| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1.1 E3泛素连接酶LRSAM1 | 第13-20页 |
| 1.1.1 蛋白质翻译后修饰——泛素化 | 第13-15页 |
| 1.1.2 E3泛素连接酶 | 第15-16页 |
| 1.1.3 LRSAM1的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.1.4 E3泛素连接酶的活性调控 | 第17-18页 |
| 1.1.5 E3泛素连接酶的结构域研究 | 第18-20页 |
| 1.2 多克隆抗体 | 第20-23页 |
| 1.2.1 多克隆抗体的定义 | 第20页 |
| 1.2.2 多克隆抗体的制备原则 | 第20-21页 |
| 1.2.3 多克隆抗体的质量鉴定 | 第21-22页 |
| 1.2.4 多克隆抗体的科研价值 | 第22-23页 |
| 第二章 引言 | 第23-25页 |
| 2.1 选题背景 | 第23页 |
| 2.2 研究目的和意义 | 第23-25页 |
| 第三章 LRSAM1的纯化和多克隆抗体的制备 | 第25-31页 |
| 3.1 前言 | 第25页 |
| 3.2 实验材料、试剂与仪器 | 第25-26页 |
| 3.2.1 实验材料和试剂 | 第25页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第25-26页 |
| 3.3 实验方法 | 第26-28页 |
| 3.3.1 无标签LRSAM1的表达和变性纯化 | 第26-28页 |
| 3.4 实验结果 | 第28-29页 |
| 3.5 分析与讨论 | 第29-31页 |
| 第四章 LRSAM1多克隆抗体的纯化和效价鉴定 | 第31-37页 |
| 4.1 前言 | 第31页 |
| 4.2 实验材料、试剂与仪器 | 第31页 |
| 4.2.1 实验材料和试剂 | 第31页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第31页 |
| 4.3 试验方法 | 第31-33页 |
| 4.3.1 溴化氰活化Sepharose Beads的制备 | 第31-32页 |
| 4.3.2 重组抗原与活化Sepharose Beads的交联 | 第32页 |
| 4.3.3 LRSAM1多克隆抗体的亲和纯化 | 第32页 |
| 4.3.4 LRSAM1多克隆抗体的质量鉴定 | 第32-33页 |
| 4.4 实验结果 | 第33-34页 |
| 4.5 分析与讨论 | 第34-37页 |
| 第五章 LRSAM1 N端结构域对E3活性的调控 | 第37-47页 |
| 5.1 前言 | 第37页 |
| 5.2 实验材料、试剂与仪器 | 第37页 |
| 5.2.1 实验材料和试剂 | 第37页 |
| 5.2.2 实验仪器 | 第37页 |
| 5.3 试验方法 | 第37-41页 |
| 5.3.1 泛素化系统相关蛋白纯化与活性检测 | 第37-39页 |
| 5.3.2 LRSAM1突变体的构建和纯化 | 第39-40页 |
| 5.3.3 体外泛素化反应 | 第40-41页 |
| 5.4 实验结果 | 第41-44页 |
| 5.5 分析与讨论 | 第44-47页 |
| 第六章 LRSAM1的自缔结和分子间泛素化 | 第47-53页 |
| 6.1 前言 | 第47页 |
| 6.2 实验材料、试剂和仪器 | 第47页 |
| 6.2.1 实验材料和试剂 | 第47页 |
| 6.2.2 实验仪器 | 第47页 |
| 6.3 试验方法 | 第47-49页 |
| 6.3.1 LRSAM1蛋白的自缔结 | 第47-49页 |
| 6.3.2 LRSAM1蛋白分子间泛素化 | 第49页 |
| 6.4 实验结果 | 第49-50页 |
| 6.5 讨论与分析 | 第50-53页 |
| 第七章 LRSAM1调控分子间泛素化类型 | 第53-59页 |
| 7.1 前言 | 第53页 |
| 7.2 实验材料、试剂与仪器 | 第53页 |
| 7.2.1 实验材料和试剂 | 第53页 |
| 7.2.2 实验仪器 | 第53页 |
| 7.3 试验方法 | 第53-54页 |
| 7.3.1 LRSAM1蛋白C端删除突变体的构建和纯化 | 第53页 |
| 7.3.2 LRSAM1蛋白C端删除突变体的体外泛素化重组 | 第53-54页 |
| 7.4 实验结果 | 第54-56页 |
| 7.5 讨论与分析 | 第56-59页 |
| 第八章 CC1拮抗CC2-SAM1对LRSAM1活性的抑制 | 第59-65页 |
| 8.1 前言 | 第59页 |
| 8.2 实验材料、试剂和仪器 | 第59页 |
| 8.2.1 实验材料和试剂 | 第59页 |
| 8.2.2 实验仪器 | 第59页 |
| 8.3 试验方法 | 第59-61页 |
| 8.3.1 LRSAM1结构域突变体的构建和纯化 | 第59-60页 |
| 8.3.2 体外研究LRSAM1各结构域对活性的影响 | 第60页 |
| 8.3.3 细胞内TSG101的泛素化实验 | 第60-61页 |
| 8.4 实验结果 | 第61-63页 |
| 8.5 讨论与分析 | 第63-65页 |
| 第九章 结论与展望 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 附录 | 第75-77页 |
| 致谢 | 第77-79页 |
| 在校期间发表论文 | 第79页 |
