| 中文摘要 | 第10-11页 |
| 英文摘要 | 第11页 |
| 1 前言 | 第12-19页 |
| 1.1 SuSy和SAI在植物地下变态器官的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2 SuSy基因功能的研究 | 第13-15页 |
| 1.2.1 调控库器官中蔗糖-淀粉代谢 | 第14页 |
| 1.2.2 参与纤维素合成 | 第14-15页 |
| 1.2.3 提高植物抗逆性 | 第15页 |
| 1.3 SAI基因功能的研究 | 第15-17页 |
| 1.3.1 调控淀粉-蔗糖代谢 | 第16-17页 |
| 1.3.2 参与信号传导 | 第17页 |
| 1.4 异源高效表达可溶性蛋白的研究 | 第17-18页 |
| 1.4.1 表达载体的选择 | 第17页 |
| 1.4.2 不同诱导条件的影响 | 第17-18页 |
| 1.5 本文研究的目的与意义 | 第18-19页 |
| 2 SuSy1和SuSy2基因cDNA全长克隆与分析 | 第19-31页 |
| 2.1 试验材料 | 第19页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第19页 |
| 2.2 试验方法 | 第19-24页 |
| 2.2.1 总RNA的提取 | 第19页 |
| 2.2.2 cDNA第一链的合成 | 第19-20页 |
| 2.2.3 引物设计 | 第20页 |
| 2.2.4 片段的特异性扩增 | 第20-21页 |
| 2.2.5 PCR扩增目的片段的回收 | 第21页 |
| 2.2.6 目的片段与T载体连接、转化及鉴定 | 第21-22页 |
| 2.2.7 3'RACE | 第22-23页 |
| 2.2.8 SuSy1和SuSy2基因全长序列的验证 | 第23页 |
| 2.2.9 SuSy1和SuSy2基因的生物信息学分析 | 第23-24页 |
| 2.3 结果与分析 | 第24-29页 |
| 2.3.1 总RNA的提取与检测 | 第24页 |
| 2.3.2 SuSy1和SuSy2基因cDNA 3'RACE的克隆 | 第24-25页 |
| 2.3.3 SuSy1和SuSy2基因cDNA全长的获得 | 第25页 |
| 2.3.4 SuSy1和SuSy2基因cDNA序列分析 | 第25-28页 |
| 2.3.5 SuSy1和SuSy2氨基酸序列分析 | 第28-29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-31页 |
| 3. SuSy基因转化兰州百合的研究 | 第31-42页 |
| 3.1 材料 | 第31-32页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第31页 |
| 3.1.2 菌株及主要试剂 | 第31-32页 |
| 3.2 试验方法 | 第32-34页 |
| 3.2.1 Hyg浓度筛选 | 第32页 |
| 3.2.2 Cef抑菌浓度的确定 | 第32页 |
| 3.2.3 农杆菌感受态的转化 | 第32页 |
| 3.2.4 目的基因的鉴定 | 第32-33页 |
| 3.2.5 农杆菌菌液的准备 | 第33页 |
| 3.2.6 农杆菌转化条件的优化研究 | 第33页 |
| 3.2.7 GUS组织化学染色 | 第33-34页 |
| 3.3 结果与分析 | 第34-40页 |
| 3.3.1 Hyg浓度的确定 | 第34页 |
| 3.3.2 Cef抑菌浓度的确定 | 第34-35页 |
| 3.3.3 农杆菌转化及其PCR鉴定 | 第35-36页 |
| 3.3.4 预培养时间对转化的影响 | 第36-37页 |
| 3.3.5 菌液浓度对转化的影响 | 第37页 |
| 3.3.6 侵染时间对转化的影响 | 第37-38页 |
| 3.3.7 AS浓度对转化的影响 | 第38页 |
| 3.3.8 共培养时间对转化的影响 | 第38-39页 |
| 3.3.9 农杆菌介导转化兰州百合 | 第39-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-42页 |
| 4 SuSy和SAI基因的原核表达分析 | 第42-50页 |
| 4.1 试验材料 | 第42页 |
| 4.1.1 质粒、菌株 | 第42页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第42页 |
| 4.2 试验方法 | 第42-45页 |
| 4.2.1 引物设计 | 第42页 |
| 4.2.2 目的基因片段的获得 | 第42-43页 |
| 4.2.3 原核表达载体的构建 | 第43-44页 |
| 4.2.4 转化表达菌株及鉴定 | 第44页 |
| 4.2.5 目的蛋白诱导条件筛选 | 第44页 |
| 4.2.6 SDS-PAGE电泳及检测 | 第44-45页 |
| 4.3 结果与分析 | 第45-47页 |
| 4.3.1 原核表达载体的构建及鉴定 | 第45-46页 |
| 4.3.2 原核诱导表达及条件优化 | 第46-47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-50页 |
| 4.4.1 原核表达获得表达蛋白 | 第47-48页 |
| 4.4.2 SuSy和SAI基因的功能 | 第48-50页 |
| 总结 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 攻读硕士学位期间发表文章 | 第59-60页 |
