| 摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第12-25页 |
| 1.1 草甘膦概述 | 第12-16页 |
| 1.1.1 草甘膦的性质及作用机理 | 第12-14页 |
| 1.1.2 草甘膦在植物体内的吸收与传导 | 第14-15页 |
| 1.1.3 草甘膦的抗性机制 | 第15-16页 |
| 1.1.4 草甘膦的应用及发展 | 第16页 |
| 1.2 龙葵的研究现状 | 第16-17页 |
| 1.2.1 龙葵的生物学特性 | 第17页 |
| 1.2.2 龙葵的防除技术 | 第17页 |
| 1.3 杂草对草甘膦的抗性研究 | 第17-20页 |
| 1.3.1 杂草抗性的发生与发展 | 第17-19页 |
| 1.3.2 抗草甘膦杂草的研究现状 | 第19页 |
| 1.3.3 草甘膦对植物生理的影响 | 第19-20页 |
| 1.4 EPSPS基因的研究 | 第20-21页 |
| 1.5 RACE结合法从cDNA文库中克隆基因 | 第21-23页 |
| 1.5.1 RACE结合法概述 | 第21页 |
| 1.5.2 RACE结合法原理 | 第21-23页 |
| 1.6 研究内容 | 第23页 |
| 1.7 研究目的与意义 | 第23-24页 |
| 1.8 技术路线 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-39页 |
| 2.1 试验材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 供试龙葵种子 | 第25页 |
| 2.1.2 供试除草剂 | 第25页 |
| 2.1.3 供试药品 | 第25页 |
| 2.1.4 供试土壤 | 第25-26页 |
| 2.1.5 试验仪器 | 第26页 |
| 2.2 龙葵对草甘膦的生理反应测定 | 第26-29页 |
| 2.2.1 ED_(50)值的测定 | 第26页 |
| 2.2.2 莽草酸含量测定 | 第26-28页 |
| 2.2.3 叶绿素含量测定 | 第28页 |
| 2.2.4 光合速率测定 | 第28-29页 |
| 2.3 RACE方法克隆龙葵EPSPS基因 | 第29-38页 |
| 2.3.1 引物设计与合成 | 第29-30页 |
| 2.3.2 RNA的提取 | 第30-31页 |
| 2.3.3 基因组RNA质量及纯度检测 | 第31页 |
| 2.3.4 第一链cDNA的合成 | 第31-32页 |
| 2.3.5 龙葵EPSPS基因调取 | 第32-35页 |
| 2.3.6 PCR产物 3’RACE的连接，转化和阳性克隆的鉴定及测序 | 第35-37页 |
| 2.3.7 PCR产物 5’RACE的连接，转化和阳性克隆的鉴定及测序 | 第37-38页 |
| 2.3.8 EPSPS全长cDNA序列的获取和序列分析 | 第38页 |
| 2.4 数据统计和分析方法 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-53页 |
| 3.1 草甘膦对龙葵的生理影响 | 第39-45页 |
| 3.1.1 ED_(50)值 | 第39页 |
| 3.1.2 草甘膦对龙葵莽草酸含量的影响 | 第39-41页 |
| 3.1.3 草甘膦对龙葵鲜重和干重的影响 | 第41-43页 |
| 3.1.4 草甘膦对龙葵叶绿素含量的影响 | 第43页 |
| 3.1.5 草甘膦对龙葵光合速率的影响 | 第43-45页 |
| 3.2 龙葵EPSPS基因的 3’RACE和 5’RACE | 第45-53页 |
| 3.2.1 龙葵总RNA的提取 | 第45页 |
| 3.2.2 龙葵EPSPS中间片段EST | 第45-46页 |
| 3.2.3 龙葵EPSPS基因 3’RACE和 5’RACE克隆 | 第46页 |
| 3.2.4 龙葵EPSPS基因全长cDNA序列生物信息学分析 | 第46-53页 |
| 4 讨论 | 第53-56页 |
| 4.1 草甘膦对龙葵的生理影响 | 第53页 |
| 4.2 龙葵EPSPS基因的克隆 | 第53-54页 |
| 4.3 龙葵对草甘膦的抗性机理 | 第54-56页 |
| 5 结论 | 第56-57页 |
| 5.1 草甘膦对龙葵的生理影响 | 第56页 |
| 5.2 EPSPS基因的克隆与序列分析 | 第56页 |
| 5.3 龙葵对草甘膦的抗性机理 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第65页 |
