13-14页 |
3 本课题的研究目的和意义 | 第14-15页 |
二.实验材料与设备 | 第15-17页 |
1 实验材料 | 第15页 |
2 主要仪器和设备 | 第15页 |
3 主要试剂 | 第15-16页 |
4 本实验中所用主要试剂配制方法见附录Ⅰ | 第16-17页 |
三.实验方法与步骤 | 第17-19页 |
1 全血培养 | 第17页 |
2 外周血T淋巴细胞体外活化 | 第17页 |
3 DiOC_6(3)染色检测线粒体膜电势 | 第17页 |
4 细胞内因子染色 | 第17-18页 |
5 流式细胞仪分析 | 第18页 |
6 统计学分析 | 第18-19页 |
四.实验结果 | 第19-23页 |
1 VPA可促进人外周血T细胞CD69的表达 | 第19页 |
2 VPA对线粒体膜电势的影响 | 第19-20页 |
3 VPA对细胞因子表达的影响 | 第20-23页 |
五.讨论 | 第23-26页 |
六.结论 | 第26-27页 |
REFERENCES(参考文献) | 第27-31页 |
第二章 人白细胞介素7原核表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达鉴定 | 第31-54页 |
一.引言 | 第31-36页 |
1 IL-7的研究进展 | 第31-34页 |
2 包涵体复性 | 第34-35页 |
3 本课题的研究目的和意义 | 第35-36页 |
二.实验材料与设备 | 第36-38页 |
1 主要仪器和设备 | 第36页 |
2 主要试剂和材料 | 第36-37页 |
3 本实验中所用主要试剂配制方法见附录Ⅰ | 第37-38页 |
三.实验方法与步骤 | 第38-41页 |
1 人类IL-7基因原核表达载体的构建和序列分析 | 第38-39页 |
·人类IL-7基因扩增的引物设计 | 第38页 |
·PCR扩增人类IL-7 cDNA | 第38-39页 |
2 人类IL-7原核表达载体在E coli中的表达 | 第39-41页 |
·rhIL-7蛋白的诱导表达 | 第39页 |
·诱导剂浓度的选择 | 第39页 |
·诱导时间的选择 | 第39页 |
·样品处理与SDS-PAGE电泳 | 第39页 |
·免疫印迹分析 | 第39-41页 |
四.实验结果 | 第41-47页 |
1 人IL-7 cDNA编码区片段的克隆和原核表达载体构建 | 第41-44页 |
2 IL-7重组蛋白在E.coli的表达与条件优化 | 第44-47页 |
·pET-3d/IL-7原核表达载体在E.coli中的表达与鉴定 | 第44-45页 |
·IPTG对Il-7重组蛋白表达的影响 | 第45-46页 |
·诱导时间对IL-7重组蛋白表达的影响 | 第46-47页 |
五.讨论 | 第47-49页 |
六.结论 | 第49-50页 |
REFERENCES(参考文献) | 第50-54页 |
附录Ⅰ 本实验中所用主要试剂配制方法 | 第54-56页 |
附录Ⅱ 英文缩略词 | 第56-57页 |
附录Ⅲ 在校期间发表及参与研究论文情况 | 第57-58页 |
致谢 | 第58页 |