| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 第一部分 实验研究 | 第11-34页 |
| 第一章 CRISPR/Cas9和ZFNs介导的牛MSTN基因的敲除 | 第11-22页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 1 试剂和设备 | 第12页 |
| 1.1 实验试剂和材料 | 第12页 |
| 1.2 仪器和设备 | 第12页 |
| 2 方法 | 第12-15页 |
| 2.1 CRISPR/Cas9载体的构建 | 第12-13页 |
| 2.2 电转染 | 第13页 |
| 2.3 细胞单克隆的制备 | 第13-14页 |
| 2.4 基因组的提取 | 第14页 |
| 2.5 突变体的筛选 | 第14-15页 |
| 3 突变体检测结果 | 第15-18页 |
| 4 讨论 | 第18-19页 |
| 5 实验小结 | 第19-20页 |
| 参考文献 | 第20-22页 |
| 第二章 CRISPR/Cas9和ZFNs介导的外源基因敲入 | 第22-33页 |
| 前言 | 第22-23页 |
| 1 试剂和设备 | 第23页 |
| 1.1 实验试剂和材料 | 第23页 |
| 1.2 仪器设备 | 第23页 |
| 2 方法 | 第23-25页 |
| 2.1 打靶细胞的制备和筛选 | 第23-24页 |
| 2.2 基因组的提取 | 第24页 |
| 2.3 转基因细胞的鉴定 | 第24-25页 |
| 3 结果 | 第25-29页 |
| 3.1 同源臂PCR鉴定结果 | 第25页 |
| 3.2 打靶细胞外源基因表达检测 | 第25-29页 |
| 4 讨论 | 第29-30页 |
| 5 实验小结 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-33页 |
| 实验总结 | 第33-34页 |
| 第二部分 文献综述 | 第34-43页 |
| 前言 | 第34页 |
| 1 ZFNs在动物基因改良方面的应用 | 第34-36页 |
| 2 TALENs在动物基因改良方面的应用 | 第36-37页 |
| 3 CRISPR在动物基因改良方面的应用 | 第37-38页 |
| 4 展望 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 攻读学位期间申请的专利 | 第44页 |