中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 引言 | 第12-24页 |
1.1 甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂概述 | 第12-15页 |
1.1.1 甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的作用机理 | 第13页 |
1.1.2 吡唑醚菌酯的理化性质及应用 | 第13-14页 |
1.1.3 氟嘧菌酯的理化性质及应用 | 第14-15页 |
1.2 甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的生态毒理效应研究 | 第15-16页 |
1.3 指示生物—蚯蚓在毒理学研究中的应用 | 第16-17页 |
1.4 本实验各项研究指标概述 | 第17-21页 |
1.4.1 活性氧自由基(ROS)概述 | 第17-19页 |
1.4.1.1 ROS的产生 | 第17-18页 |
1.4.1.2 ROS对生物体的影响 | 第18页 |
1.4.1.3 ROS的清除 | 第18-19页 |
1.4.2 抗氧化酶系(SOD、CAT和POD)概述 | 第19-20页 |
1.4.3 谷胱甘肽硫转移酶(GST)概述 | 第20页 |
1.4.4 丙二醛(MDA)概述 | 第20-21页 |
1.4.5 单细胞凝胶电泳(SCGE)概述 | 第21页 |
1.5 本文研究内容 | 第21-24页 |
2 材料与方法 | 第24-36页 |
2.1 药品试剂 | 第24-25页 |
2.2 仪器设备 | 第25页 |
2.3 赤子爱胜蚓选取及染毒方式 | 第25-26页 |
2.3.1 供试土壤 | 第25-26页 |
2.3.2 染毒浓度及染毒时间 | 第26页 |
2.3.3 染毒方式 | 第26页 |
2.4 蚯蚓体内各指标的测定 | 第26-35页 |
2.4.1 蚯蚓体内ROS含量测定 | 第26-27页 |
2.4.1.1 试剂配制 | 第26-27页 |
2.4.1.2 蚯蚓线粒体悬浮液的制备 | 第27页 |
2.4.1.3 ROS测定方法 | 第27页 |
2.4.2 蚯蚓组织匀浆液的制备及蛋白含量的测定 | 第27-29页 |
2.4.2.1 蚯蚓组织匀浆液的制备 | 第28页 |
2.4.2.2 蛋白标准曲线的绘制方法及测定 | 第28-29页 |
2.4.2.3 匀浆液蛋白含量的测定 | 第29页 |
2.4.3 蚯蚓体内SOD活性测定 | 第29-30页 |
2.4.3.1 SOD试剂配制 | 第29页 |
2.4.3.2 SOD比活力的测定 | 第29-30页 |
2.4.3.3 结果与计算 | 第30页 |
2.4.4 蚯蚓体内CAT活性测定 | 第30页 |
2.4.4.1 CAT试剂配制 | 第30页 |
2.4.4.2 CAT比活力的测定 | 第30页 |
2.4.4.3 结果与计算 | 第30页 |
2.4.5 蚯蚓体内POD活性测定 | 第30-31页 |
2.4.5.1 POD试剂配制 | 第30-31页 |
2.4.5.2 POD比活力的测定 | 第31页 |
2.4.5.3 结果与计算 | 第31页 |
2.4.6 蚯蚓体内GST活性测定 | 第31-32页 |
2.4.6.1 GST试剂配制 | 第31页 |
2.4.6.2 GST活性测定 | 第31-32页 |
2.4.6.3 GST结果与计算 | 第32页 |
2.4.7 蚯蚓体内MDA含量测定 | 第32页 |
2.4.7.1 MDA试剂配制 | 第32页 |
2.4.7.2 MDA含量测定 | 第32页 |
2.4.7.3 MDA结果与计算 | 第32页 |
2.4.8 蚯蚓的体腔细胞DNA损伤的测定 | 第32-35页 |
2.4.8.1 彗星实验试剂的配制 | 第32-34页 |
2.4.8.2 蚯蚓体腔细胞的制备 | 第34页 |
2.4.8.3 单细胞凝胶电泳实验 | 第34-35页 |
2.5 数据处理 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-50页 |
3.1 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对蚯蚓ROS含量的影响 | 第36-37页 |
3.2 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对蚯蚓体内抗氧化酶的活性的影响 | 第37-41页 |
3.2.1 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对蚯蚓体内SOD活性的影响 | 第37-38页 |
3.2.2 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对蚯蚓体内CAT活性的影响 | 第38-40页 |
3.2.3 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对蚯蚓体内POD活性的影响 | 第40-41页 |
3.3 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对蚯蚓体内GST活性的影响 | 第41-43页 |
3.4 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对蚯蚓体内MDA含量的影响 | 第43-44页 |
3.5 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对蚯蚓DNA损伤程度的影响 | 第44-46页 |
3.5.1 彗星图像 | 第44-45页 |
3.5.2 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对蚯蚓的体腔细胞DNA损伤程度的影响 | 第45-46页 |
3.6 各指标双因素方差分析 | 第46-50页 |
3.6.1 吡唑醚菌酯暴露下各指标双因素方差分析 | 第46-48页 |
3.6.2 氟嘧菌酯暴露下各指标双因素方差分析 | 第48-50页 |
4 讨论 | 第50-57页 |
4.1 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对蚯蚓的氧化胁迫效应 | 第50-52页 |
4.1.1 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对蚯蚓体内ROS含量的影响 | 第50-51页 |
4.1.2 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对蚯蚓抗氧化酶的活性的影响 | 第51-52页 |
4.2 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对蚯蚓GST活性的影响 | 第52-53页 |
4.3 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对蚯蚓MDA含量的影响 | 第53-54页 |
4.4 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对蚯蚓的体腔细胞DNA的损伤 | 第54-55页 |
4.5 各个测定指标间的相关性 | 第55-57页 |
5 结论 | 第57-59页 |
6 本论文创新及不足之处 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第68页 |