| 摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-22页 |
| 1.1 水稻矮缩病的分布、症状、危害 | 第12页 |
| 1.2 病毒分类地位与粒体结构 | 第12-13页 |
| 1.3 RDV基因组主要功能 | 第13-15页 |
| 1.3.1 结构蛋白 | 第13-14页 |
| 1.3.2 非结构蛋白 | 第14-15页 |
| 1.4 RDV的传播特性 | 第15页 |
| 1.5 RDV对寄主水稻和黑尾叶蝉的侵染 | 第15-16页 |
| 1.6 RDV在介体内的扩散机制 | 第16-18页 |
| 1.6.1 RDV侵染叶蝉培养细胞 | 第16-17页 |
| 1.6.2 RDV侵染介体昆虫 | 第17-18页 |
| 1.6.3 介体传毒专化性 | 第18页 |
| 1.7 参与病毒扩散的介体互作蛋白 | 第18-19页 |
| 1.8 卵黄原蛋白(vitellogenin,Vg) | 第19-20页 |
| 1.9 原肌球调节蛋白(tropomodulin, Tmod) | 第20-21页 |
| 1.10 本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-40页 |
| 2.1 材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 传播介体及其培养细胞,RDV毒株和抗体 | 第22页 |
| 2.1.2 菌株和载体质粒 | 第22页 |
| 2.1.3 主要实验试剂和仪器 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-38页 |
| 2.2.1 Trizol法提取携带RDV水稻叶片/虫体总RNA | 第23页 |
| 2.2.2 候选介体蛋白与Pns10基因片段获取 | 第23-25页 |
| 2.2.3 酵母双杂交系统筛选黑尾叶蝉库cDNA文库 | 第25-28页 |
| 2.2.4 BiFC验证Pns10与候选蛋白互作 | 第28-30页 |
| 2.2.5 本氏烟共表达系统验证Pns10与候选蛋白互作 | 第30页 |
| 2.2.6 Tmod抗体制备 | 第30-33页 |
| 2.2.7 GST-Pull down验证候选蛋白与Pns10互作 | 第33-34页 |
| 2.2.8 免疫荧光实验标记候选蛋白与Pns10 | 第34-35页 |
| 2.2.9 候选蛋白dsRNA在介体内诱导的RNAi | 第35-38页 |
| 2.3 实验引物 | 第38-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-58页 |
| 3.1 酵母双杂交技术筛选黑尾叶蝉cDNA文库 | 第40-41页 |
| 3.2 候选介体蛋白与RDV Pns10的互作验证 | 第41-44页 |
| 3.2.1 BiFC验证Pns10与候选蛋白互作 | 第41-43页 |
| 3.2.2 本氏烟共表达系统验证Pns10与候选蛋白互作 | 第43-44页 |
| 3.3 RDV对候选蛋白基因的影响 | 第44-45页 |
| 3.4 Tmod与Pns10互作 | 第45-54页 |
| 3.4.1 Tmod的序列分析 | 第45-46页 |
| 3.4.2 Tmod抗体制备 | 第46-48页 |
| 3.4.3 GST-Pull down验证Tmod与Pns10互作 | 第48-49页 |
| 3.4.4 Pns10与Tmod在介体内互作 | 第49-52页 |
| 3.4.5 Tmod正调控Pns10的表达 | 第52-54页 |
| 3.5 Vg与Pns10互作 | 第54-58页 |
| 3.5.1 Vg的序列分析 | 第54-56页 |
| 3.5.2 GST-Pull down验证Vg与Pns10互作 | 第56页 |
| 3.5.3 Vg与Pns10在培养细胞和黑尾叶蝉卵巢上共定位的初步观察 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 攻读硕士学位期间参与发表的学术论文 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
