| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第11-19页 |
| 1.1 蓝舌病病毒概述 | 第11-16页 |
| 1.1.1 BTV的病原学特性 | 第11页 |
| 1.1.2 BTV的基因组结构与特征 | 第11-12页 |
| 1.1.3 BTV编码的主要蛋白及其功能 | 第12-13页 |
| 1.1.4 BT的流行史和特点 | 第13-14页 |
| 1.1.5 BT的临床症状和病理变化 | 第14页 |
| 1.1.6 BT疫苗的研究 | 第14-16页 |
| 1.2 BT的实验室诊断技术 | 第16-18页 |
| 1.2.1 病毒的分离鉴定 | 第16页 |
| 1.2.2 血清学诊断方法 | 第16-17页 |
| 1.2.3 分子生物学诊断方法 | 第17-18页 |
| 1.3 研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-30页 |
| 2.1 试验材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 载体 | 第19页 |
| 2.1.2 细胞、病毒及血清 | 第19页 |
| 2.1.3 试验动物 | 第19页 |
| 2.1.4 试验中用到的引物 | 第19-21页 |
| 2.1.5 主要试剂 | 第21页 |
| 2.1.6 主要试剂配制 | 第21页 |
| 2.2 试验方法 | 第21-30页 |
| 2.2.1 目的基因的扩增 | 第21-24页 |
| 2.2.2 重组原核表达系统的构建 | 第24页 |
| 2.2.3 重组VP7和分段VP2蛋白的表达及鉴定 | 第24-25页 |
| 2.2.4 VP7和VP2蛋白的纯化 | 第25-26页 |
| 2.2.5 实验动物的免疫 | 第26页 |
| 2.2.6 间接ELISA检测方法的建立 | 第26页 |
| 2.2.7 细胞融合 | 第26-27页 |
| 2.2.8 阳性杂交瘤细胞株的筛选与克隆 | 第27-28页 |
| 2.2.9 杂交瘤细胞的冻存和复苏 | 第28页 |
| 2.2.10 单克隆抗体的生物学特性鉴定 | 第28-30页 |
| 3 结果 | 第30-49页 |
| 3.1 目的基因的扩增结果 | 第30-31页 |
| 3.2 重组表达质粒的鉴定结果 | 第31-33页 |
| 3.3 重组VP7和分段VP2蛋白的SDS-PAGE鉴定结果 | 第33-39页 |
| 3.4 重组蛋白的Western blot鉴定结果 | 第39-41页 |
| 3.5 间接ELISA检测方法的建立 | 第41-42页 |
| 3.6 杂交瘤细胞株的筛选 | 第42-43页 |
| 3.7 单克隆抗体的生物学特性鉴定 | 第43-49页 |
| 3.7.1 单克隆抗体的Western blot鉴定 | 第43-45页 |
| 3.7.2 间接免疫荧光试验 | 第45-46页 |
| 3.7.3 单克隆抗体的亚类鉴定 | 第46页 |
| 3.7.4 杂交瘤细胞染色体数的鉴定 | 第46-47页 |
| 3.7.5 单克隆抗体叠加试验 | 第47页 |
| 3.7.6 单克隆抗体的特异性试验 | 第47-48页 |
| 3.7.7 杂交瘤细胞分泌单抗的稳定性检测 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| 4.1 重组VP7和分段VP2蛋白的构建及表达 | 第49-50页 |
| 4.2 制备单克隆抗体的重要环节 | 第50-51页 |
| 4.2.1 动物免疫 | 第50页 |
| 4.2.2 细胞融合 | 第50页 |
| 4.2.3 单克隆抗体的克隆筛选 | 第50-51页 |
| 4.3 制备的单抗在BT检测中的潜在应用价值 | 第51-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第61页 |
