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环氧合酶-2基因抑制对食管鳞癌花生四烯酸代谢通路的影响

一 中文摘要第1-6页
二 ABSTRACT第6-8页
三 英文缩略词表第8-9页
四 引言第9-11页
五 材料与方法第11-22页
 1. 材料第11-14页
   ·细胞株与主要试剂第11-14页
   ·主要仪器和设备第14页
 2. 实验方法第14-21页
   ·TE-1 及Eca109 细胞培养第14-15页
     ·细胞生长条件第14-15页
     ·细胞传代第15页
   ·siRNA 转染第15-17页
     ·实验分组第15-16页
     ·si RNA 准备第16页
     ·si RNA 转染步骤第16-17页
   ·CCK8 法检测细胞增殖第17页
   ·RT-PCR 检测COX-2、5-LOX、Bcl-2、Caspase-9 及Bax mRNA 表达第17-19页
     ·总RNA 的抽提第17页
     ·逆转录反应第17-18页
     ·PCR 反应第18-19页
     ·转录PCR 产物的检测第19页
   ·Western Blotting 检测COX-2、5-LOX、Bcl-2、Caspase-9 及Bax 蛋白表达第19-20页
     ·蛋白质的抽提第19-20页
     ·蛋白浓度测定第20页
     ·Western Blotting 分析第20页
   ·ELISA 检测PGE2 及LT84 含量第20-21页
   ·流式细胞仪检测细胞周期第21页
 3. 数据处理第21-22页
六 结果第22-39页
 1. 高抑制效率COX-2 siRNA 序列的筛选第22-24页
 2. 转染COX-2 siRNA 后TE-1 及Eca109 细胞增殖情况第24-25页
 3.C OX-2 siRNA 转染后对TE-1 及Eca109 细胞COX-2 及5-LOX 表达的影响第25-26页
   ·COX-2 siRNA 转染后COX-2 mRNA 及蛋白表达情况第25-26页
   ·COX-2 siRNA 沉默后5-LOX mRNA 表达情况第26页
 4.C OX-2 及5-LOX 下游产物PGE2 和LT84 含量变化第26-29页
 5.流式细胞仪检测细胞周期变化第29-33页
 6.Bcl-2、Caspase-9 及Bax mRNA 及蛋白表达水平变化第33-39页
七 讨论第39-43页
 1. 以RNA 干扰技术实现ESCC 细胞的COX-2 基因沉默第39-40页
 2.C OX-2 siRNA 干预后的ESCC 细胞5-LOX 表达第40-41页
 3.C OX-2 siRNA 抑制后ESCC 细胞的细胞周期改变第41页
 4.C OX-2 siRNA 处理后ESCC 细胞增殖凋亡主要相关基因的表达第41-42页
 5.C OX-2 基因抑制与AA 代谢分流调节第42-43页
八 全文结论第43-47页
九 致谢第47-48页
十 综述第48-56页
 参考文献第53-56页
十一、附录第56页
 1. 硕士研究生学习期间发表的论著第56页
 2. 硕士研究生学习期间参与专著编写情况第56页
 3. 硕士研究生学习期间论文获奖情况第56页
 4. 硕士研究生学习期间获得荣誉第56页

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