摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
主要符号对照表 | 第10-11页 |
第一章 前言 | 第11-24页 |
1.1 肿瘤概述 | 第11-13页 |
1.1.1 肿瘤的细胞构成 | 第11页 |
1.1.2 肿瘤的抵抗 | 第11-12页 |
1.1.3 肿瘤的转化 | 第12-13页 |
1.1.4 肿瘤细胞的迁移 | 第13页 |
1.2 肿瘤发病趋势及死亡率 | 第13-14页 |
1.2.1 我国肺癌现状 | 第14页 |
1.2.2 我国食管癌现状 | 第14页 |
1.3 细胞凋亡与肿瘤的关系 | 第14-15页 |
1.4 细胞周期与肿瘤的关系 | 第15-16页 |
1.5 细胞程序性坏死与肿瘤的关系 | 第16-17页 |
1.6 肿瘤研究的新方法学 | 第17-18页 |
1.6.1 肿瘤细胞与动物模型的方法 | 第17页 |
1.6.2 肿瘤微环境的研究方法 | 第17页 |
1.6.3 肿瘤系统生物学的方法 | 第17-18页 |
1.7 生物碱 | 第18-19页 |
1.7.1 生物碱概述 | 第18页 |
1.7.2 生物碱抗肿瘤功效研究概况 | 第18-19页 |
1.7.2.1 苦参碱 | 第18页 |
1.7.2.2 长春花碱 | 第18-19页 |
1.7.2.3 喜树碱 | 第19页 |
1.7.2.4 秋水仙碱 | 第19页 |
1.7.2.5 三尖杉酯碱 | 第19页 |
1.8 石蒜碱及盐酸石蒜碱 | 第19-22页 |
1.8.1 石蒜碱及盐酸石蒜碱概述 | 第19-20页 |
1.8.2 石蒜碱及盐酸石蒜碱抗肿瘤研究进展 | 第20-22页 |
1.8.2.1 抗急性早幼粒细胞白血病细胞 | 第20-21页 |
1.8.2.2 抗多发性骨髓瘤细胞 | 第21页 |
1.8.2.3 抗慢性粒细胞性白血病细胞 | 第21-22页 |
1.8.2.4 抗卵巢癌细胞 | 第22页 |
1.8.2.5 抗激素非依赖性前列腺癌细胞 | 第22页 |
1.9 本研究的目的与意义 | 第22-23页 |
1.10 实验线路图 | 第23-24页 |
第二章 实验材料与方法 | 第24-35页 |
2.1 实验材料 | 第24页 |
2.1.1 实验试剂 | 第24页 |
2.1.2 实验仪器 | 第24页 |
2.2 实验方法 | 第24-35页 |
2.2.1 细胞培养 | 第24页 |
2.2.2 MTT法检测细胞活性 | 第24-25页 |
2.2.3 荧光染色观察细胞形态 | 第25页 |
2.2.4 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第25-26页 |
2.2.4.1 样品染色 | 第26页 |
2.2.4.2 观察检测 | 第26页 |
2.2.5 流式细胞仪检测细胞周期 | 第26-27页 |
2.2.6 实时荧光定量PCR检测基因转录水平的变化 | 第27-29页 |
2.2.6.1 mRNA抽提 | 第27页 |
2.2.6.2 mRNA反转录成cDNA | 第27-29页 |
2.2.6.3 REALTIME-PCR | 第29页 |
2.2.7 Western blot检测蛋白表达水平的变化 | 第29-35页 |
2.2.7.1 蛋白提取 | 第29-30页 |
2.2.7.2 制作BCA标准曲线 | 第30-31页 |
2.2.7.3 SDS-PAGE制备 | 第31-33页 |
2.2.7.4 转膜及封闭 | 第33页 |
2.2.7.5 孵抗体 | 第33-34页 |
2.2.7.6 显影 | 第34-35页 |
第三章 结果与分析 | 第35-45页 |
3.1 MTT法检测细胞活性 | 第35-37页 |
3.2 AO/PI染色观察A549、Eca-109细胞形态 | 第37-39页 |
3.3 流式细胞仪检测细胞凋亡(PE-Annexin V—7-ADD) | 第39-40页 |
3.4 流式细胞仪检测细胞周期(PI-stained) | 第40-41页 |
3.5 实时荧光定量PCR检测基因转录水平的变化 | 第41-43页 |
3.6 Western blot检测蛋白表达水平的变化 | 第43-44页 |
3.7 Western blot检测信号通路蛋白磷酸化水平的变化 | 第44-45页 |
第四章 讨论 | 第45-49页 |
第五章 结论与展望 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
致谢 | 第56-59页 |
在学期间的科研情况 | 第59页 |