摘要 | 第4-7页 |
SUMMARY | 第7-10页 |
英文缩略词表 | 第11-16页 |
第一部分 文献综述 | 第16-36页 |
第一章 黏膜免疫系统概述 | 第16-20页 |
1 黏膜免疫系统的构成形式 | 第16-17页 |
2 黏膜免疫系统的作用机制 | 第17-18页 |
2.1 黏膜免疫系统的抗原摄取和抗原递呈 | 第17-18页 |
2.2 黏膜免疫系统的免疫应答机制 | 第18页 |
3 黏膜免疫耐受机制 | 第18-20页 |
第二章 pIgR和FcRn在黏膜免疫系统中的作用 | 第20-29页 |
1 pIgR和FcRn概述 | 第20页 |
2 pIgR的生物学特性 | 第20-25页 |
2.1 pIgR的组成结构 | 第20-21页 |
2.2 PIGR基因的定位和结构 | 第21-22页 |
2.3 pIgR的主要功能 | 第22-23页 |
2.4 pIgR的组织表达特点 | 第23-24页 |
2.5 pIgR的表达调控 | 第24-25页 |
3 FcRn的生物学特性 | 第25-29页 |
3.1 FcRn的组成结构 | 第25页 |
3.2 FCGRT基因的结构与定位 | 第25-26页 |
3.3 FcRn的主要功能 | 第26-27页 |
3.4 FcRn的组织表达特点 | 第27-28页 |
3.5 FcRn的表达调控 | 第28-29页 |
第三章 扁桃体的构成和功能 | 第29-36页 |
1 扁桃体的种类 | 第29-32页 |
1.1 腭扁桃体 | 第29页 |
1.2 舌扁桃体 | 第29-30页 |
1.3 咽扁桃体 | 第30页 |
1.4 软腭扁桃体 | 第30-31页 |
1.5 会厌扁桃体 | 第31页 |
1.6 咽鼓管扁桃体 | 第31-32页 |
2 扁桃体对机体的重要保护作用 | 第32-33页 |
3 双峰驼在免疫方面的特殊性及其扁桃体相关研究 | 第33-36页 |
第二部分 实验研究 | 第36-114页 |
第一章 双峰驼FCGRT和PIGR的基因克隆及相关生物信息学分析 | 第36-65页 |
1 材料与方法 | 第38-43页 |
1.1 材料 | 第38-39页 |
1.1.1 主要仪器设备 | 第38页 |
1.1.2 主要试剂 | 第38-39页 |
1.1.3 引物合成 | 第39页 |
1.2 方法 | 第39-42页 |
1.2.1 总RNA的提取 | 第39页 |
1.2.2 去除基因组DNA | 第39页 |
1.2.3 合成c DNA第一链 | 第39页 |
1.2.4 扩增及基因片段的回收 | 第39-41页 |
1.2.5 回收片段加A并回收 | 第41页 |
1.2.6 连接p MD18-T | 第41页 |
1.2.7 DH5a感受态细胞的制备 | 第41页 |
1.2.8 转化感受态细胞 | 第41-42页 |
1.2.9 阳性克隆的鉴定和测序 | 第42页 |
1.3 生物信息学分析 | 第42-43页 |
1.3.1 理化性质 | 第42页 |
1.3.2 亚细胞定位分析 | 第42页 |
1.3.3 跨膜情况预测 | 第42页 |
1.3.4 信号肽预测 | 第42页 |
1.3.5 磷酸化位点预测 | 第42页 |
1.3.6 一级结构预测 | 第42页 |
1.3.7 二级结构预测 | 第42-43页 |
1.3.8 三维结构预测 | 第43页 |
1.3.9 序列同源性分析 | 第43页 |
1.3.10 进化分析 | 第43页 |
2 实验结果 | 第43-61页 |
2.1 总RNA的抽提 | 第43-44页 |
2.2 目的基因的PCR扩增 | 第44页 |
2.3 重组质粒的菌液PCR鉴定 | 第44-45页 |
2.4 克隆所得双峰驼FcRn α 链和pIgR CDS区的序列信息 | 第45-47页 |
2.4.1 FCGRT α 链CDS区序列 | 第45-46页 |
2.4.2 PIGR CDS区序列 | 第46-47页 |
2.5 双峰驼FcRnα链和pIgR的理化性质与亚细胞定位分析 | 第47-48页 |
2.6 双峰驼FcRnα链和pIgR跨膜情况预测 | 第48-49页 |
2.7 双峰驼FcRnα链和pIgR信号肽预测 | 第49-51页 |
2.8 双峰驼FcRnα链和pIgR磷酸化位点预测 | 第51-52页 |
2.9 双峰驼FcRnα链和pIgR一级结构预测 | 第52页 |
2.10 双峰驼FcRnα链和pIgR二级结构预测 | 第52-54页 |
2.11 双峰驼FcRnα链和pIgR三维结构预测 | 第54-56页 |
2.12 克隆所得双峰驼FcRnα链和pIgR CDS区的同源性分析 | 第56-57页 |
2.13 克隆所得双峰驼FcRnα链和pIgR的进化树构建 | 第57-61页 |
3 讨论 | 第61-64页 |
3.1 亚细胞定位 | 第61页 |
3.2 一级结构 | 第61-62页 |
3.3 二级结构 | 第62页 |
3.4 三级结构 | 第62-63页 |
3.5 同源性分析 | 第63-64页 |
4 小结 | 第64-65页 |
第二章 PIGR和FCGRT在双峰驼扁桃体中的表达特点及其与黏膜免疫的关系 | 第65-73页 |
1 材料方法 | 第67页 |
1.1 主要试剂 | 第67页 |
1.2 主要仪器 | 第67页 |
1.3 主要耗材 | 第67页 |
2 实验方法 | 第67-69页 |
2.1 RNA提取 | 第67-68页 |
2.2 逆转录 | 第68-69页 |
2.2.1 总RNA中基因组DNA的去除 | 第68页 |
2.2.2 逆转录 | 第68页 |
2.2.3 c DNA的稀释与保存 | 第68-69页 |
2.3 荧光定量PCR检测 | 第69页 |
2.3.1 引物合成 | 第69页 |
2.3.2 PCR反应体系的配制 | 第69页 |
2.3.3 荧光定量PCR循环条件 | 第69页 |
3 结果 | 第69-71页 |
3.1 双峰驼扁桃体总RNA的提取 | 第69-70页 |
3.2 FCGRT在双峰驼扁桃体中的表达情况 | 第70-71页 |
3.3 PIGR在双峰驼扁桃体中的表达情况 | 第71页 |
4 讨论 | 第71-72页 |
5 小结 | 第72-73页 |
第三章 成年双峰驼扁桃体中pIgR和FcRn的细胞分布及其与黏膜免疫的关系 | 第73-114页 |
实验一 成年双峰驼扁桃体中pIgR的细胞分布及其与黏膜免疫的关系 | 第73-91页 |
1 材料与方法 | 第76-78页 |
1.1 材料 | 第76-77页 |
1.1.1 实验动物 | 第76页 |
1.1.2 药品与试剂 | 第76-77页 |
1.1.3 主要仪器设备 | 第77页 |
1.2 方法 | 第77-78页 |
1.2.1 样品采集 | 第77页 |
1.2.2 石蜡切片 | 第77-78页 |
1.2.3 间接免疫组织化学(SABC)染色 | 第78页 |
1.2.4 数据的获取及分析 | 第78页 |
2 结果 | 第78-89页 |
2.1 同一器官不同区域pIgR阳性细胞密度的比较 | 第84-87页 |
2.2 不同器官同一区域pIgR阳性细胞密度的比较 | 第87-89页 |
2.2.1 滤泡区 | 第87页 |
2.2.2 滤泡间区 | 第87页 |
2.2.3 上皮下区 | 第87页 |
2.2.4 网状上皮下区 | 第87页 |
2.2.5 腺体周围区 | 第87-89页 |
3 讨论 | 第89-90页 |
4.小结 | 第90-91页 |
实验二 成年双峰驼扁桃体中FcRn的细胞分布及其与黏膜免疫的关系 | 第91-107页 |
1 材料与方法 | 第93-94页 |
2 结果 | 第94-104页 |
2.1 同一器官不同区域FcRn阳性细胞密度的比较 | 第99-102页 |
2.2 不同器官同一区域FcRn阳性细胞密度的比较 | 第102-104页 |
2.2.1 滤泡区 | 第102页 |
2.2.2 滤泡间区 | 第102页 |
2.2.3 网状上皮下区 | 第102-103页 |
2.2.4 腺体周围区 | 第103-104页 |
2.2.5 上皮下区 | 第104页 |
3 讨论 | 第104-106页 |
4 小结 | 第106-107页 |
实验三 成年双峰驼扁桃体同部位pIgR和FcRn阳性细胞的分布及其与黏膜免疫的关系 | 第107-114页 |
1 材料与方法 | 第109页 |
2 结果 | 第109-111页 |
2.1 同器官同区域pIgR和FcRn阳性细胞密度比较 | 第109-111页 |
2.1.1 腭扁桃体 | 第109页 |
2.1.2 咽扁桃体 | 第109页 |
2.1.3 会厌扁桃体 | 第109页 |
2.1.4 软腭扁桃体 | 第109-110页 |
2.1.5 咽鼓管扁桃体 | 第110页 |
2.1.6 舌扁桃体 | 第110-111页 |
3 讨论 | 第111-112页 |
4 小结 | 第112-114页 |
第三部分 全文结论 | 第114-116页 |
参考文献 | 第116-140页 |
致谢 | 第140-142页 |
作者简介 | 第142-144页 |
导师简介 | 第144-145页 |