应用于珙桐基因表达定量分析的内参基因的筛选及验证
摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
1 绪论 | 第11-22页 |
1.1 实时荧光定量PCR技术简介 | 第11页 |
1.2 内参基因简介 | 第11-17页 |
1.2.1 内参基因研究背景 | 第11-13页 |
1.2.2 管家基因研究动态 | 第13-14页 |
1.2.3 新内参基因研究动态 | 第14-16页 |
1.2.4 内参基因组合研究动态 | 第16-17页 |
1.3 内参基因筛选方法 | 第17-19页 |
1.4 珙桐概述 | 第19-20页 |
1.4.1 珙桐生物学特性简介 | 第19页 |
1.4.2 珙桐分子生物学研究进展 | 第19-20页 |
1.5 研究内容及意义 | 第20-21页 |
1.6 技术路线 | 第21-22页 |
2 珙桐内参基因筛选 | 第22-73页 |
2.1 珙桐样品总RNA提取及cDNA合成 | 第22-26页 |
2.1.1 实验材料 | 第22页 |
2.1.2 实验方法 | 第22-23页 |
2.1.3 结果与分析 | 第23-26页 |
2.2 候选内参基因筛选及qPCR引物设计与检测 | 第26-34页 |
2.2.1 实验材料 | 第26页 |
2.2.2 实验方法 | 第26-27页 |
2.2.3 结果与分析 | 第27-34页 |
2.3 候选内参基因表达稳定性评价 | 第34-73页 |
2.3.1 实验材料 | 第34页 |
2.3.2 实验方法 | 第34-35页 |
2.3.3 结果与分析 | 第35-73页 |
3 珙桐内参基因筛选结果验证 | 第73-86页 |
3.1 实验材料 | 第73页 |
3.1.1 实验样品 | 第73页 |
3.1.2 实验试剂 | 第73页 |
3.1.3 仪器设备 | 第73页 |
3.2 实验方法 | 第73-75页 |
3.2.1 样品分类 | 第73页 |
3.2.2 目标基因引物设计与qPCR扩增 | 第73-74页 |
3.2.3 目标基因引物特异性鉴定及扩增效率计算 | 第74页 |
3.2.4 目标基因相对表达量计算 | 第74-75页 |
3.3 结果与分析 | 第75-86页 |
3.3.1 目标基因引物扩增效率分析 | 第75页 |
3.3.2 目标基因引物特异性分析 | 第75-76页 |
3.3.3 内参基因表达稳定性验证 | 第76-86页 |
4 珙桐内参基因BADH与CAC的克隆及序列分析 | 第86-91页 |
4.1 实验材料 | 第86页 |
4.1.1 实验样品 | 第86页 |
4.1.2 实验试剂 | 第86页 |
4.1.3 仪器设备 | 第86页 |
4.2 实验方法 | 第86-87页 |
4.2.1 珙桐内参基因CAC克隆 | 第86-87页 |
4.2.2 珙桐内参基因BADH克隆 | 第87页 |
4.2.3 珙桐内参基因序列分析 | 第87页 |
4.3 结果与分析 | 第87-91页 |
4.3.1 珙桐BADH基因克隆与序列分析 | 第87页 |
4.3.2 珙桐CAC基因克隆与序列分析 | 第87-91页 |
5 讨论 | 第91-100页 |
5.1 植物内参基因的筛选 | 第91-92页 |
5.2 内参基因表达稳定性评价方法的比较 | 第92-94页 |
5.3 珙桐内参基因评价与应用 | 第94-99页 |
5.3.1 常用管家基因表达稳定性评价与应用 | 第94-95页 |
5.3.2 新内参基因表达稳定性评价与应用 | 第95-98页 |
5.3.3 内参基因表达量与内参基因组合评价 | 第98-99页 |
5.4 目标基因表达分析 | 第99-100页 |
6 研究结论和展望 | 第100-102页 |
6.1 研究结论 | 第100-101页 |
6.2 研究创新点 | 第101页 |
6.3 研究展望 | 第101-102页 |
参考文献 | 第102-111页 |
附录 攻读硕士学位期间的主要学术成果 | 第111-112页 |
致谢 | 第112页 |