中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略语/符号说明 | 第10-12页 |
前言 | 第12页 |
研究现状、成果 | 第12-13页 |
研究目的、方法 | 第13-15页 |
对象和方法 | 第15-28页 |
1.1 细胞系 | 第15页 |
1.2 主要仪器设备 | 第15-16页 |
1.3 主要试剂 | 第16-18页 |
1.3.1 细胞培养及转染实验 | 第16页 |
1.3.2 RT-PCR | 第16页 |
1.3.3 Western blot实验 | 第16-17页 |
1.3.4 生长增殖实验 | 第17页 |
1.3.5 流式细胞术实验 | 第17页 |
1.3.6 实验药物 | 第17页 |
1.3.7 主要溶剂配制方法 | 第17-18页 |
1.4 实验方法 | 第18-27页 |
1.4.1 细胞培养 | 第18-19页 |
1.4.2 质粒提取及脂质体转染细胞 | 第19-20页 |
1.4.3 RNA提取与检测 | 第20-21页 |
1.4.4 CDNA的合成 | 第21页 |
1.4.5 实时荧光定量PCR(SYBR Green法) | 第21-22页 |
1.4.6 Western blot蛋白印记 | 第22-24页 |
1.4.7MTT法检测细胞增殖 | 第24-25页 |
1.4.8 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第25-26页 |
1.4.9 流式细胞仪测细胞周期 | 第26-27页 |
1.5 统计学分析 | 第27-28页 |
结果 | 第28-45页 |
2.1 T47D细胞形态 | 第28页 |
2.2 T47D生物学特征 | 第28-29页 |
2.3 小RNA干扰乳腺癌细胞BAG-1 表达 | 第29-34页 |
2.3.1 siRNA质粒的构建 | 第29-31页 |
2.3.2 质粒抽提结果 | 第31页 |
2.3.3 T47D细胞siRNA干扰BAG-1 的瞬时转染效率检测 | 第31-32页 |
2.3.4 Realtime-PCR检测siRNA干扰后T47D细胞BAG-1 的mRNA表达 | 第32-33页 |
2.3.5 Western blot检测siRNA干扰后T47D细胞BAG-1 的蛋白表达 | 第33-34页 |
2.4 BAG-1 与ER,AKT,ERK,p-AKT,p-ERK表达的关系 | 第34-36页 |
2.4.1 Realtime-PCR检测siRNA干扰后T47D细胞ER的mRNA表达 | 第34-35页 |
2.4.2 Western blot检测si RNA干扰后T47D细胞ER,AKT,ERK, p-AKT,p-ERK的蛋白表达 | 第35-36页 |
2.5 检测siRNA干扰后T47D细胞对药物敏感性的变化 | 第36-45页 |
2.5.1 MTT检测药物作用下细胞增殖能力 | 第36-38页 |
2.5.2 流式细胞术检测药物作用下细胞凋亡 | 第38-42页 |
2.5.3 流式细胞术检测药物作用下细胞周期 | 第42-45页 |
讨论 | 第45-49页 |
3.1 ER及其下游分子与他莫昔芬耐药的发生发展 | 第45-47页 |
3.2 BAG-1 与ER及他莫昔芬耐药的研究 | 第47-49页 |
结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第56-57页 |
综述 BAG-1 影响乳腺癌细胞TAM耐药性及相关信号转导通路的研究进展 | 第57-70页 |
综述参考文献 | 第63-70页 |
致谢 | 第70-71页 |