摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第13-26页 |
1.1 ILC2s细胞 | 第15-18页 |
1.1.1 ILC2s细胞的特点和分布 | 第15-16页 |
1.1.2 ILC2s细胞的诱导和活化 | 第16页 |
1.1.3 ILC2s的功能 | 第16-17页 |
1.1.4 ILC2s细胞与哮喘的关系 | 第17-18页 |
1.2 GITR/GITRL | 第18-23页 |
1.2.1 GITR/GITRL的结构和组织分布 | 第18-19页 |
1.2.2 GITR/GITRL的共刺激作用 | 第19-22页 |
1.2.3 GITR/GITRL与Treg细胞的关系 | 第22页 |
1.2.4 GITR/GITRL与哮喘的关系 | 第22-23页 |
1.3 本项研究的目的、方法、试验设计及其意义 | 第23-26页 |
1.3.1 研究目的 | 第23页 |
1.3.2 研究方法 | 第23页 |
1.3.3 试验设计 | 第23-25页 |
1.3.3.1 研究总体思路 | 第23-24页 |
1.3.3.2 实验设计方案 | 第24-25页 |
1.3.4 本研究的意义 | 第25-26页 |
第二章 哮喘小鼠肺组织GITR/GITRL和ILC2s的表达及其相互关系 | 第26-44页 |
2.1 实验仪器和材料 | 第27-29页 |
2.1.1 实验动物 | 第27页 |
2.1.2 实验仪器 | 第27-28页 |
2.1.3 实验试剂和材料 | 第28-29页 |
2.1.4 主要溶液配制 | 第29页 |
2.2 实验方法 | 第29-34页 |
2.2.1 小鼠哮喘模型的建立 | 第29-30页 |
2.2.2 小鼠组织标本的获取 | 第30页 |
2.2.3 肺组织切片HE染色 | 第30-31页 |
2.2.4 ELISA法检测血清总IgE和OVA-IgE浓度 | 第31页 |
2.2.5 流式细胞技术检测哮喘小鼠肺组织ILC2和GITR+细胞 | 第31-32页 |
2.2.6 qRT-PCR检测肺组织ILC2细胞的相关因子以及肺组织细胞表面的GITR/GITRL | 第32-33页 |
2.2.7 免疫荧光法检测肺组织细胞表面GITR的表达 | 第33-34页 |
2.2.8 统计学分析 | 第34页 |
2.3 实验结果 | 第34-42页 |
2.3.1 小鼠哮喘模型 | 第34-35页 |
2.3.2 哮喘小鼠肺组织GITR及其配体表达量增多 | 第35-37页 |
2.3.3 哮喘小鼠肺组织ILC2s细胞数及其转录因子表达水平显著升高 | 第37-39页 |
2.3.4 哮喘小鼠肺组织ILC2s相关细胞因子表达增加 | 第39-40页 |
2.3.5 哮喘小鼠肺组织ILC2s表达GITR | 第40页 |
2.3.6 哮喘小鼠肺组织ILC2s细胞数量和GITR表达量的相关性分析 | 第40-42页 |
2.4 讨论 | 第42-44页 |
第三章 外源性GITRL融合蛋白对哮喘小鼠肺组织ILC2s的影响 | 第44-53页 |
3.1 实验仪器和材料 | 第44-46页 |
3.1.1 实验仪器 | 第44-45页 |
3.1.2 实验试剂和材料 | 第45页 |
3.1.3 主要溶液配制 | 第45-46页 |
3.2 实验方法 | 第46-48页 |
3.2.1 诱导表达mGITRL蛋白和对照蛋白 | 第46页 |
3.2.2 蛋白电泳鉴定诱导表达的mGITRL融合蛋白 | 第46-47页 |
3.2.3 纯化mGITRL重组蛋白以及对照蛋白 | 第47页 |
3.2.4 重组蛋白去内毒素 | 第47-48页 |
3.2.5 哮喘小鼠体内注射mGITRL蛋白 | 第48页 |
3.2.6 检测小鼠肺组织GITR表达量和ILC2s水平 | 第48页 |
3.2.7 qRT-PCR检测小鼠肺组织IL-5 和IL-13的表达水平 | 第48页 |
3.2.8 统计学分析 | 第48页 |
3.3 实验结果 | 第48-51页 |
3.3.1 mGITRL融合蛋白的诱导、纯化和鉴定 | 第48-49页 |
3.3.2 mGITRL蛋白注射后小鼠肺组织GITR表达水平增高 | 第49-50页 |
3.3.3 mGITRL蛋白对哮喘小鼠肺组织ILC2s细胞的影响 | 第50页 |
3.3.4 qRT-PCR结果发现mGITRL蛋白注射后,小鼠肺组织Ⅱ型细胞因子IL-5 和IL-13的表达水平增高 | 第50-51页 |
3.4 讨论 | 第51-53页 |
第四章 主要结论及展望 | 第53-54页 |
4.1 主要结论 | 第53页 |
4.2 展望 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
攻读硕士期间发表的文章 | 第60页 |