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水稻ONAC055的功能分析及转基因植株的转录组分析

中文摘要第3-4页
英文摘要第4-5页
缩略词表第9-10页
1 绪论第10-22页
    1.1 引言第10页
    1.2 NAC转录因子的研究进展第10-16页
        1.2.1 NAC转录因子的起源及进化第10-11页
        1.2.2 NAC转录因子的结构与分类第11-12页
        1.2.3 NAC转录因子的生物学功能研究第12-14页
        1.2.4 NAC转录因子的转录调控研究第14-16页
        1.2.5 NAC转录因子的转录后调控研究第16页
    1.3 水稻NAC转录因子的研究进展第16-20页
        1.3.1 水稻中NAC转录因子的分类第16-17页
        1.3.2 水稻中参与生物或非生物胁迫的NAC转录因子研究第17页
        1.3.3 水稻中参与生长发育的NAC转录因子研究第17-20页
    1.4 课题所用的研究方法第20页
        1.4.1 转录组测序(RNA-Seq技术)第20页
        1.4.2 酵母双杂交技术第20页
    1.5 课题研究的目的及意义第20-21页
    1.6 课题研究内容第21页
    1.7 课题的创新之处第21-22页
2 ONAC055超表达、干扰植株的表型分析第22-34页
    2.1 实验材料及试剂第22-25页
        2.1.1 实验材料第22页
        2.1.2 工具酶及主要生化试剂第22页
        2.1.3 培养基及储存液配方第22-25页
    2.2 主要仪器设备第25-26页
    2.3 实验方法第26-28页
        2.3.1 转基因植株的获得第26页
        2.3.2 转基因植株阳性检测第26-27页
        2.3.3 阳性植株的炼苗及移栽第27页
        2.3.4 T1代植株的种植第27-28页
    2.4 实验结果第28-31页
        2.4.1 转基因植株阳性检测第28-29页
        2.4.2 转基因植株T1代7天的表型分析第29-30页
        2.4.3 转基因植株T1代14天的表型分析第30-31页
    2.5 讨论第31-34页
3 ONAC055超表达、干扰植株转录组分析第34-54页
    3.1 实验材料及试剂第34-35页
        3.1.1 实验材料第34页
        3.1.2 工具酶及主要生化试剂第34页
        3.1.3 储存液配方第34-35页
    3.2 主要仪器设备第35页
    3.3 实验方法第35-40页
        3.3.1 引物合成第35-36页
        3.3.2 ONAC055超表达、干扰植株阳性检测第36页
        3.3.3 Trizol法提取水稻总RNA的及反转录第36-37页
        3.3.4 荧光定量PCR(qPCR)反应体系及反应程序第37-38页
        3.3.5 构建文库及测序第38-39页
        3.3.6 信息分析流程第39-40页
    3.4 实验结果第40-52页
        3.4.1 荧光定量PCR(qPCR)检测第40-41页
        3.4.2 数据的筛选、比对和质控第41-43页
        3.4.3 差异基因表达分析第43-44页
        3.4.4 差异基因的GO功能显著性富集分析第44-46页
        3.4.5 差异基因的Pathway显著性富集分析第46-48页
        3.4.6 差异基因的功能分析及归纳第48-52页
    3.5 讨论第52-54页
4 ONAC055的互作蛋白筛选第54-72页
    4.1 实验材料及试剂第54-57页
        4.1.1 实验材料第54页
        4.1.2 载体第54页
        4.1.3 工具酶及主要生化试剂第54-55页
        4.1.4 培养基及储存液配方第55-57页
    4.2 主要仪器设备第57-58页
    4.3 实验方法第58-67页
        4.3.1 酵母双杂交BD载体的构建第58-63页
        4.3.2 pGBKT7-ONAC055转录激活和自身互作检测第63-64页
        4.3.3 酵母双杂交筛选第64-65页
        4.3.4 酵母质粒提取第65-66页
        4.3.5 酵母共转化第66-67页
    4.4 实验结果第67-70页
        4.4.1 酵母双杂交BD载体的构建第67页
        4.4.2 转录激活活性检测第67-68页
        4.4.3 ONAC055互作蛋白的筛选第68-70页
        4.4.4 ONAC055互作蛋白的分析第70页
    4.5 讨论第70-72页
5 主要结果、后续工作及展望第72-74页
    5.1 主要结果第72页
    5.2 后续工作及展望第72-74页
致谢第74-76页
参考文献第76-82页
附录第82页
    A. 作者攻读硕士期间发表的论文目录第82页
    B. ONAC055基因序列第82页

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