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双峰驼PIGR和FCGRT的基因克隆、生物信息学分析及在扁桃体中表达特性的研究

摘要第4-7页
SUMMARY第7-10页
英文缩略词表第11-16页
第一部分 文献综述第16-36页
    第一章 黏膜免疫系统概述第16-20页
        1 黏膜免疫系统的构成形式第16-17页
        2 黏膜免疫系统的作用机制第17-18页
            2.1 黏膜免疫系统的抗原摄取和抗原递呈第17-18页
            2.2 黏膜免疫系统的免疫应答机制第18页
        3 黏膜免疫耐受机制第18-20页
    第二章 pIgR和FcRn在黏膜免疫系统中的作用第20-29页
        1 pIgR和FcRn概述第20页
        2 pIgR的生物学特性第20-25页
            2.1 pIgR的组成结构第20-21页
            2.2 PIGR基因的定位和结构第21-22页
            2.3 pIgR的主要功能第22-23页
            2.4 pIgR的组织表达特点第23-24页
            2.5 pIgR的表达调控第24-25页
        3 FcRn的生物学特性第25-29页
            3.1 FcRn的组成结构第25页
            3.2 FCGRT基因的结构与定位第25-26页
            3.3 FcRn的主要功能第26-27页
            3.4 FcRn的组织表达特点第27-28页
            3.5 FcRn的表达调控第28-29页
    第三章 扁桃体的构成和功能第29-36页
        1 扁桃体的种类第29-32页
            1.1 腭扁桃体第29页
            1.2 舌扁桃体第29-30页
            1.3 咽扁桃体第30页
            1.4 软腭扁桃体第30-31页
            1.5 会厌扁桃体第31页
            1.6 咽鼓管扁桃体第31-32页
        2 扁桃体对机体的重要保护作用第32-33页
        3 双峰驼在免疫方面的特殊性及其扁桃体相关研究第33-36页
第二部分 实验研究第36-114页
    第一章 双峰驼FCGRT和PIGR的基因克隆及相关生物信息学分析第36-65页
        1 材料与方法第38-43页
            1.1 材料第38-39页
                1.1.1 主要仪器设备第38页
                1.1.2 主要试剂第38-39页
                1.1.3 引物合成第39页
            1.2 方法第39-42页
                1.2.1 总RNA的提取第39页
                1.2.2 去除基因组DNA第39页
                1.2.3 合成c DNA第一链第39页
                1.2.4 扩增及基因片段的回收第39-41页
                1.2.5 回收片段加A并回收第41页
                1.2.6 连接p MD18-T第41页
                1.2.7 DH5a感受态细胞的制备第41页
                1.2.8 转化感受态细胞第41-42页
                1.2.9 阳性克隆的鉴定和测序第42页
            1.3 生物信息学分析第42-43页
                1.3.1 理化性质第42页
                1.3.2 亚细胞定位分析第42页
                1.3.3 跨膜情况预测第42页
                1.3.4 信号肽预测第42页
                1.3.5 磷酸化位点预测第42页
                1.3.6 一级结构预测第42页
                1.3.7 二级结构预测第42-43页
                1.3.8 三维结构预测第43页
                1.3.9 序列同源性分析第43页
                1.3.10 进化分析第43页
        2 实验结果第43-61页
            2.1 总RNA的抽提第43-44页
            2.2 目的基因的PCR扩增第44页
            2.3 重组质粒的菌液PCR鉴定第44-45页
            2.4 克隆所得双峰驼FcRn α 链和pIgR CDS区的序列信息第45-47页
                2.4.1 FCGRT α 链CDS区序列第45-46页
                2.4.2 PIGR CDS区序列第46-47页
            2.5 双峰驼FcRnα链和pIgR的理化性质与亚细胞定位分析第47-48页
            2.6 双峰驼FcRnα链和pIgR跨膜情况预测第48-49页
            2.7 双峰驼FcRnα链和pIgR信号肽预测第49-51页
            2.8 双峰驼FcRnα链和pIgR磷酸化位点预测第51-52页
            2.9 双峰驼FcRnα链和pIgR一级结构预测第52页
            2.10 双峰驼FcRnα链和pIgR二级结构预测第52-54页
            2.11 双峰驼FcRnα链和pIgR三维结构预测第54-56页
            2.12 克隆所得双峰驼FcRnα链和pIgR CDS区的同源性分析第56-57页
            2.13 克隆所得双峰驼FcRnα链和pIgR的进化树构建第57-61页
        3 讨论第61-64页
            3.1 亚细胞定位第61页
            3.2 一级结构第61-62页
            3.3 二级结构第62页
            3.4 三级结构第62-63页
            3.5 同源性分析第63-64页
        4 小结第64-65页
    第二章 PIGR和FCGRT在双峰驼扁桃体中的表达特点及其与黏膜免疫的关系第65-73页
        1 材料方法第67页
            1.1 主要试剂第67页
            1.2 主要仪器第67页
            1.3 主要耗材第67页
        2 实验方法第67-69页
            2.1 RNA提取第67-68页
            2.2 逆转录第68-69页
                2.2.1 总RNA中基因组DNA的去除第68页
                2.2.2 逆转录第68页
                2.2.3 c DNA的稀释与保存第68-69页
            2.3 荧光定量PCR检测第69页
                2.3.1 引物合成第69页
                2.3.2 PCR反应体系的配制第69页
                2.3.3 荧光定量PCR循环条件第69页
        3 结果第69-71页
            3.1 双峰驼扁桃体总RNA的提取第69-70页
            3.2 FCGRT在双峰驼扁桃体中的表达情况第70-71页
            3.3 PIGR在双峰驼扁桃体中的表达情况第71页
        4 讨论第71-72页
        5 小结第72-73页
    第三章 成年双峰驼扁桃体中pIgR和FcRn的细胞分布及其与黏膜免疫的关系第73-114页
        实验一 成年双峰驼扁桃体中pIgR的细胞分布及其与黏膜免疫的关系第73-91页
            1 材料与方法第76-78页
                1.1 材料第76-77页
                    1.1.1 实验动物第76页
                    1.1.2 药品与试剂第76-77页
                    1.1.3 主要仪器设备第77页
                1.2 方法第77-78页
                    1.2.1 样品采集第77页
                    1.2.2 石蜡切片第77-78页
                    1.2.3 间接免疫组织化学(SABC)染色第78页
                    1.2.4 数据的获取及分析第78页
            2 结果第78-89页
                2.1 同一器官不同区域pIgR阳性细胞密度的比较第84-87页
                2.2 不同器官同一区域pIgR阳性细胞密度的比较第87-89页
                    2.2.1 滤泡区第87页
                    2.2.2 滤泡间区第87页
                    2.2.3 上皮下区第87页
                    2.2.4 网状上皮下区第87页
                    2.2.5 腺体周围区第87-89页
            3 讨论第89-90页
            4.小结第90-91页
        实验二 成年双峰驼扁桃体中FcRn的细胞分布及其与黏膜免疫的关系第91-107页
            1 材料与方法第93-94页
            2 结果第94-104页
                2.1 同一器官不同区域FcRn阳性细胞密度的比较第99-102页
                2.2 不同器官同一区域FcRn阳性细胞密度的比较第102-104页
                    2.2.1 滤泡区第102页
                    2.2.2 滤泡间区第102页
                    2.2.3 网状上皮下区第102-103页
                    2.2.4 腺体周围区第103-104页
                    2.2.5 上皮下区第104页
            3 讨论第104-106页
            4 小结第106-107页
        实验三 成年双峰驼扁桃体同部位pIgR和FcRn阳性细胞的分布及其与黏膜免疫的关系第107-114页
            1 材料与方法第109页
            2 结果第109-111页
                2.1 同器官同区域pIgR和FcRn阳性细胞密度比较第109-111页
                    2.1.1 腭扁桃体第109页
                    2.1.2 咽扁桃体第109页
                    2.1.3 会厌扁桃体第109页
                    2.1.4 软腭扁桃体第109-110页
                    2.1.5 咽鼓管扁桃体第110页
                    2.1.6 舌扁桃体第110-111页
            3 讨论第111-112页
            4 小结第112-114页
第三部分 全文结论第114-116页
参考文献第116-140页
致谢第140-142页
作者简介第142-144页
导师简介第144-145页

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