| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略语 | 第14-15页 |
| 前言 | 第15-18页 |
| 研究现状、成果 | 第15-17页 |
| 研究目的、方法 | 第17-18页 |
| 一、miR-139过表达重组慢病毒载体的构建及其稳定转染H9c2细胞系的建立 | 第18-37页 |
| 1.1 实验材料 | 第18-22页 |
| 1.1.1 慢病毒载体系统 | 第18-19页 |
| 1.1.2 主要实验菌株和试剂 | 第19-21页 |
| 1.1.3 主要仪器和设备 | 第21-22页 |
| 1.2 实验方法 | 第22-31页 |
| 1.2.1 主要溶液的配制 | 第22-23页 |
| 1.2.2 制备及鉴定重组慢病毒载体 | 第23-26页 |
| 1.2.3 慢病毒的包装 | 第26-27页 |
| 1.2.4 H9c2细胞的培养 | 第27-28页 |
| 1.2.5 miR-139过表达重组慢病毒载体转染H9c2细胞 | 第28页 |
| 1.2.6 qRT-PCR检测慢病毒转染H9c2细胞中miR-139-5p的表达量 | 第28-31页 |
| 1.2.7 数据处理 | 第31页 |
| 1.3 结果 | 第31-34页 |
| 1.3.1 重组慢病毒载体的构建和鉴定 | 第31-32页 |
| 1.3.2 miR-139慢病毒包装 | 第32-33页 |
| 1.3.3 miR-139过表达慢病毒转染H9c2细胞效率鉴定 | 第33页 |
| 1.3.4 miR-139-5p过表达稳定转染H9c2细胞系鉴定 | 第33-34页 |
| 1.4 讨论 | 第34-36页 |
| 1.5 小结 | 第36-37页 |
| 二、miR-139-5p过表达对H9c2细胞缺氧/复氧损伤的影响 | 第37-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第37-38页 |
| 2.1.1 细胞 | 第37页 |
| 2.1.2 主要器材 | 第37页 |
| 2.1.3 药品与试剂 | 第37-38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-41页 |
| 2.2.1 主要溶液的配制 | 第38-39页 |
| 2.2.2 稳定转染H9c2细胞H/R模型的建立 | 第39页 |
| 2.2.3 实验分组 | 第39页 |
| 2.2.4 MTT法检测细胞存活率 | 第39页 |
| 2.2.5 细胞培养液中LDH活性测定 | 第39-40页 |
| 2.2.6 Hoechst 33258染色 | 第40页 |
| 2.2.7 数据处理 | 第40-41页 |
| 2.3 结果 | 第41-44页 |
| 2.3.1 细胞存活率 | 第41页 |
| 2.3.2 细胞培养液中LDH活性 | 第41-43页 |
| 2.3.3 Hoechst33258染色 | 第43-44页 |
| 2.4 讨论 | 第44-45页 |
| 2.5 小结 | 第45-46页 |
| 三、miR-139-5p在H9c2细胞中靶基因的预测和验证 | 第46-60页 |
| 3.1 实验材料 | 第46-47页 |
| 3.1.1 主要实验菌株和试剂 | 第46-47页 |
| 3.2 实验方法 | 第47-51页 |
| 3.2.1 主要溶液的配制 | 第47-48页 |
| 3.2.2 双荧光素活性检测实验 | 第48-49页 |
| 3.2.3 Western Blot检测 | 第49-51页 |
| 3.2.4 数据处理 | 第51页 |
| 3.4 结果 | 第51-55页 |
| 3.4.1 靶基因预测网站预测的靶基因序列上miR-139-5p的结合位点 | 第51-52页 |
| 3.4.2 双荧光素报告基因结果 | 第52-54页 |
| 3.4.3 Western Blot结果 | 第54-55页 |
| 3.5 讨论 | 第55-57页 |
| 3.6 小结 | 第57-60页 |
| 四、miR-139-5p过表达加重H9c2细胞H/R损伤的机制研究 | 第60-73页 |
| 4.1 实验材料 | 第60-61页 |
| 4.1.1 实验菌株和试剂 | 第60页 |
| 4.1.2 主要实验器材 | 第60-61页 |
| 4.1.3 主要仪器和设备 | 第61页 |
| 4.2 实验方法 | 第61-62页 |
| 4.2.1 Western Blot | 第61页 |
| 4.2.2 细胞免疫荧光 | 第61页 |
| 4.2.3 数据处理 | 第61-62页 |
| 4.3 结果 | 第62-68页 |
| 4.3.1 miR-139-5p对H9c2细胞H/R损伤后蛋白表达的影响 | 第62-67页 |
| 4.3.2 miR-139-5p过表达对CIAPIN1细胞内定位的影响 | 第67-68页 |
| 4.4 讨论 | 第68-72页 |
| 4.5 小结 | 第72-73页 |
| 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-79页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第79-80页 |
| 综述 MicroRNA在心肌缺血再灌注损伤中功能的研究进展 | 第80-91页 |
| 综述参考文献 | 第87-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 个人简历 | 第92页 |
